浙科版高中生物选修1 第四部分 实验13 DNA片段的PCR扩增_学案

DNA片段的PCR扩增 【学习目标】 1．掌握PCR法扩增目的基因片段的基本原理与方法； 2．通过PCR验证目的基因片段是否插入质粒中； 3．充分理解本学期三次分子实验的原理、联系与意义。 【学习重难点】 掌握PCR法扩增目的基因片段的基本原理与方法； 【学习过程】 导学诱思 一、PCR技术 1．PCR的全称是：____________。 2．PCR技术是用于DNA片段复制、扩增的生化技术。 3．PCR技术用途：除用于基因扩增外，还用于____________。 4．PCR技术的具体应用：在法学、医学、食品和考古学上也是重要的实用工具，如______鉴定、______鉴定、食品质量的确定、______病诊断、肿瘤病和其他疾病的诊断以及考古中人种的确定等。 答案： 1．聚合酶链反应 3．测定DNA序列 4．亲子 犯罪 遗传 二、DNA的体内自我复制与PCR技术 DNA聚合酶在有________的存在时，利用4种____________，可从____末端向____末端合成新链。 PCR技术还需要____________________作为________________，这一段叫______。 答案; DNA模板 脱氧核苷三磷酸 5′ 3′ 与DNA模板互补的一段单链 DNA聚合酶作用的起点 引物 三、PCR作用的过程 1．1个循环的操作：步骤 具体操作 双链DNA____将双链DNA加热至____℃，DNA____，DNA之间的______打开，双链分离(也叫做______)续表步骤 具体操作 与______结合 双链分离后，将温度____________℃，这一降温过程叫______。退火后，引物可与2个____________分别结合 DNA新链的______ ______℃下，聚合酶可利用________组装模板的互补链，从引物延伸至____末端 2．一般大约需要重复上述3步骤______个循环。 3．结果：一个循环形成____个双链DNA，在20个循环后(大约1h),1个DNA片段可扩增上百万个拷贝，30个循环可产生10亿个拷贝。 答案： 1．分开 95 变性 氢键 解链 引物 迅速降至40～60 退火 单链的DNA模板 延伸 72 4种dNTP 3′ 2．15～30 3．2 四、实验操作 1．设