内容正文:
高效作业10 [基因工程的操作与活动:
PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定]
[A级 新教材落实与巩固]
1.下列用于判断目的基因是否转移成功的方法中,不属于分子水平上检测的是( A )
A.通过观察害虫吃棉叶是否死亡检测
B.检测转基因生物基因组DNA与含有目的基因片段的DNA能否形成杂交带
C.检测从转基因生物中提取的mRNA与含有目的基因片段的DNA能否形成杂交带
D.检测从转基因生物中提取的蛋白质能否与相应的抗体形成杂交带
【解析】通过观察害虫吃棉叶是否死亡检测,属于个体生物学水平上的鉴定,A符合题意;检测转基因生物基因组DNA与含有目的基因片段的DNA能否形成杂交带,采用的是DNA分子杂交技术,属于分子水平上的检测,B不符合题意;检测目的基因转录形成的mRNA与含有目的基因片段的DNA能否形成杂交带,采用的是分子杂交技术,属于分子水平上的检测,C不符合题意;检测目的基因表达的蛋白质能否与相应的抗体形成杂交带,采用的是抗原抗体杂交技术,属于分子水平上的检测,D不符合题意。
2.下图中甲、乙表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法,以下说法中错误的是( C )
A.甲方法可建立该细菌的基因文库
B.乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C.甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D.乙方法需要逆转录酶参与
【解析】甲方法是以细菌中的DNA为基础,用限制酶进行切割,它包括了细菌所有的基因,可以建立基因文库,并且可以从中选出所需的目的基因,该方法不需要模板和原料。而乙方法是用逆转录的方法人工合成目的基因,它只能得到生物的部分基因,这些基因中只有编码区,乙方法可建立该细菌的cDNA文库。
3.下列对基因工程中基因表达载体的叙述,错误的是( D )
A.基因表达载体上的标记基因不一定是抗生素抗性基因
B.基因表达载体的构建是基因工程的核心
C.基因表达载体中一定不含有起始密码子和终止密码子
D.基因表达载体的构建需要限制酶和DNA聚合酶等特殊工具酶
【解析】基因工程常用的标记基因有抗生素抗性基因、荧光蛋白基因等;基因表达载体的构建是基因工程的核心;起始密码子和终止密码子位于mRNA上,基因表达载体的本质是DNA分子,因此其中一定不含有起始密码子和终止密码子;基因表达载体的构建需要限制酶和DNA连接酶等工具酶。
4.在用基因工程技术培育抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( A )
A.用限制性内切核酸酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
【解析】限制性内切核酸酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列,而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸,A错误;构建基因表达载体时,需要用限制酶切割含有抗除草剂基因的DNA片段和载体,再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA分子,B正确;基因表达载体构建好之后,需要将重组DNA分子导入受体细胞(烟草原生质体),C正确;基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定,可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞,D正确。
5.下列关于基因工程技术的叙述,错误的是( C )
A.限制性内切核酸酶均能特异性识别特定的核苷酸序列
B.某些基因可通过病毒的侵染将目的基因导入受体细胞中
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功插入植物细胞染色体上也未必能正常表达
【解析】限制性内切核酸酶具有识别特定核苷酸序列的能力,即具有专一性,A正确;病毒也可以作为载体将目的基因导入受体细胞中,B正确;载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因,C错误;抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达,D正确。
6.如图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程。下列相关分析中正确的是( C )
A.获得该mRNA的最佳材料是受精卵
B.构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌
C.完成过程①②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶
D.探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌,获得未被感染的细菌
【解析】受精卵还没有分化,细胞中的乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因还没有表达,所以受精卵中不含该目的基因的mRNA,A错误;大肠杆菌是基因工程常用的受体细胞,但不能作为基因工程的载体,B错误;图示过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程,该过程中需要逆转录酶,过程②为DNA的复制,该过程中需要DNA聚合酶,C正确;用探针筛选的目的是获得被感染的细菌,淘汰未被感染的细菌,D错误。
7.下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。
据图回答下列问题:
(1)为获得A,可以A的mRNA为模板,在__逆转录__酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后