内容正文:
1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生
1978年7月25日世界首例试管婴儿
从试管牛说起
国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右
国际良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右
我国蒙古黄牛:均重300Kg
海福特肉用牛:2岁体重可达800Kg
存在的问题:
引进一头良种成年奶牛需要3万-5万牛的生育率低,一头牛一胎只一个,一生只能生育四五次
中国黄牛
平均体重
300公斤左右
国产奶牛
年均产奶量3000公斤左右
澳洲海福特牛
2岁时平均体重
800公斤左右
荷斯坦牛
年均产奶量10000公斤左右
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从试管牛说起
资源:牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右;公牛产生的精子数目就更多了。
设想:让采集的精子和卵母细胞在体外受精,得到很多个小胚胎,分别移植到多个本地牛体内“借腹怀胎”,实现良种牛大量快速繁殖。
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专题3 胚胎工程
3.2 体外受精和早期胚胎培养
内蒙古大学旭日干博士主持诞生中国第一胎“试管牛”
一、试管动物技术
1、概念
通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。
精子
卵子
体外受精
早期胚胎
子宫
试管动物
移植
①体外受精
②早期胚胎培养
③胚胎移植
2、过程
培养
3、应用:
优良动物品种的快速繁殖
试管婴儿:在早期胚胎发育到一定阶段后进行移植到代孕子宫,所以胚胎发育大部分时间都是在体内进行的。
二、体外受精
1、卵母细胞的采集和培养
(1)小型实验动物
思考:促性腺激素能口服吗?
如:鼠、兔、家畜猪、羊等
①用促性腺激素处理,使其排出更多卵子
之后从输卵管中冲取卵子
(超数排卵)
②直接与获能的精子在体外受精
不能,蛋白质类激素。
思考:能用性激素吗?
成本高、操作程序复杂、很少使用。
思考:对于大型家畜,如牛能用这种方法吗?
促性腺激素促进卵泡成熟,促进排卵。性激素是维持第二性征。
卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能 、受精
(已经发育到MⅡ中期具有受精能力)
性腺
垂体
性激素
促性腺激素
(一)
二、体外受精
1、卵母细胞的采集和培养
(2)大家畜/大型动物
如:牛
方式1:从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞
②需在在体外进行人工培养至其成熟,才能与获能的精子在体外受精
方式2:活体采卵:可以借助超声波(B超)探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具,直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞
①
按照目前的技术水平,一头健康母牛每周可获得5-10枚卵子。
活体采卵优点:
卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精
它对充分发挥优良母畜的繁殖能力具有重要意义。(P70第一段最后一行)
MⅡ中
超声波引导法
活体采集的牛卵母细胞
培养至MⅡ中期
卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱
(95%的空气和5%的CO2)
培养细胞时:
要注意温度、PH、营养物质、溶液浓度
二、体外受精
2、精子的采集和获能
(1)采集
假阴道法
手握法
电刺激法
大型动物(牛)
体型小、易控制(猪、犬)
野生或经济动物
(2)获能
使精子获得受精的能力
精液中精子没有受精能力的原因:
精液包括精子和精浆。精浆(清)中有去能因子,抑制精子受精的能力。
自然条件下精子的获能:
经过雌性生殖道时,生殖道的某种成分解除了去能因子的抑制作用。这种成分可叫做获能因子。
精子获能和Ca+内流有关:
Ca+内流进精子中,使Ca+浓度升高,激活精子顶体释放顶体酶,水解卵子外的放射冠和透明带,形成精子入卵的通道,使精子获得受精的能力。
卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精
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二、体外受精
2、精子的采集和获能
(1)采集
假阴道法
手握法
电刺激法
大型动物(牛)
体型小、易控制(猪、犬)
野生或经济动物
(2)获能
培养法
化学诱导法
模拟雌性生殖道的环境
精子在人工配置的获能液中获能
精子放于一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导获能
(牛、羊)
使精子获得受精的能力
(啮齿类动物、兔、猪)
使Ca+流入精子中,获能
卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精
二、体外受精
3、受精
获能的精子和培养成熟的卵子,在获能溶液或专用受精溶液中,共同培养一段时间完成受精过程。
受精标志
受精完成标志
在透明带和卵细胞膜间隙观察到两个极体
雌雄原核融合
1、提高精子的浓度
2、精清中含有一种能抑制精子获能的物质。离心可以使精子和精清分离。
模拟的是输卵管中的环境
项目 自然受精 人工授精 体外受精
不同
过程 雌雄动物交配完成 用人工的方法将公畜的精液注入母畜生殖道内,完成受精 人工获取精子、卵子,在体外培养液中完成