内容正文:
3.2 体外受精和
早期胚胎培养
你听过试管婴儿吗?
试管婴儿是从试管中长出来的吗?
还是 ……???
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试管婴儿
1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯.布朗”在英国诞生,现已成为母亲。
试管牛
我国首例转基因试管牛“滔滔”于1999年2月19日在上海诞生
一、试管动物技术
是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经胚胎移植产生后代的技术。
试管动物技术目的:
快速繁殖动物优良品种
试管牛的培育流程图
采集牛的精子
采集牛的卵母细胞
体外受精
试管牛
本地牛
小胚胎
体外受精
早期胚胎培养
胚胎移植
主要包括 、 和
等几个主要步骤 。
二、体外受精
卵母细胞的采集
精子的获取
受精
体外受精是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
1、卵母细胞的采集和培养
对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。
①实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等卵细胞的采集:
最常用的方法是给供体注射 ,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。
(超数排卵)
促性腺激素
输卵管
②大家畜或大型动物,如牛,卵母细胞的采集:
从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞,也可以借助 、 或
等工具确定卵泡位置,直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。
卵巢
超声波探测仪
内窥镜
腹腔镜
采集的卵母细胞,都要在体外进行人工培养成熟后,才能与获能的精子受精。
电子内窥镜
腹腔镜
牛活体采卵示意图
卵巢
吸卵针
超声波探头
卵母细胞
超声波显示屏
真空泵
卵泡
(1)从活体卵巢中采集卵母细胞:
采集的卵母细胞需要在体外培养成熟后再与获能的精子受精
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牛卵巢
牛卵母细胞
(2)从屠宰后母畜卵巢上采集卵母细胞 :
采集的卵母细胞需要在体外培养成熟后再与获能的精子受精
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要在体外将采集的卵母细胞在实体显微镜下经过挑选和洗涤,放入成熟培养液中培养。才能与获能的精子受精。
思考:从卵巢采集的卵母细胞是否马上可以受精?
归纳:卵母细胞的采集和培养
分类 采集方法
实验动物(如鼠、兔)
小型家畜(如猪、羊) 注射促性腺激素后从输卵管中冲取“卵子”---直接与获能的精子受精
大家畜或大型动物
(如牛) 从刚屠宰母畜或活体动物的卵巢中采集卵母细胞(需要再培养)
2.精子的采集和获能
收集精子的方法有:
假阴道法
手握法
电刺激法
适用于牛、马等体型较大的家畜
适用于猪、犬等体型较小的家畜
适用于野生或经济动物
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在体外受精前,要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。
对于 、 和 的精子,一般采用培养法;对于 、 等家畜的精子常用化学法。
培养法:精子在获能液中获能。
化学诱导法:精子一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导获能。
培养法
化学诱导法
啮齿动物
家兔
猪
牛
羊
3.体外受精
获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下在 或
中完成受精过程。
获能溶液
专用受精溶液
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三、胚胎的早期培养
发育培养液成分:无机盐、有机盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、水、血清等
目的:
检查受精状况和受精卵发育能力
比较胚胎的早期培养液与动物细胞培养液
项目 动物胚胎培养液的 动物细胞培养液
盐类
营养物质
调节物质
特有成分
无机盐、有机盐
无机盐、微量元素
氨基酸、核苷酸等
糖、氨基酸等
维生素、激素
促生长因子
血清
血清、血浆
不同动物胚胎移植时间不同
牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段
小鼠、家兔:卵裂期或囊胚阶段
试管婴儿:8--16个细胞阶段
胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。
采集良种母牛的卵母细胞
卵母细胞的体外培养
采集良种公牛精子
精子体外获能
体外受精
良种牛体外受精胚胎
胚胎移植
受体牛
良种犊牛
成熟期牛
屠宰加工厂
市场
采集卵巢中的卵母细胞
“试管牛”工厂化生产的技术流程图
保存剩余的卵子和精子的方法是什么?
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讨论:1、试管