内容正文:
一、配制牛肉膏蛋白胨培养基
二、斜面接种和培养大肠杆菌
三、平板划线分离和培养大肠杆菌
大肠杆菌的分离和纯化培养(1)
苏教版高中生物选择性必修1
一、配制牛肉膏蛋白胨培养基
1.配制
2.调节PH
3.分装
4.包扎
5.灭菌
6.搁置斜面/倒平板
1.配制
计算
100ml蒸馏水中各物质的量
称量
牛肉膏比较粘稠,用玻棒挑取放在称量纸上称量。
溶化
牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加水,加热。
牛肉膏蛋白胨都容易吸潮,称取时动作要迅速。
100mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方
培养基组分 提供的主要营养
牛肉膏 0.5g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素
蛋白胨 1.0g 氮源和维生素
NaCl 0.5g 无机盐
H2O 定容至100ml 氢元素、氧元素
琼脂 2.0g
思考:
加热溶化时要注意什么?
需要边加热边用玻璃棒搅拌,防止琼脂糊底导致烧杯破裂。
溶 化
用质量分数为3%的HCl溶液或NaOH溶液将培养基的PH调到7.2
2.调节PH
3.分装:
分 装
试管高度1/5
不要污染试管口
立即用棉塞塞紧
4.包扎
3-5支试管扎成一捆,外包一层牛皮纸,用线扎好。
并在试管壁上注明培养基的名称、组别、配制日期等。
5.灭菌
高压蒸汽灭菌是常用的灭菌方法。
6.搁置斜面/倒平板
待试管冷却到50 ℃左右,将试管口部枕在高约1cm的木条或其他合适高度的物体上,使其自然倾斜,斜面长度不超过试管总长的1/2。
斜面培养基
请找出图中防止杂菌污染的措施?
6.搁置斜面/倒平板
平板培养基
1.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
2.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。
思考