内容正文:
第一节 体液调节是通过化学信号实现的调节
第一章 发酵工程
发酵工程是直接利用微生物的工作过程。
微生物是人们对所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。
微生物的培养需要什么条件?
微生物
原核类:
非细胞类生物——病毒
细菌、支原体、放线菌、蓝细菌、衣原体
酵母菌、霉菌
真 菌:
动物、植物、原生生物
真核类
目 录
培养基
灭菌和无菌操作技术
配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基
第一节 微生物的培养需要适宜条件
菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,形成的肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体。
①适宜的生长环境
②防止其他微生物混入
培养基
无菌技术
自然界微生物种类多,分布广,常杂居混生
如何获得纯净培养物?
一、培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
1.概念:人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需求而配置的混合养料。
培养基
⑴成分:
水、无机盐、碳源、氮源、(生长因子)
a.碳源
无机碳源:
有机碳源:
CO2
酵母提取物、蛋白胨等
自养微生物
异养微生物
b.氮源
无机氮源:
有机氮源:
N2、NH3、NH4+、NO3-等
酵母提取物、蛋白胨、尿素等
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等
2、培养基的成分:
如:酵母提取物、蛋白胨既可以为异养微生物提供碳源、氮源也可以提供维生素(生长因子)。
不同微生物生长所需的培养基成分有差别。
细菌喜荤,霉菌喜素
细菌培养基:常用蛋白胨和酵母提取物等配制;将培养基PH值调至中性偏碱。
霉菌培养基:常用可溶性淀粉加无机物配制,或用添加蔗糖的豆芽汁等配制;将培养基PH值调至中性偏酸。
细菌喜碱,霉菌喜酸
培养基的理化特征影响微生物的生长
厌氧微生物:需提供无氧条件
维持渗透压
思考:NaCl和磷酸二氢钾(无机盐)的作用是______________ 。
(1)根据物理特性分
液体培养基:液体状,没加凝固剂。
固体培养基:固体状,加了凝固剂(一般是琼脂)。
3、培养基的类型:
琼脂是由海藻中提取的多糖体,其特点是具有凝固性、稳定性等物理化学性质.广泛用于制造粒粒橙及各种饮料、果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、肉制品、八宝粥、银耳燕窝、羹类食品、凉拌食品等等。琼脂仅作为凝固剂不为微生物生长提供能量和碳源。98 ℃以上熔化,44 ℃以下凝固。
“平板”(菌落) 可用于分离、鉴定、活菌计数
“斜面”常用于菌种保存
液体培养基:常用于大规模快速繁殖某种微生物。
固体培养基
思考:
大肠杆菌在液体培养基和固体培养基中的繁殖速度是否相同?
不相同。
由于细胞与固体培养基的接触面积较小,细胞与环境间物质交换速度相对较慢,培养基表面的微生物生长速度比在液体培养基中慢。
(2)根据化学成分分
合成培养基:成分明确,用于实验室
天然培养基:成分不明确,成本较低,多被用于大规模工厂生产如:马铃薯蔗糖培养基、麦芽汁蔗糖培养基等
3、培养基的类型:
如:高氏1号(常用于培养、分离放线菌)
成分:可溶性淀粉20g、KNO3 1g、NaCl 0.5g、K2HPO4·3H2O 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,FeSO4·7H2O 0.01g,琼脂15 ~ 20g,蒸馏水1000mL,pH 7.2~7.4。
(3)根据用途分
①选择培养基:在普通培养基中添加或减少某种化学成分,允许特定微生物的生长,抑制不需要的微生生长。用于菌种的分离 。
3、培养基的类型:
选择培养基
如何选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
LB培养基
所有的细菌都能生长
培养基中加氨苄青霉素
没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰
培养基+氨苄青霉素
具有抗氨苄青霉素能力的菌落
(3)根据用途分
①选择培养基:在普通培养基中添加或减少某种化学成分,允许特定微生物的生长,抑制不需要的微生生长。用于菌种的分离 。
②鉴别培养基:在普通培养基中添加某种指示剂或化学药品,用于菌种的鉴定。
如:加酚红的以尿素为唯一氮源的培养基能鉴定是否有分解尿素的细菌以及分解尿素的能力。
3、培养基的类型:
二、灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰
1.目的:获得纯净的微生物培养物。
2.关键:防止杂菌污染。
3.无菌操作技术
(1)概念:
(3)手段:
(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(2)目的:
(1)防止培养物被污染--获得纯净的微生物培养物
(2)防止感染实验操作者
防止杂菌污染的培养微生物的操作技术
主要包括消毒和灭菌
①灼烧灭菌--接种环
(1)灭菌
接种环
使用强烈的理化因素,能杀死微生物繁殖体和芽孢等全部微生物。
适用于微生物的接种工具,如涂布器、接种环、接种针或其它金属用具,试管口、瓶口等容易被污