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专题02 微生物的培养与应用
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专题02 微生物的培养与应用
课题1
微生物的实验室培养
*
㈠.微生物的类群
微生物
原核类:
真核类
非细胞类:
细菌、支原体、放线菌、蓝藻
个体微小、结构简单
酵母菌、霉菌、食用菌
真菌:
原生生物:
显微藻类、原生生物(如:草履虫、变形虫等)
病毒、类病毒、朊病毒
◆微生物的共同特点:
一.微生物基础知识
1.细菌的形态
细菌主要是以二分裂的方式进行增殖(如右图)
2.细菌的繁殖
3.细菌的菌落
⑴.定义:
单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。
⑵.特征:
大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。
⑶.功能:
每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。
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几种菌落及其形态
几种菌落及其形态
4.病毒的结构
:由核酸和蛋白质构成。
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病毒的结构
吸附
注入
合成
释放
组装
5.病毒的繁殖
病毒的增殖一般可分五个阶段,即:
吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放
6.病毒的营养方式
:寄生
微生物需要的五大类营养要素物质是:
㈡.微生物需要的营养物质及功能
1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水
:凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。
①无机碳源:CO2;NaHCO3等
②有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等
①构成细胞物质和一些代谢产物
②异养微生物的能源
⑴.概念
⑵.来源:
⑶.作用:
1.微生物的碳源
*
①无机氮源:N2、NH4+、NO3-、NH3等。
②有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等
凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。
2.微生物的氮源
⑴.概念:
⑵.来源:
⑶.作用:
3.生长因子
⑶.常见的生长因子:
⑴.概念:
⑵.作用:
微生物生长不可缺少的微量有机物。
酶和核酸的组成成分。
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
*
㈢.培养基
培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的营养基质。
1.培养基的类型和用途
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)
3.不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
培养基的种类
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分 天然培养基
合成培养基
用途
鉴别培养基
液体培养基:
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
back
半固体培养基:
(是否运动)
无动力
有动力(弥散)
固体培养基:菌落
分离导入了目的基因的受体细胞
几种选择培养基
加入青霉素的培养基
分离酵母菌、霉菌等真菌
不加氮源的无氮培养基
分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基
分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基
back
血清中含有:
①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)
②多种金属离子;
③激素;
④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。
⑤各种生长因子
⑥转移蛋白
⑦不明成分
人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。
㈣.无菌技术
1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
⑴消毒定义:
利用化学或物理方法,杀死部份微生物的过程。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
⑵灭菌的定义:
以化学试剂或物理方法消灭所有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过程。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。
①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min。
②巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。
③化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源。
④紫外线消毒。
⑴.消毒的方法:
3.常用的消毒与灭菌的方法
①灼烧灭菌
②干热灭菌:160-17