内容正文:
第3节 DNA的复制
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著名短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制。”
3.1 对DNA复制的推测
1.假说:遗传物质自我复制的假说——DNA以半保留的方式复制
2.提出者:沃森和克里克。
3.内容
①解旋:DNA复制时,DNA分子的双螺旋将解开,互补的碱基之间的氢键断裂。
②复制:解开的两条单链作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。
4.特点
新合成的每个DNA分子中,都保留了原来的DNA分子中的一条链,是半保留复制。
这一假说提出后,也有人持不同观点,提出全保留复制等不同假说。全保留复制是指DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是新合成的。
到底哪种假说正确呢?
3.2 DNA半保留复制的实验证据
DNA半保留复制的实验证据要证明DNA复制是半保留复制,就需要通过实验区分
亲代与子代的DNA。
1958年,美国生物学家梅塞尔森(M. Meselson,1930—)和斯塔尔(F. Stahl,1929-)以大肠杆菌为实验材料,运用同位素标记技术,设计了一个巧妙的实验。
1.实验材料:大肠杆菌。
2.实验方法:稳定性同位素标记法和密度梯度离心法。
3.实验原理:含15N的双链DNA分子密度大,含14N的双链DNA分子密度小,一条链含15N、一条链含14N的双链DNA分子密度居中。
4.实验假设:DNA分子以半保留方式复制
5.实验步骤
(1)利用含15N的培养基培养大肠杆菌多代,使其DNA双链被15N充分标记。
(2)将大肠杆菌转移到含14N的培养基中培养。
(3)在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA,将提取的DNA进行密度梯度离心。
(4)记录离心后试管中DNA的位置。
6.实验预期:离心后可能出现三种不同的DNA条带。
(1)重带(密度最大):两条链都为15N标记的亲代双链DNA。
(2)中带(密度居中):一条链为15N标记,另一条链为14N标记的子代双链DNA。
(2)轻带(密度最小):两条链都为14N标记的子代双链DNA。
6.实验过程示意图:
证明DNA复制方式的实验示意图
8.结果分析
科学家完成上述实验的结果是:亲代大肠杆菌的DNA经离心处理后,试管中只出现了一条DNA带,位置靠近试管的底部,说明其密度最大,是15N标记的亲代双链DNA(15N/15N-DNA);将转移培养后第一代细菌的DNA离心后,试管中也只有一条带,但位置居中,说明其密度居中,是只有一条单链被15N标记的子代双链DNA(15N/14N-DNA);将第二代细菌的DNA离心后,试管中出现两条带,一条带位置居中,为14N/14N-DNA,另一条带的位置更靠上,说明其密度最小,是两条单链都没有被15N标记的子代双链DNA(14N/14N-DNA)。
9.实验结论:DNA的复制是以半保留的方式进行的。
3.3 DNA分子复制的原理和过程
DNA的复制是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。在真核生物中,这一过程是在细胞分裂前的间期,随着染色体的复制而完成的。
1.DNA分子复制的时间、场所和条件
(1)时间:细胞分裂间期(一个细胞周期DNA只复制一次)
(2)场所:真核生物主要在细胞核(其次在线粒体、叶绿体),原核生物的拟核。
(3)条件
①模板:解旋后的两条DNA单链
②原料:4种游离的脱氧核苷酸
③能量:细胞呼吸产生的ATP(叶绿体内DNA复制,能量来自光合作用产生的ATP)
④酶:解旋酶和DNA聚合酶等
2. DNA分子复制的过程
复制开始时,在细胞提供的能量的驱动下,解旋酶将DNA双螺旋的两条链解开,这个过程叫作解旋。然后,DNA聚合酶等以解开的每一条母链为模板,以细胞中游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一条子链。随着模板链解旋过程的进行,新合成的子链也在不断延伸。同时,每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。这样,复制结束后,一个DNA分子就形成了两个完全相同的DNA分子。新复制出的两个子代DNA分子,通过细胞分裂分配到子细胞中。
DNA复制是一个边解旋边复制的过程,需要模板、原料、能量和酶等基本条件。DNA独特的双螺旋结构,为复制提供了精确的模板,通过碱基互补配对,保证了复制能够准确地进行。
DNA通过复制,将遗传信息从亲代细胞传递给子代细胞,从而保持了遗传信息的连续性。
①解旋:在解旋酶的作用下,氢键断裂,双螺旋逐渐解开
②合成:分别以两条母链为模板,以游离的脱氧核苷酸为原料,在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则,合成与母链互补的子链。
③螺旋化:子链与对应的母链绕成双螺旋结构,构成DNA分子。