内容正文:
实验10
泡菜的腌制和
亚硝酸盐的测定
亚硝酸盐与人体血液作用,形成高铁血红蛋白,从而使血液失去携氧功能,使人缺氧中毒,轻者头昏、心悸、呕吐、口唇青紫,重者神志不清、抽搐、呼吸急促,抢救不及时可危及生命。不仅如此,亚硝酸盐在人体内与仲胺类作用形成亚硝胺类,它在人体内达到一定剂量时是致癌、致畸,甚至会致死,严重危害人体健康。
1.说出泡菜腌制原理,尝试制作泡菜;
2.尝试用光电比色法测定亚硝酸盐的含量
3.讨论与此相关的食品安全问题。
学习任务
泡菜制作原理
在无氧条件下,微生物利用菜中的糖和其他营养物质发酵,发酵产物有有机酸和醇类物质等,也有亚硝酸盐。
2.泡菜坛
设备及用品
1.菜刀及菜板
凹槽
泡菜坛凹槽的作用是什么?
泡菜坛:能抗酸、抗碱、抗盐,又能密封且能自动排气,隔离空气使坛内能造成一种缺氧状态,有利于乳酸菌的活动,又防止了外界杂菌的侵害,使泡菜得以长期保存。
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亚硝酸盐的定量测定
亚硝酸盐的测定原理
亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物,可用光电比色法定量。
酸化→重氮化→显色→比色
光电比色法原理
以生成有色化合物的显色反应为基础,通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。
步骤
(1)样品处理:
称取样品→匀浆→过滤→澄清→加热过滤→定容
澄清:用硫酸锌溶液和氢氧化钠溶液反应产生的氢氧化锌,在pH=8的条件下,能够使泡菜匀浆中的蛋白质等物质沉淀下来, 并能起到吸附脱色的作用,再通过过滤就能得到澄清的滤液,便于比色。
阅读课本,思考如何使蛋白质沉淀下来?
(2)测定:
取样→酸化→重氮化→显色→定容→混匀静置→比色
步骤
测出样品的光密度值,如何换算成亚硝酸盐的质量?
添加试剂步骤 剂量
处理样品 10ml
氯化铵缓冲液 4.5ml
60%乙酸溶液 2.5ml
显色剂 5.0ml
定容至25ml,混匀,暗处静置25min,在550nm处测定光密度值(水作为空白对照)
重氮化:亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应。
显色:亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物
比色:用光程为1cm的比色皿在550nm处测定光密度值(以10ml水为空白对照)
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(3)标准曲线:
标准溶液体积(ml) 0 0.5