内容正文:
第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生(学案)
一、学习目标:
①说出基因工程的含义并指出基因工程的主要内容
②说出限制性核酸内切酶的含义及作用特点
③说出DNA连接酶的作用
④简述质粒的含义及其在基因工程中的作用
二、学习过程:
引入:棉铃虫损害棉花的花蕾,使棉花减产,而传统用农药杀灭棉铃虫的方法不仅污染环境且效果逐年下降,因此我们是否能寻求新的方法使棉花自身抵抗棉铃虫?
1、转基因棉花的培育流程
获得 基因 形成 导入 表达
2、三大工具的特点及作用
(1)载体:
作用:将外源基因(目的基因)送入受体细胞
种类:最常用的载体 ,其他载体
本质:
(2)限制性核酸内切酶
作用:能够 和 DNA分子内一小段特殊 的酶
部位:
结果:
已知限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—A↓AGCTT—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,请画出切割后的粘性末端
(3)DNA连接酶
作用:具有 的两个DNA 连接起来
部位:
活动:模拟重组DNA的构建
任务一:已知EcoRI的识别序列和切点是-G↓AATTC-,将多个目的基因1与多个质粒经酶切后混合并加入DNA连接酶,可能得到哪些不同的结果(最多考虑切割片段的两两连接)?
任务二:已知EcoRI和HindⅢ的识别序列和切点分别是-G↓AATTC-和-A↓AGCTT-,将多个目的基因2与多个质粒经酶切后混合并加入DNA连接酶,可能得到哪些不同的结果(最多考虑切割片段的两两连接)?
三、思维拓展:
1、已知BamHI和BglⅡ的识别序列和切点分别是-G↓GATCC-和 -A↓GATCT-,在质粒上有BamHI的一个切点,在目的基因的两侧各有1个BglⅡ的切点。请问能否将目的基因与质粒连接在一起?为什么?
2、下图表示四种限制性核酸内切酶BamHⅠ, EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的识别序列和切割位点。为防止酶切后含目的基因的DNA片段自身连接呈环状,下列不能同时切割的目的基因的两种酶是
图1 图2
A. EcoRI和HindⅢ B. EcoRI和BglⅡ
C. BamHⅠ和HindⅢ D. BamHⅠ和BglⅡ
$$
第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生
喷洒农药对棉铃虫种群密度影响的曲线图
普通棉花(无抗虫特性)
苏云金芽孢杆菌
获得
抗虫基因
导入
棉花细胞
(目的基因)
载体
与 连接
(受体细胞)
重组DNA分子
抗虫性状
表达
1、基因载体
作为运载工具,将外源基因(目的基因)送入受体细胞。
作用:
质粒(最常用)、噬菌体和某些动植物病毒
种类:
本质:
DNA分子
细菌、酵母菌、放线菌等
最常用的是大肠杆菌的质粒
来源:
结构:
双链环状
特点:
自我复制
2、限制性核酸内切酶
能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。
含义:
磷酸二酯键
切割部位:
产生相同的粘性未端
作用结果:
大肠杆菌中的一种限制性核酸内切酶(EcoRI)只能识别GAATTC序列,并只能在G和A之间切开
举例:
5,
5,
5,
5,
3,
3,
3,
3,
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
酶Ⅰ
酶Ⅱ
已知限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—A↓AGCTT—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,请画出切割后的粘性末端(参看课本P2图1-1)
DNA片段
DNA片段
C
G
G
C
C
G
T
A
T
A
A
T
A
T
G
C
G
C
G
C
T
A
A
T
C
G
T
A
T
A
A
T
A
T
G
C
T
A
T
A
C
G
G
C
C
G
T
T
A
A
A
T
T
G
C
T
A
T
A
A
3、DNA连接酶
磷酸二酯键
连接部位:
将具有末端碱基互补的两个DNA片段连接起来
作用:
C
G
G
C
C
G
T
T
A
A
A
T
T
G
C
T
A
T
A
A
活动:模拟重组DNA的构建
活动说明:4人为一