内容正文:
1.情境激趣
2.温故知新
基本技术
1.制备培养基
2.接种技术
3.无菌技术
2.温故知新
制备培养基
定容
称量
溶化
分装
调pH
包扎
灭菌
倒平板
称量
计算
2.温故知新
接种技术—平板划线法
2.温故知新
接种技术—稀释涂布平板法
2.温故知新
无菌技术
消毒:煮沸消毒法、 巴氏消毒法 、化学药剂消毒法、紫外线消毒法
灭菌:灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、干热灭菌
(一)筛选菌株
1、实例: DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术,此项技术要求使用耐高温(93 ℃)的DNA聚合酶。
启示:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
原因:因为热泉温度70~80 ℃,淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。
3.理论指导
3.理论指导
筛选菌株
原理
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他种类微生物生长。
3.理论指导
筛选菌株
①选择培养基
一种氨基糖苷类药,其作用机制是作用于细菌体内的核糖体,抑制细菌蛋白质合成,并破坏细菌细胞膜的完整性。
选择性抑菌剂,可抑制细菌的生长,并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。
孟加拉红又叫虎红
3.理论指导
筛选菌株
①选择培养基
概念:将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
3.理论指导
筛选菌株
①选择培养基
方法a
加入特殊物质
方法b
改变营养物质
方法c
改变培养条件
营养构成:碳源、氮源、水、无机盐
生长条件:pH、特殊物质、气体要求
圆褐固氮菌生活于土壤中,能以氮气作为氮源。请探讨、交流实验室分离圆褐固氮菌的方法。
提示:配制无氮培养基作为选择培养基。
4.理论指导
2.2×106株/克
统计菌落数目
生物科学社
3.理论指导
统计菌落数目
方法
稀释涂布平板法,当样品的
稀释度足够高时,聚集的菌种被分散开来。培养基表
面生长的一个菌落,来源于
样品稀释液中的一个活菌。
原理
3.理论指导
统计菌落数目
菌落数目的选择
稀释度的确定
30~300
不同微生物采用不同稀释度
第一次选择范围宽泛
3.理论指导
统计菌落数目
数据处理
2.34×109株/克
平均数:234
稀