内容正文:
在农业上,我们的祖先也掌握了制作堆肥和厩肥的技术,他们能利用微生物的发酵作用,将有机质转化成为简单的、可供植物吸收的营养物质。这一技术在北魏时期的农业巨著《齐民要术》中已有详细记载。
由于古人没有认识到微生物与发酵的确切关系,所以传统发酵技术基本都是发酵经验的总结。
第一节 微生物的培养需要适宜条件
1.说出培养基的成分及分类,了解常用培养基的用途。
2.阐明无菌技术的方法及用途。
3.学会配制培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基的操作方法。
[主干知识梳理]
一、微生物培养的条件与无菌技术
1.微生物
(1)定义:是人们对所有形体微小、______不可见的生物的统称。
(2)微生物培养的基本要求
一方面需要提供其适宜的生长环境,另一方面需要除掉与___________具有竞争和寄生关系的异种微生物。
肉眼
目标微生物
(3)细菌与霉菌对培养条件的需求
细菌喜荤碱 培养基中需要含有较高的_______,常用_______和酵母提取物等来配制,pH调至__________
霉菌喜素酸 培养基一般用___________加无机物配制,或用添加______的豆芽汁等配制,pH调至__________
2.无菌技术
在培养某种微生物时,防止____________混入,保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术。
有机氮
蛋白胨
中性偏碱
可溶性淀粉
蔗糖
中性偏酸
其他微生物
二、培养基的成分和分类
1.培养基的概念:人们为满足微生物_________或积累代谢产物的需求而配制的混合养料。
2.培养基的营养构成:水、无机盐、_____、 _____及__________等。
3.微生物能量来源
微生物类型 来源
自养生物 ________________________的能量
异养生物 培养基中的_______
生长繁殖
碳源
氮源
生长因子
光能或者是化学反应释放
有机物
4.培养基的分类
标准 培养基种类 培养基特点 作用
物理
特征 液体培养基 _____________ 常用于大规模快速繁殖某种微生物
固体培养基 加凝固剂,如琼脂 微生物的____________、活菌______、菌种保存等
化学成分 ___________ 化学成分完全清楚 一般用于实验室进行的、要求可重复性强的各种研究工作
天然培养基 含化学成分不明确或不恒定的天然有机物 更多地被用于大规模的生物发酵工业
不加凝固剂
分离、鉴定
计数
合成培养基
三、灭菌和无菌操作
1.原理:微生物细胞是由蛋白质、核酸等化学物质构成的,因此改变微生物所处环境的______或者化学因素就可抑制微生物的生长甚至将它们杀死。例如,加热可以使________变性,波长在256~266 nm的紫外线可使菌体的_______和______变性。
2.常见无菌操作
(1)对于培养皿、试管、三角瓶、移液管、镊子等常采用__________法灭菌。
(2)对于不能加热灭菌的化合物,如尿素等,只能用______________过滤除菌。
(3)实验操作过程中,一般采用______对接种环和涂布器进行灭菌。
(4)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在______________进行。
物理
蛋白质
蛋白质
核酸
高压灭菌
G6玻璃砂漏斗
灼烧
酒精灯火焰旁
3.烘箱与超净工作台的使用
(1)烘箱用于高压灭菌后,将__________烘干除水,避免金属器械锈蚀。
(2)超净工作台具有________和过滤风,可进行灭菌、微生物接种等操作。
4.培养基分装与微生物接种
(1)培养基分装:将三角瓶中的培养基转移至培养皿中。
(2)微生物接种
工具 接种环、涂布器
要求 靠近______的火焰,减少空气中微生物落入培养基的可能;减少各种器皿__________的时间和机会,防止非目标微生物落入导致污染
实验器具
紫外灯
酒精灯
敞口向上
四、配制马铃薯蔗糖培养基的基本步骤及注意事项
1.基本操作步骤
斜面
2.操作注意事项
制备斜面
培养基
操作要求 ①注意控制好______,防止培养基提前凝固;
②不要让_______粘在试管口;
③试管中的液体量约为试管长度的_____
制作
棉塞时的
注意事项 ①棉塞的长度:要保证既塞住瓶口,在瓶口外又要留有一定的长度,方便在接种时用无名指、小拇指取下来;
②棉塞的粗细:要适当,以不易脱落为度;
③棉塞应该使用普通棉花,不能使用医用的脱脂棉
斜面
培养基
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[预习效果自评]
1.判断下列说法的正误
(1)培养基中的营养物质浓度越高对微生物的繁殖越有利。 ( )
提示:培养基中的任何物质都需要根据所培养的微生物的需求进行添加,物质浓度过高会影响微生物的生长、繁殖。
(2)科研人员在超净工作台上进行接种