内容正文:
第31讲 基因工程
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高中生物一轮复习
考点1 基因工程的操作工具
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高中生物一轮复习
一.基因工程的概念
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一.基因工程的概念
1.别名: 。
2.操作环境: 。
3.操作水平: 水平。
4.操作对象: 。
5.原理: 。
6.优点: 。
生物体外
DNA分子
基因重组
DNA重组技术 / 基因拼接技术 / 转基因技术
基因
定向改造生物的遗传性状,克服远缘杂交不亲和的障碍
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二.基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”— (简称 )
(1)来源:主要是从 生物中分离纯化出来的。
(2)作用: 。
(3)结果:产生 或 。
原核
黏性末端
识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
平末端
限制性核酸内切酶
限制酶
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(4)过程分析
EcoRⅠ限制酶的识别序列及切点为:G↓AATTC
SmaⅠ限制酶的的识别序列及切点为:CCC↓GGG
(5)限制酶的选择
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2.“分子缝合针”—_________
(1)作用: 。
(2)种类:
使两个DNA片段末端之间形成磷酸二酯键,从而拼接成DNA分子
常用类型
来源
功能 只缝合________ 缝合________________
结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的__________
E·coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
T4噬菌体
大肠杆菌
黏性末端
黏性末端和平末端
磷酸二酯键
DNA连接酶
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3.“分子运输车”—____
(1)载体的作用: 。
(2)载体必须具备的条件:
①能在受体细胞中复制并稳定保存
②有一至多个限制酶切割位点,以便目的基因插入
③有标记基因,以便于对外源基因是否导入进行检测
④对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动
载体
将目的基因送入受体细胞
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(3)种类: 。
最常用的载体: 。
分布: ;
化学本质: 。
质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物等
质粒
细菌、酵母菌等生物的细胞质中
小型环状双链DNA分子
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与DNA相关的酶的比较
限制酶
解旋酶
DNA连接酶
DNA聚合酶
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(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶( )
(2)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列( )
(3)限制酶也可以识别和切割RNA( )
(4)DNA连接酶能将两碱基间通过形成的氢键连接起来( )
(5)E·coliDNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端( )
(6)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达( )
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诊断与思考
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思考:基因工程的理论基础?
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考点2 基因工程的基本操作程序
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一.目的基因的获取
1.目的基因: 。
2.获取方法:
(1)从基因文库中获取
基因文库包括: 和 (其中的cDNA文库是利用_______法获取的)。
(2)利用人工方法合成
仪器: 。
条件: 。
(3)利用PCR技术扩增
编码蛋白质的结构基因及一些具有调控作用的因子
DNA合成仪
基因组文库
部分基因文库
逆转录
基因比较小、核苷酸序列已知
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PCR技术
1.名称:______________
2.原理:______________
3.前提: 。
4.合成引物的依据: