内容正文:
一、体外受精和早期胚胎培养
01
学习目标
1.复习体内受精和早期胚胎发育
2.说出卵母细胞、精子的采集和培养方法。
3.简述体外受精技术的主要操作步骤。
4.概述动物早期胚胎培养的方法。
存在困难:
1、引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元
2、牛的生育率低,一头牛一胎只一个,一生只能生育四五次。(牛的妊娠期约280天)
如何解决牛低生育率的问题?
牛刚出生时,每侧卵巢大约含有15万个卵泡,每个卵泡内都有一个初级卵母细胞。出生后能够发育成熟排卵的卵泡只有200个左右,一生产下犊牛4-5头。其他哺乳动物的情况相似,可见哺乳动物一生中卵母细胞的有效利用率很低。
采集许多精子和卵母细胞在体外受精,得到很多个小胚胎,分别移植到多个“本地牛”体内,生出多个优良动物品种。
——试管动物技术
一、试管动物技术
通过 使卵子和精子在 下成熟和受精,并通过培养发育为 后,再经 产生后代的技术。
体外条件
早期胚胎
1、概念:
移植
2、主要技术手段:
体外受精、早期胚胎的培养、胚胎移植
人工操作
3、意义:
实现良种动物快速大量繁殖
解决动物生育率低的问题
卵母细胞的采集
培养
成熟卵母细胞
精子的采集
获能处理
获能的精子
受精
受精卵
卵母细胞的采集
精子的获取
受精
二、体外受精过程
主要包括 、 和 等几个主要步骤。
过程:
本质:与体内受精本质相同,不过是场所不同,即为有性生殖。
1)卵母细胞的采集和培养
方法一:输卵管采卵(冲取卵子)
方法:用 处理,使其排出更多的卵子,从 中冲取卵子。
适合实验动物(兔、鼠)以及家畜猪、羊等。
垂体
促性腺激素
分泌
(+)
卵巢中卵泡
发育成熟
排卵
讨论1:超数排卵处理中为什么使用的是促性腺激素而不是性激素?
性激素是由性腺产生并释放的,长期使用外源性激素会导致性腺萎缩。促性腺激素由垂体产生并释放,作用于性腺,可以促进排卵,并且不会使性腺萎缩。
讨论2:超数排卵处理中促性腺激素可不可以口服?
只能注射不能饲喂,因为促性腺激素是肽类化合物,饲喂会因消化道的消化作用而失去原有的功效
获得的卵子可以直接与获能精子在体外受精吗?
1)卵母细胞的采集和培养
超数排卵
方法一:输卵管采卵(冲取卵子)
方法:用 处理,使其排出更多的卵子,从 中冲取卵子。
适合实验动物(兔、鼠)以及家畜猪、羊等。
处理:可直接与 的精子在体外受精。
1)卵母细胞的采集和培养
方法二:卵巢采卵
方法:1.屠宰动物卵巢取卵
从 中采集卵母细胞。
大型动物牛等
牛卵巢
牛卵巢取卵
2.活体取卵
借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等仪器,直接从活体动物 中吸取卵母细胞。
1)卵母细胞的采集和培养
方法二:卵巢采卵
方法:1.屠宰动物卵巢取卵
大型动物牛等
2.活体取卵
处理:体外培养成熟至 后才能与获能的精子受精
减数第二次分裂中期
获得的卵子可以直接与获能精子在体外受精吗?
讨论3:由超数排卵处理采集的卵母细胞为什么可直接与获能的精子受精?从卵巢中采集的卵子为什么不能与获能精子直接受精?
由超数排卵处理采集的卵母细胞已在体内发育成熟,不需培养可直接与获能的精子受精;卵巢中卵子不成熟,需要培养到减数第二次分裂中期时才具有受精能力。
采集对象 采集部位 采集方法 细胞培养
小型动物
大型动物
输卵管
卵巢
卵巢
给供体注射促性腺激素,促进多排卵之后从输卵管中冲取卵子。
摘取刚屠宰动物的卵巢,并从中采集卵母细胞。
借助超声波(B超)探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具,直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。
不需要,直接用于受精。
需要
1).卵母细胞的采集和培养
2).精子细胞的采集和获能
(1)精子的采集方法:
假阴道法:
手握法:
电刺激法:
大家畜或大型动物
猪、犬等体型较小,易于控制的动物
野生或经济动物
(2)精子的获能:
方法 操作过程 适用动物
培养法 将精子放入人工配制的获能液中使其获能 啮齿动物、家兔及猪等动物
化学
诱导法 将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导精子获能 牛、羊等家畜
3).受精
获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下