浙科版高中生物选修1第1部分实验2分离以尿素为氮源的微生物 (共18张PPT)

实验分离以尿素为氮源的微生物 脲，又称尿素， 是蛋白质的降解产物，会污染环境，但可以被含脲酶的微生物分解。 C NH2 NH2 O 实验原理： ⑴含有脲酶的细菌可以从尿素中得到源，而其他细菌不能得到源，因此可以用以尿素为唯一源的培养基选择出这些微生物。 ⑵尿素在脲酶的降解下产生，使培养基的变为碱性，酚红遇碱由红黄色变成红色，因此可以用酚红鉴定。 (NH2) 2C=O+H2O 2NH3+CO2 脲酶 选择培养基 全营养培养基 尿素为唯一氮源的培养基 土壤稀释液 （多种微生物） 结果如何？ 设备及用品： 实验材料： ()全营养固体培养基：蛋白胨、酵母提取物、、琼脂糖、加水。 ()尿素固体培养基：葡萄糖、 、、酚红、琼脂糖、加水。灭菌冷却到℃时加入经玻璃漏斗过滤（使其无菌）的尿素溶液（内含脲）。 ）土样。 . 酚红的作用是什么？ . 凝固剂为什么使用琼脂糖，而不是琼脂？ . 能否连同尿素一起进行灭菌？如何操作？ 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物 实验步骤： 观察 注意：尿素经过玻璃漏斗过滤后加入 培养基的配制和灭菌 倒平板 接种 全营养固体培养基（对照组） 尿素固体培养基（实验组） 玻璃刮刀、涂布分离 培养 对照组： 实验组： 制备细菌悬液 倒置，℃恒温培养箱，左右 菌落数量和种类多而杂 菌落少、单一，菌落周围出现 红色区域 制备细菌悬液： 的无菌水 的无菌水 土壤 土样 无菌水 4.5ml无菌水 0.5ml 0.5ml 0.5ml 微量移液器的使用 培养基上 、稀释液涂布结果 尿素培养基上 、稀释液涂布结果 ℃恒温培养 注意事项 ①为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。 ②涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般取三个稀释度 ③同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。 微生物的培养与观察 稀释涂布平板法可用于测定活菌数： 每克样品中的菌落数＝(÷)× 其中，代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表涂布平板时所用的稀释液的体积()，代表稀释倍数。 例如 若某同学将毫升的菌液稀释成倍， 涂布分离后，个平板的菌数依次为：个， 个，个。请问，你能算出该试管中的细菌数大 约是多少吗？ 实例：在做分解尿素的细