内容正文:
课题1 :微生物的实验室培养
三、实验操作
(一)制备培养基
(二)操作步骤
1
2
3
4
1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?
答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以避免培养基表面的水分过快地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。
(二)、纯化大肠杆菌
1.接种方法有:
平板划线法和稀释涂布平板法
微生物的接种技术
3.菌落:
概念:在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
答:操作前:第一步灼烧接种环是为了避免接种
环上可能存在的微生物污染培养物;
操作中:为了杀死上次划线结束后,接种环上残
留的菌种,使下一次划线时,接种环上
的菌种直接来源于上次划线的末端。
操作后:杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污
染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?
答:以免接种环温度太高,杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?
答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
(3)微生物的恒温倒置培养
放入37℃恒温箱中培养12h和24h。
(4)培养结果
1.下列操作与消毒灭菌无关的是 ( )
A.接种前用酒精灯火焰灼烧接种环
B.接种前用酒精擦拭双手
C.将平板倒置,放入培养箱中培养
D.接种在酒精灯的火焰旁完成
C
2.采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法,可分别杀死哪些部位的杂菌( )
A.接种环、吸管、培养基、接种室
B.吸管、接种环、培养基、接种箱
C.培养基、吸管、接种环、接种箱
D.培养皿、吸管、培养基、双手
B
3.下列有关平板划线操作的描述,不正确的是( )
A.将接种环放在酒精灯火焰上灼烧,直到接种环烧红
B.接种环在平板上划线的位置是随机的
C.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精
灯火焰
D.最后一区的划线不能与第一区相连
B
4.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入
37 ℃恒温箱的目的是( )
A.对比观察培养基有没有被微生物利用
B.为了下次接种时再使用
C.没必要放入未接种的培养基
D.对比分析培养基是否被杂菌污染
D
5.微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图为大肠杆菌分离和
培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题:
(1)实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是 、 、 。
(2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。
(3)图示是利用 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因是 。
(4)关于图示的操作方法和结果,叙述正确的是 。
A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌。
B.划线操作须在火焰上进行。
C.在5区域中才可以提到所需菌落。
D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌。
预测高考:
1.收集生活中与微生物有关的实例,
并通过所学知识对其进行解释。
2.完成课后练习。
1.培养基概念:
人们按照微生物对__________的不同需求,配制出供其__________的营养基质。
2.培养基种类
按照培养基的__________划分为______培养基和______培养基。
3.培养基中营养要素
各种培养基一般都含有水、________、________、__________,此外还要满