内容正文:
高二年级生物导学案
5.1 DNA的粗提取与鉴定
【学习目标】
(一)知识目标
知识与技能: 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。2、理解DNA粗提取与鉴定的原理
过程与方法: 掌握DNA的提取技术,能利用DNA的性质进行实验设计和操作
情感态度与价值观: 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。
(二)重点和难点:重点: DNA的粗提取和鉴定方法
难点: DNA的粗提取和鉴定方法
【课前预习】
(一)实验原理:
1.提取DNA的方法
提取生物大分子的基本思路是 。对于DNA的粗提取而言,就是要利用 、 等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
1)DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ,但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温,而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ,但对DNA没有影响。
3)DNA不溶于 ,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
2.DNA的鉴定:DNA遇 (沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
(二)实验设计
1、实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是使用 的生物组织,成功的可能性更大。
2、 破碎细胞,获取含DNA的滤液
1) 制备和提取细胞核物质:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例。
在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用 搅拌,得到鸡血细胞液。过滤后收集研磨液;如果实验材料是植物细胞,需要先用 溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的 和食盐,进行充分的搅拌和研磨。过