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专题04 微生物的培养和应用
一、概念
泛指在分离、接种和培养微生物的操作中,所有防止其他微生物污染的方法。是成功地培养微生物的关键。
考点一、无菌技术
二、范围
1.对实验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和消毒。
2.对培养器皿、接种用具、培养基等进行灭菌。
3.在酒精灯旁操作
4.已灭菌的材料与周围的物品分开。
2.煮沸消毒法
在100℃煮沸5 ~6min可以杀死微生物细胞和部分芽孢。
3.化学药物消毒法
①酒精消毒:使细胞脱水、蛋白质变性。
②氯气消毒:氯气溶于水形成盐酸和次氯酸,次氯酸可放出新生态的氧,从而杀死细胞。
三、消毒、灭菌
(一)消毒:较为温和理化方法,杀死部分有害菌体(不包括芽孢、孢子)
1.巴氏消毒法
70℃~75℃煮30min或在85℃煮15min;杀灭非芽孢致病菌,不破坏物料原风味;适用于对牛奶、啤酒等消毒。
③其他:升汞、高锰酸钾、臭氧、甲酚皂、醋酸等等。
干热灭菌箱内160~170℃ 1~2
小时,适用于耐高温、需保持干燥的
物品(吸管、培养皿)和金属用具等。
在酒精灯火焰(200℃以上)上灼烧,灭菌简捷可靠。适用于接种环、接种针、接种钩等金属用具以及试管口、三角瓶口灭菌
1.灼烧灭菌
2.干热灭菌
(二)灭菌:强烈的理化方法,杀死所有微生物(包括芽孢、孢子)
4.紫外线(260nm)消毒法
抑制DNA的复制;产生臭氧,辅助杀菌。适用于空气及物体表面消毒或灭菌。
4.其他灭菌方法:紫外线、超声波、微波、化学药物灭菌等。
3.高压蒸汽灭菌
100KPa、121℃、15~30min;加压是为了提高温度,达到灭菌的目的。因此必须当灭菌锅内的冷空气完全排尽后,再将锅关闭,继续加热。适用于培养基灭菌。
附:实验室的消毒与灭菌
对接种室、接种箱、超净工作台喷洒适量的石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液后,用紫外线照射30min。
二、基本成分
(一)碳源
①无机碳源:
②有机碳源:
CO2、HCO3-等,适于自养生物。
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等,适于异养生物。
(二)氮源
①无机氮源:
②有机氮源:
N2、NH4+、NH3、NO3-等
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
考点二、培养基
一、概念:
人们按照微生物对__________的不同需求,配制出供其