内容正文:
课题1 菊花的组织培养
学习目标:1.知道细胞分化、细胞的全能性、组织培养流程及影响组织培养的因素。(重点) 2.识记MS培养基的营养要素及功能。(重点) 3.尝试植物组织培养的实验操作过程。(难点)
1.植物组织培养的基本过程
(1)理论基础:植物细胞的全能性。
(2)细胞分化:在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
(3)基本过程
―→
①愈伤组织:由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
②脱分化:又叫去分化,是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
③再分化:愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。
2.影响植物组织培养的因素
(1)植物材料
①不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。
②同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
(2)营养物质
①大量元素,如N、P、K、Ca、Mg、S。
②微量元素,如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。
③有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。
(3)植物激素:生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。
(4)环境条件:如pH、_温度、光照等,进行菊花的组织培养一般将pH控制在5.8左右,温度控制在18~22 ℃,并且每日用日光灯照射12 h。
3.菊花组织培养的实验操作
→→→→→
(1)制备MS固体培养基:
配制各种母液―→配制培养基―→灭菌。
(2)外植体消毒:取菊花嫩枝―→流水冲洗―→加洗衣粉刷洗―→流水冲洗20 min体积分数为70%的酒精消毒6~7 s―→无菌水清洗质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒1~2 min―→无菌水清洗(至少3次)。
(3)接种:菊花茎段插入培养基时注意方向,不要倒插。每瓶接种6~8块外植体。
(4)培养:最好放在无菌箱中培养,并定期消毒。培养温度控制在18~22 ℃,并且每日用日光灯照射12 h。
(5)移栽:移栽前应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
(6)栽培:将幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。
1.判断对错
(1)一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养。 ( )
(2)对菊花茎段进行组织培养,不加植物激素也能成功。 ( )
(3)接种后的锥形瓶放入无菌箱中,给予适宜的温度和光照即可。 ( )
(4)通过有丝分裂进行细胞增殖。 ( )
提示:(1)√ (2)√
(3)× 在植物组织培养过程中,分化程度越低的材料,越容易脱分化形成愈伤组织,接种后的锥形瓶放入无菌箱中,给予适宜的温度和光照进行培养,培养期间应定期消毒,防止细菌等微生物污染。
(4)√
2.在植物组织培养过程中,愈伤组织的形成和形态的发生是十分关键的。这除需要必备的营养和一些刺激因素外,还需要有诱导作用的物质,它们是( )
A.铜、锌等微量元素
B.细胞分裂素和生长素
C.蔗糖和葡萄糖
D.维生素和氨基酸
B [愈伤组织的形成除了必备的营养和一些刺激因素外,还需加入植物激素,如细胞分裂素和生长素等,用以调节细胞分裂和分化。]
3.下列符合菊花组织培养的基本步骤的是( )
A.制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培
B.制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽
C.制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽
D.制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培
A [植物组织培养的操作程序为“制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培”。接种后先培养再移栽,最后是栽培。]
植物组织培养的基本过程及影响因素
[合作交流]
1.植物组织培养的基本过程是怎样的?
提示:→
2.在生物体内,细胞并不表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官的原因是什么?
提示:细胞全能性表达的基本条件之一是离体状态。例如:植株上的分生组织细胞在体内只能进行分裂分化,形成不同的组织,但不能表现出全能性,这是生物体内基因程序性表达的结果。
[归纳总结]
1.细胞的全能性
(1)概念:指已经分化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。
(2)原因:生物体的每个细胞都含有本物种生长、发育、遗传和变异的全部遗传信息。
(3)体现条件:①离体状态;②一定的营养物质;③植物激素;④其他适宜的外界条件(