内容正文:
热点命题专项突破1 ≡探究细胞结构与功能的实验技术与方法≡
类型一
理清三项实验技术
[方法指导]
[典题示范]
1.下列经典实验与所用方法的对应关系,错误的是( )
A.小鼠细胞和人细胞融合实验——荧光标记法
B.探究光合作用释放的O2的物质来源——同位素标记法
C.研究种群数量的变化趋势——模型建构法
D.DNA复制方式的证实——差速离心法
D 解析:小鼠细胞和人细胞融合实验中应用了荧光标记法,A正确;鲁宾和卡门用18O分别标记H2O和CO2,证明光合作用所释放的氧气全部来自水,B正确;研究种群数量的变化趋势应用了模型建构法,C正确;DNA的复制方式为半保留复制,该实验应用了同位素标记法和密度梯度离心法,D错误。
类型二
明确两项科学方法的关系——假说与模型
[方法指导]
[典题示范]
2.科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性,进行了下列实验。
(1)细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养,抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合,其目的是标记膜蛋白,以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和________,开始时,鼠的细胞为绿色,人的细胞为红色,两种颜色不混合;一段时间后,可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计______________,结果如下图所示。
(2)科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。
假说一:融合细胞合成了新的膜蛋白。
假说二:原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。
①使用____________抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,均对嵌合体形成没有显著影响,这个结果否定了假说一。
②在15 ℃、20 ℃和26 ℃的培养温度下重复上述实验,这些实验的结果为________________________________,为假说二提供了证据支持。
答案:(1)分布 嵌合体比例
(2)①蛋白质合成 ②随着温度增加,嵌合体比例增加(或随着温度降低,嵌合体比例降低)
解析:(1)抗体与荧光染料结合后抗体被标记,当抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合时,膜蛋白就被标记。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和分布,并观察和统计嵌合体比例。(2)①假如嵌合体的形成是融合细胞合成了新的膜蛋白,用蛋白质合成抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,嵌合体形成均会受影响。②如果随着温度增加,嵌合体比例增加(或随着温度降低,嵌合体比例降低),则为假说二提供了证据支持。
3.(2021·广东卷,T19)人体缺乏尿酸氧化酶,导致体内嘌呤分解代谢的终产物是尿酸(存在形式为尿酸盐)。尿酸盐经肾小球滤过后,部分被肾小管细胞膜上具有尿酸盐转运功能的蛋白URAT1和GLUT9重吸收,最终回到血液。尿酸盐重吸收过量会导致高尿酸血症或痛风。目前,E是针对上述蛋白治疗高尿酸血症或痛风的常用临床药物。为研发新的药物,研究人员对天然化合物F的降尿酸作用进行了研究。给正常实验大鼠(有尿酸氧化酶)灌服尿酸氧化酶抑制剂,获得了若干只高尿酸血症大鼠,并将其随机分成数量相等的两组,一组设为模型组,另一组灌服F设为治疗组,一段时间后检测相关指标,结果见下图。
回答下列问题:
(1)与分泌蛋白相似,URAT1和GLUT9在细胞内的合成、加工和转运过程需要________________及线粒体等细胞器(答出两种即可)共同参与。肾小管细胞通过上述蛋白重吸收尿酸盐,体现了细胞膜具有__________的功能特性,原尿中还有许多物质也需借助载体蛋白通过肾小管的细胞膜,这类跨膜运输的具体方式有____________________。
(2)URAT1分布于肾小管细胞刷状缘(下图示意图),该结构有利于尿酸盐的重吸收,原因是______________________________________。
(3)与空白对照组(灌服生理盐水的正常实验大鼠)相比,模型组的自变量是________________________,与其他两组比较,设置模型组的目的是____________。
(4)根据尿酸盐转运蛋白检测结果,推测F降低治疗组大鼠血清尿酸盐含量的原因可能是______________________________________,减少尿酸盐重吸收,为进一步评价F的作用效果,本实验需要增设对照组,具体为
________________________________________________________________________。
答案:(1)核糖体、内质网、高尔基体 选择透过性 协助扩散、主动运输
(2)肾小管细胞刷状缘形成很多突起,增大吸收面积
(3)尿酸氧化酶活性受抑制 排除血清尿酸盐含量降低是由于大鼠体内尿酸氧化酶的作用(确保血清尿酸盐含量降低是F作用的