内容正文:
实验一 普通光学显微镜
生物教研组
0536-5641736
一、目的要求:
1.了解显微镜的构造和性能
2.掌握显微镜的使用方法
二、实验重难点
重点:1.认识掌握显微镜的结构
2.掌握显微镜的使用方法
难点:显微镜的使用方法
三、实验内容和方法
1、显微镜的结构
2、显微镜的性能
3、显微镜的使用
1、显微镜的结构
1)机械装置:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件.它起着支持 调节 固定等作用.
2)光学系统:目镜 、 物镜 、 聚光器、反光镜等. 它使检视物放大,造成物象.
机械装置
镜座
移动手轮
镜臂
镜筒
调焦装置
载物台
电源开关
光学系统
目镜
物镜
聚光器
反光镜
back
机械装置
镜座:是显微镜的底座。支持整个镜体,使显微镜放置稳固。
back
镜柱:镜座上面直立的短柱,支持镜体上部的各部分。
back
机械装置
镜臂:弯曲如臂,下连镜柱,上连镜筒,为取镜时手握的部位。
back
机械装置
镜筒:为显微镜上部圆形中空的长筒,上端放置目镜,下端与物镜转换器相连,并使目镜和物镜的配合保持一定的距离。镜筒长度的变化,不仅放大倍数改变,而且成像技术也受到影响。国际上将显微镜的标准筒长定为160mm。
机械装置
物镜转换器,接于镜筒下方的圆盘,可自由转动,盘上有3-4个螺旋圆孔,为安装物镜的部位。当旋转转换器时,物镜即可固定在使用的位置上,保证物镜与目镜的光线合轴。
back
机械装置
载物台:为放置玻片标本的平台。中央有一圆孔,以通过光线。两旁装有压片夹和移动手轮。可固定玻片标本和左右或者前后移动玻片。
back
机械装置
调焦装置:在镜臂两侧有粗(大)、细(小)调焦螺旋各一对,旋转时可使镜筒上升或下降,在用低倍镜时,一般用粗调,用高倍镜时,必须用细调。
机械装置
光学系统
目镜:安装在镜筒上端,其作用是将物镜所成的像进一步放大,使之便于观察。也有3个倍数,5,10,16。
物镜:安装在物镜转换器上,是显微镜中重要的光学部件。一般有4个倍数,低倍4,中倍10,高倍40,油镜100。
根据物镜的放大倍数和使用方法的不同,分为低倍镜、高倍镜和油镜3类。
光学系统
低倍镜:它的视野的实际范围最大,易于发现目标,但不易看清微生物个体的形态。
高倍镜:搞倍镜视野的实际范围较低倍镜小些。可以看清个体较大的微生物个体或菌丝体形态,但个体较小的微生物以及其内含物和特殊结构也无法辨清。
油镜:一般在镜头上有黑圈或红圈表示的为油镜物镜,也有的以“OI”或“HI”字样表示,油镜的镜面很小,工作距离很近。使用时,在载玻片和油镜物镜之间加上一低油(常用香柏油)(而使用低倍、高倍镜时,是隔以空气)。当光线通过载波片时,由于玻璃与香柏油的折射率相近,可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射,这样就可以增加照明度,是镜检物清晰(参见表1)。
幻灯片 7
反光镜:显微镜的取光设备,使光线射向聚光镜。
聚光器:安装在载物台下,作用是将光源经反光镜反射来的光线聚焦于样品。它可以调节,从而使焦点落在被检物体上。
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光学系统
2、显微镜的性能
显微镜分辨能力的高低取决于光学系统的各种条件,取决于物镜、目镜及聚光镜的性能。
主要有以下几个因素:
物镜的数值孔径(NA) :从聚光镜发出的锥形光照射到观察标本上能被物镜所聚集的量。
NA=nsinθ
其中n为物镜与标本之间介质的折射率;
θ由光源投射到透镜上的光线和光轴之间最大的夹角。
表1 光线通过几种介质的折射率(n)比较:
介
质
空
气 水 石
蜡
油 香
柏
油 玻
璃
折
射
率 1.0 1.33 1.47 1.515 1.52
分辨力:
显微镜标本中相互接近的两点可被清晰分辨出来的能力。
D=λ/2NA
其中λ为入射光波长
NA为物镜的数值孔径
D为显微镜的分辨力
放大率:物镜放大率(V1)与目镜放大率(V2)的乘积
V=V1V2
油镜使用的原理
1. 香柏油的折射率与玻璃接近,提高了视野的照明度。
2 . 提高了显微镜的分辨率
3、显微镜的使用
1 )安放
右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧,距离桌边10厘米处。
2 )对光
镜筒升至距载物台1~2厘米处,低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动。
若使