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第四章
基因工程
第一节基因工程赋予生物新的遗传特性
第1课时基因工程的工具
活动:DNA的粗提取和鉴定
课程解读
知能目标
核心素养
认识物质的提取和鉴定是进行生物学研究的
1.概述基因工程的发展过程
基本方法,尝试进行DNA的粗提取与鉴定,
2.说明基因工程工具酶和载体的作用
学会物质提取与鉴定的基本方法
新教材·知本与思辨
一学科素养研速、知本、思辨
(见学生用书P68)
回知识点一基因工程是在多个生物学分支学科的基础上发展而来
1.基因工重组DNA技术)定义:有意识地把一个人们所需要的基因转入另一个生
物体中,使后者获得新的遗传性状或表达所需要产物的技术。
2.操作水平:分子水平。
3.基因工程诞生的理论基础包括:DNA是遗传物质的证明_、DNA双螺旋结构的发
现和“中心法则”的确立、遗传信息的传递和表达的机制_、_遗传密码的破详。
4.基因工程诞生的技术保障:一限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体的
发现与应用。其中,_限制性内切核酸酶和DNA连接酶为基因的分离和重组提供了必
要的手段,而载体能够将外源基因运送到细胞中。
5.基因工程核心技术:构建重组DNA分子。
小思考:基因工程操作导致的基因重组与有性生殖中的基因重组的主要区别是什么?
【答案】有性生殖中的基因重组是随机的,并且只能在同一物种内进行;基因工程可
以在不同物种间进行,并且方向性强,可以定向地改变生物的性状。
回知识点二对DNA进行剪切、连接和复制是实现重组DNA技术的基础
1.限制性内切核酸酶
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来源主要存在于细南等微生物中
作用厂
识别双链D八A上特定的一小段核符酸序列
催化其中特定的两个核苷酸之间的辞酸三
限制性
当退水解,使得DNA双链在特定的位置断开
识别通常是48个核苷酸对,以互个核苷酸对
序列最为常见
切
核
黏性末端专凸出的单链部分,如图
末骑
EcoRI
结果
江院A
图
平末端D八A末端没有单链部分,如图
装sel。
江品m
图
2.DNA连接例
可以将不同来源的2个DNA分子的双链通过
作用
醉载二键分别连接起来,形成一个稳定
的里组DNM分子
E.coli DNA
来遵大肠杆菌
DNA
连接酶
特点
仅能连接黏性末端
连
类型
来源
T4噬菌体
T4 DNA
连接醇
特点
既可以连接两个互补的粘
性末造,也可以连接两个
平来瑞
示意图
DNA连接南
3.载体
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含义具备自主复制能力的DNA分子
作用与外慕DA相连接并将其送人受体细胞中进行
扩增
含有复棋起点,能够独立自主复制并稳
定存在
具有的
含有一种或多种展制昏的识别序列,方
特征
便外源基因插人载体中
具有筛选作用的标记基因,以便能够通过
表型鉴别含有载体的细胞
本质独立于细菌拟核DNA之外的较小的
环状NA分子
质粒
种类
告多内资秋
基因也会控制细菌的某些性状
L有些动、植物病毒及噬菌体也可作为载体
小思考:要想获得某个特定性状的目的基因,必须要用限制酶切几个切口?可产生几个
黏性(平)末端?
【答案】要切2个切口,产生4个黏性(末端。
回知识点三活动:DNA的粗提取和鉴定
1.活动原理
(①)幼嫩的植物材料如果经过冷冻后再研磨,细胞结构容易被破坏。
(2)用十二烷基硫酸钠(SDS)处理材料,能使核蛋白变性并与DNA分离。
(3)乙二胺四乙酸二钠(EDTA)能抑制DNA酶活性,防止核DNA被酶解。
(4)DNA在2molM的NaCI溶液中溶解度高,且Na+与DNA形成钠盐。
(⑤)DNA钠盐不溶于酒精而某些蛋白质能溶于酒精_。
(⑥在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
2.活动步骤
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研麈:称取10g香蕉果肉,放入研体中,倒人10m1研磨
液,充分研磨
过越:在满斗中垫上尼龙纱布,将研磨液过滤人离心管中
高心:用天平称量装有液体的离心管的质量,将质量相近
的离心管配对,放置于离心机相对位置。以3000min的
转速离心2min,取上清液倒入小烧杯中
加海酒麓:向小烧杯中倒入体积是上清液两倍的冷酒精,
静置3-5min,可见白色的絮状物出现。用玻璃棒级缓搅
动,絮状物会缠在玻璃棒上
鉴定:取两支试管,一支试管中加人提取出的絮状能,并
加人2mL二苯胺试剂:另一支只加人2mL二苯胺试剂。
用95℃水浴锅加热10min,注意观察两支试管中