内容正文:
实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
导学案
一,基础领悟
自学书本38页第一段,查阅网络文献,了解固定化酶定义,固定化方法及优点。
1,固定化酶定义:将水溶性的酶用 的方法固定在某种介质上,使之成为 水而又有酶活性的制剂。
2,固定化方法: , , ,
3,固定化酶优点:
二,自主探究 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测的实验
自学书本其余内容,明确该实验目的,实验原理,了解实验步骤。小组讨论自学过程中出现的问题,并将未解决的问题上传云盘。
1,实验目的:
(1)制备 。
(2)进行 的测试。
2,实验原理:
用 法将α-淀粉酶固定在 上。一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解为糊精。用淀粉指示剂( )测试,流出液呈
表明水解产物糊精生成。
淀粉葡萄糖
遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色
3,自学过程中问题记录:
三,确定本组实验方案 第 组
结合书本实验步骤及文献中的相关资料,确定本组实验方案并上传至云盘。
1,实验设备及用品选择:
2,实验步骤的优化:
3,实验结果记录
蒸馏水+1~2滴KI—I2溶液
淀粉液+1~2滴KI—I2溶液
淀粉滤液+1~2滴KI—I2溶液
淀粉滤液+1~2滴KI—I2溶液+稀释1倍
颜色记录
四,思维拓展
1.如何证明洗涤固定化淀粉酶柱的流出液中没有淀粉酶?
2.试验中为什么要待固定化酶柱中流出5ml液体后再接收流出液用于鉴定?
3. 实验后,用10倍体积的蒸馏水洗涤此柱的目的是?
课后习题:
1.下面关于固定化酶的说法,正确的是 ( )
A.固定化酶是一种能溶解在水中,但依然保持酶活性的制剂
B.固定化酶能溶解于水,且结构很稳定,有利于工业化生产
C.固定化酶是经过物理或化学的方法固定在某种介质上,使之能溶解于水中,又有酶活性的制剂
D.固定化酶是经过物理或化学的方法固定在某种介质上,使之不能溶解于水中,又有酶活性的制剂
2.下列方法中不属于固定化酶的是( )
A.吸附法 B.共价法
C.交联法 D.包埋法
3.下列关于α淀粉酶的固定化过程的叙述中错误的是( )
A.首先要在烧杯中将α淀粉酶溶于4 mL蒸馏水中
B.再将5 g石英砂加入上述烧杯中,不时搅拌30 min
C.随后将烧杯中的物质装入1支下端接有气门芯但并不封住的注射器中
D.最后用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器,除去那些未吸附的游离淀粉酶
4.α淀粉酶与其固定化酶的化学本质分别是 ( )
A.蛋白质、脂质 B. 蛋白质、蛋白质
C. RNA、蛋白质 D. RNA、脂质
3, 淀粉在各种酶的作用下会依次水解,不同阶段的水解产物遇到指示剂会出现不同的显色反应,下列选项中属于本实验中的反应物质和显色现象的是…( )
A.淀粉遇碘显蓝色
B.糊精遇KI—I2溶液显红色
C.麦芽糖遇碘不显色
D.葡萄糖遇本尼迪特试剂显红黄色
4,α淀粉酶与其固定化酶的化学本质分别是…( )
A.蛋白质、脂质 B.蛋白质、蛋白质
C.RNA、蛋白质 D.RNA、脂质
5,高考真题:2014.浙江自选.17
(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验,分组见下表。
组别
固定化酶柱长度(cm)
淀粉溶液的流速(mL·min-1)
甲
10
0.3
乙
10
0.5
丙
15
0.3
丁
15
0.5
将吸附了α淀粉酶的石英砂装入柱中后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去________。按上表分组,将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液进行KII2检测。若流出液呈红色,表明有______生成;若各组呈现的颜色有显著差异,则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是________组。
(2)下列关于上述固定化酶实验的叙述,错误的是______。
A.固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量
B.淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉
C.各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同
D.淀粉溶液的pH对实验结果有影响
思考与练习:
1.如何证明洗涤固定化淀粉酶柱的流出液中没有淀粉酶?
2.耐高温的淀