2019高考生物江苏专用优编增分二轮（课件 讲义 习题）：专题十一　生物技术实践 (共5份打包)

考点31　微生物的利用及在传统发酵技术中的应用 第一篇　专题十一　生物技术实践 [直击考纲]　 1.微生物的分离和培养(B)。 2.某种微生物数量的测定(C)。 3.微生物的应用(B)。 4.酶在洗涤等方面的应用(B)。 5.制备和应用固相化酶(A)。 6.发酵食品加工的基本方法(A)。 7.实验：(1)探究酶在洗涤方面的作用(c)；(2)酵母细胞的固定化技术(b)；(3)腐乳的制作(a)；(4)果酒和果醋的制作(b)；(5)微生物的分离与培养(b)；(6)DNA的粗提取与鉴定(b)。 静悟提纲 1.微生物的培养 核心点拨 (1)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。 ①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 ②常用灭菌方法：灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具；干热灭菌——主要针对玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。 (2)倒平板操作 操作过程如图所示，操作时要待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近进行。 制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。 (3)平板划线操作 (4)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。如图所示： 2.某种微生物的分离与计数 (1)分离——选择培养基 ①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 ③培养基中缺乏氮源时，可以分离得到固氮微生物。 ④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。 ⑤改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养能得到耐高温的微生物。 (2)计数 ①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 a.筛选菌株：利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。 b.计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。前者为了增强实验的说服力和准确性，需设置重复组，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 c.过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。 ②分解纤维素的微生物的分离 a.实验原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 b.流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。 (3)鉴定方法 鉴定分解尿素的细菌 含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红，则该菌能分解尿素 鉴定纤维 素分解菌 3.微生物在传统发酵技术中的应用 项目 果酒和果醋的制作 腐乳制作 作用菌类 果酒：酵母菌 果醋：醋酸菌 毛霉 原理 ①酵母菌在无氧条件下将葡萄糖氧化成乙醇；②醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸 毛霉将蛋白质、脂肪分解成小分子有机物 原料选择 新鲜葡萄(或苹果) 豆腐 实验流程 挑选葡萄→冲洗―→榨汁→ 酒精发酵→醋酸发酵 ↓　　　↓ 果酒　　果醋 让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制 操作注意事项 ①材料选择与处理；②防止发酵液污染，控制好发酵条件 ①材料用量；②防止杂菌污染；③控制温度及酒精含量 共同点 都是天然的发酵，利用了微生物新陈代谢过程中代谢产物的作用或直接获取代谢产物 题组特训 题组一　微生物的培养和利用 1 2 3 4 5 1.苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。某学校科研小组准备依据如图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选出苯酚高效降解菌株。据图回答下列问题： (1)甲图中苯酚降解菌的富集培养基应含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有______________。 蛋白胨、苯酚 答案 解析 1 2 3 4 5 解析　微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。微生物常见的接种方法有：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过一系列梯度稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 培养基成分中的有机物均可以提供碳源，即蛋白胨、苯酚均可以作为碳源。 1 2 3 4 5 (2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，以达到获得苯酚高效降解菌的目的。应采用___________ _____法来进行该菌种的计数与分离，统计的菌落数往往比活菌的实际数目要____。 增加(升高) 稀释涂布 平板 小