内容正文:
实验11 植物组织培养
试管苗大规模培养
实验目的:
1.进行菊花的组织培养
2.尝试植物激素的应用
通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?
无性繁殖
营养繁殖
扦插
嫁接
压条
组织培养
组织培养就是取一部分植物组织,如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等,在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上,给予一定的温度和光照,使之产生愈伤组织,或进而生根发芽。
一、组织培养概述
1.概念
植物细胞发挥全能性的条件:
1、离体;
2、无菌;
4、植物激素的诱导
3、有适合的营养物
质和适宜的外界条件;
(培养基、器具、
环境、操作过程)
生芽:
生根:
细胞分裂素多,
生长素少
生长素多
2、植物组织培养的原理是什么?
植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力。
植物激素的配比
比值高 诱导生芽 配制发芽培养基
大致相等 愈伤组织只生长不分化
比值低 诱导生根 配制生根培养基
主要是生长素和细胞分裂素
植物激素和人工合成的植物激素
植物激素
每一种激素的使用量、不同激素的配比
天然植物激素 人工合成的
植物激素类似物
生长素 萘乙酸(NAA)
细胞分裂素 苄基腺嘌呤(BA)
二、菊花的组织培养
(一)设备及用品
1. 100ml三角瓶或大口培养瓶 2. 镊子 3. 超净台 4. 灭菌锅 5.封口膜和橡皮圈 6. 有棉球的广口瓶 7. 酒精灯 8.三角漏斗 9.培养皿
(二)材料
1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基)
2.萘乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解
3.发芽培养基(灭菌)
4.生根培养基(灭菌)
MS固体培养基成分及比例
培养基需具备五大类营养要素
大量元素
微量元素
有机成分:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
MS培养基
三、步骤
1.取外植体
超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片
2 .接种
在酒精灯旁,生芽培养基中,放入1-3段切段(茎部插入培养基,盖上封口膜。
3.生芽培养
日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天光照不少于14.5h。
三、步骤
4.生根培养
2~3周后,将生长健壮的丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中,在上