内容正文:
课题1 菊花的组织培养
预习
(1)试总结植物组织培养的一般过程(用流程图表示)
(2)找出并理解概念:
细胞分化;脱分化,再分化
(3)说出愈伤组织的特点
(4)回忆必修1的内容,你能说出植物组织培养所依据的原理吗?
(一)、植物组织培养的基本过程
离体的
植物 器官、组织、细胞
愈伤组织
根
芽
植物体
1.植物组织培养的基本过程
重要概念
A.脱分化:
B.再分化:
由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官的过程。
离体的
植物 器官、组织、细胞
脱分化
愈伤组织
再分化
根
芽
植物体
1.植物组织培养的基本过程
C.愈伤组织:
重要概念
细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。
愈伤组织
菠萝的愈伤组织
D.细胞的分化
在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 .
为什么已经高度分化的植物细胞仍可以发育成完整的植株呢?
理论上讲,植物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质(全套基因)
所以:植物体的任何一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能。
2.植物组织培养的原理
细胞的全能性
阅读并思考
1,植物材料的选择会影响组织培养的结果吗?
菊花的组织培养选择的是哪部分的材料?
(二)、影响植物组织培养的因素:
1、植物组织的选取
a、不同植物的组织培养难度不同
b、同一种植物的不同组织培养难度不同
阅读并思考
2,查看84页MS培养基配方,试总结:
离体的植物组织对营养有哪些特殊需求?
2、配制适宜的培养基
MS培养基
同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?
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7营养:常用的培养基是MS培养基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。2、高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物?
?
1. 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
此时的组织或细胞为离体的,细胞不能体现其整个植物体的光能自养,所生活的环境应为液体有机物营养环境。
思 考
阅读并思考
3,植物激素的使用顺序和用量会对组织培养结果产生怎样的影响?
3,植物激素的使用
在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。
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激素:在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。
生长素/细胞分裂素比值 结果
比值高时 促根分化,
抑芽形成
比值低时 促芽分化,
抑根形成
比值适中 促进愈伤组织生长
两种激素同时使用:
4、温度、空气、适合的PH、适时光照等
菊花:
pH=5.8
温度控制在18—22℃
每日光照12h
5.无菌环境
在植物组织培养过程中,为什么要无菌操作,提供无菌环境?
1,植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。
2,用于植物组织培养的培养基有丰富的有机物,同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,。
因此要进行严格的无菌操作。
1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)
2、外植体的消毒(酒精、氯化汞,无菌水)
3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧)
4、无菌箱中的培养;
5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。
阅读实验操作的过程,思考:
在整个操作过程中,是如何来实现无菌
环境的?
制备MS固体培养基
外植体消毒
接种
培 养
栽 培
二、实验操作
移 栽
二、实验操作
(一)制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备.
1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存.
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液.
③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量.
2、配置培养基
分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml.
① 配制培养液
② 调PH
③培养基的分装
由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物