内容正文:
选修一 生物技术实践
第1讲 无菌操作技术实践
1.平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法,下列描述正确的是
( )
A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D.都会在培养基表面形成单个的菌落
解析 平板划线法不需要进行梯度稀释,稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。
答案 D
2. 分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是
( )
A.经选择培养后即可将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
B.选择培养这一步可省略,但纤维素分解菌少
C.经稀释培养后,用刚果红染色
D.此实验中需设置对照组
解析 经选择培养后,再经稀释,才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上;选择培养可省略;经稀释培养后,用刚果红染色,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈;设置对照能证明经选择培养的确得到了欲分离的微生物。
答案 A
3.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是
( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 h
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
解析 在细菌计数时,为保证实验结果的准确性,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,求出平均数,再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。
答案 D
4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出(多选)
( )
A.固氮细菌
B.霉菌
C.大肠杆菌
D.放线菌
解析 缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌,霉菌能生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌,放线菌能生长。
答案 ABD
5. 尿素是一种重要的农业肥料,需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题,请分析回答:
(1)如图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外,常用的微生物接种方法还有______________(写一种)。
(2)如果要对培养的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行________,灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是___________________________________________。
(3)下面是两种培养基的配方:
表1:A培养基配方
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
H2O
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10.0 g
1.0 g
15.0 g
1 000 mL
表2:B培养基配方
纤维素粉
NaNO3
NaHPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
酵母浸膏
H2O
5 g
1 g
1.2 g
0.9 g
0.5 g
0.5 g
0.5 g
1 000 mL
①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。
a.倒平板 b.计算 c.溶化 d.称量 e.灭菌
②通常培养基采用________________法灭菌,在制备固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒置,目的是____________________________。
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择上述________(A、B)配方的培养基,在该培养基中加入________指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
④据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是________。
(4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA,利用PCR技术扩增,则每次循环复制可分为____________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________,该物质被提取出后的纯化方法通常是________。
解析 (1)图示利用平板划线法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面。除此方法外,常用的微生物接种方法还有稀释涂布平板法。(2)接种环通过灼烧灭菌,灼烧的接种环冷却后才