内容正文:
课题目标:
1.初步掌握测定土壤中微生物数量的方法。
2.掌握测定微生物数量工具的使用。
1、直接计数法:
最常用的是显微镜直接计数:先将待测样品制成悬液,取一定量的悬液滴加在血球计数板上,放在显微镜下观察微生物数目,然后计算一定容积里样品中微生物的数量。
2.间接计数法
稀释涂布平板法。
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(2)原理
(1)常用方法:
分组讨论,完成下列问题:
1.怎样把土壤样液稀释103倍?一般选择菌落数为多少的平板进行计数?
2.涂布平板具体操作步骤
3.为了增强实验的说服力和准确性,设计实验应遵循什么实验原则?你打算怎么做?
无菌操作
做好标记
规划时间
(3).微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌:30~37℃培养1~2d
放线菌:25~28℃培养5~7d
霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。
在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
每克样品中的菌落数=(C÷V)×M
其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。
将1mL样液稀释10000倍,在3个平
板上用涂布法分别涂布0.1mL稀释液;
经适当培养后,3个平板的菌落数分别
为39,42,和45。据些可得出每毫升
样液中的微生物数为 个。
4.2×106
但是,A同学确信自己的实验操作准确无误,与其他同学的结果之所以不相同,是因为自己所选用的土壤样品不同.但是,A同学在设计实验的时候并没有设置对照,因而此时也拿不出令同学们信服的证据.
你能通过设置对照,帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素吗?
{
显微镜直接计数法
(实验步骤,计算公式,注意事项)
1.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…( )
A.2.34×108 B.2.34×109
C.234