辽宁省北票市高级中学人教版高二生物选修一课件：5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段 (共29张PPT)

多聚酶链式反应(PCR技术)， 是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为DNA体外扩增技术。 1、DNA分子的组成成分和结构 DNA 分子的基本组成单位是 .共有 种,每个基本单位是由一分子的 、一分子的 、和一分子的 构成。 脱氧核甘酸 4 磷酸 碱基 脱氧核糖 二 、基础知识 A G C T 1、DNA的基本单位－脱氧核苷酸 那么DNA分子的平面结构怎样呢？ 脱氧 核糖 含氮碱基 磷酸 1 2 3 4 5 O 2、DNA分子的平面结构 5'端 3'端 规定： DNA分子的3′ 端与5′ 端 -OH端为3′ ; 磷酸基团的末端为5′。 A T G C A G C T 氢键 5'端 3'端 2、DNA分子复制的条件 参与的组分 在DNA复制中的作用 解旋酶 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的模板 4种脱氧核苷酸 合成子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 引物 使DNA聚合酶能够从引物的 3′ 端开始连接脱氧核苷酸 解旋酶 DNA母链 4种脱氧核苷酸 DNA聚合酶 引物（ RNA） 打开DNA双链 模板 合成子链原料 催化子链合成 使DNA聚合酶能从引物3′端开始连接脱氧核苷酸 体外扩增DNA 如何提供相似环境？ 变性（ 80-100℃ ） Taq聚合酶（耐高温） 20—30个核苷酸构成DNA或RNA * PCR的反应过程 1、PCR的反应步骤 变性、复性和延伸 靶序列 靶序列 PCR 循环第一步 ：加热变性 靶序列 靶序列 引物 Ⅰ 引物 Ⅱ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ PCR 循环第二步 ：引物与靶序列退火 靶序列 靶序列 引物Ⅰ 引物Ⅱ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ Taq DNA 聚合酶 PCR 循环第三步 ：引物延伸 靶序列 靶序列 第1个 PCR 循环完成后 ：得到两个拷贝的靶序列 三、PCR的总结 时间（min） 温度 （℃） 适温延伸 高温变性 低温复性 重复1~3步30轮 3、DNA复制的方向 DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸 2、步骤：变性 ——复性——延伸 原理： 利用DNA分子的热变性原理，通过控制温度来控制双