内容正文:
专题四 酶的研究与应用
课题3
酵母细胞的固定化
优点:
催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。
存在的缺陷:
1.通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;
2.溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;
3.反应后会混在产物中,可能影响产品质量。
解决的办法:
酶制剂
固定化酶技术
什么是固定化酶?
水溶性酶
水不溶性载体
水不溶性酶
(固定化酶)
固定化技术
1.什么是高果糖浆?使用它有何好处?
2.生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?
这种酶有何特点?
3.了解高果糖浆生产过程
4.这种方法的优点是什么?
一、固定化酶的应用实例
阅读P49-50,并思考:
基础知识
高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康有利。
1.什么是高果糖浆?使用它有何好处?
你能写出果糖的分子式吗? 它属于什么糖?
生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶;其作用是将葡萄糖转化为果糖;这种酶稳定性好,可持续发挥作用。
2.生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点?
酶溶于葡萄糖溶液后,就无法回收,造成很大的浪费。
3.固定化酶技术生产高果糖浆的过程:
注意反应柱的各部分名称。
(1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离
(2)固定在载体上的酶可以被反复利用
你能说出反应柱的优点吗?
4.固定化酶技术的优点:
①反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本.
②提高了果糖的产量和质量。
在生产实际中使用固定化酶技术的不足:
一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。
可采用固定化细胞技术
怎么办?
二、固定化细胞技术
阅读P50:思考以下几个问题
2.固定化酶或固定化细胞技术分别适合使用哪种方法?为什么?
1.什么是固定化酶或固定化细胞技术,可以采用什么方法固定?
3.固定化酶和固定化细胞的联系与区别
4.本课题采用包埋法固定细胞,常用的载体材料有哪些?
利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。可用包埋法、化学结合法和物理吸附法
1.什么是固定化酶或固定化细胞技术,可以采用什么方法固定?
化学结合法
物理吸附法
包埋法
半透膜微囊
2.固定化酶或固定化细胞技术分别适合使用哪种方法?为什么?
化学结合法
物理吸附法
包埋法
体积小,固定一种酶包埋法容易丢失
体积大,固定一系列酶
难以化学结合和吸附
固定对象 酶 细胞
适宜固
定法
特
点
3.固定化酶和固定化细胞的联系与区别
联系:应用相同,都能催化某些反应
区别:
(1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收;
(2)固定化细胞技术对酶活性影响更小;
(3)固定化细胞固定的一系列酶;
(4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制;
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺
其共同的特点是不溶于水的多孔性载体
海藻酸钠
聚丙烯酰胺
4.本课题采用包埋法固定细胞,常用的载体材料有哪些?
(一)制备固定化酵母细胞
阅读P50~51思考下列问题:
1.制备过程包括哪几个步骤?
2.你认为哪个步骤的操作是最重要的一环?
实验操作
1.制备过程包括哪几个步骤?
配制CaCl2溶液
配制海藻酸钠溶液
将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合
固定化酵母细胞
酵母细胞的活化
CaCl2的作用是使海藻酸钠胶体发生聚沉,形成凝胶珠。
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配置好的CaCl2溶液中,滴加在CaCl2溶液中形成凝胶珠, 凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30分钟。
刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。
检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法:
一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。
二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。
2.你认为哪个步骤的操作是最重要的一环?
加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。
图为某同学利用海藻酸钠固定化酵母细胞的实验结果,出现此结果的可能原因有
A.海藻酸钠浓度过高
B.酵母细胞已经死亡
C.注射器中的溶液推进速度过快
D.注射器距离CaCl2溶液液面太近
ACD
(二)用固定化酵母细胞发酵
1.将固