内容正文:
第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生
浙教版普通高中课程标准实验教科书
生物选修3第1章
蓝色妖姬
蓝色妖姬的产生
目的基因
受体细胞
大胆猜测需要哪些工具?
蓝色素基因
紫罗兰
玫瑰
导入
基因工程培育蓝色妖姬的关键步骤:
关键步骤一:
在体外对含有蓝色素基因的DNA分子进行切割
关键步骤二:
蓝色素基因与载体连接
关键步骤三:
蓝色素基因导入受体(玫瑰)细胞
基因的剪刀——限制酶
基因的载车——载体
基因的针线——DNA连接酶
一、限制性核酸内切酶——基因剪刀
以大肠杆菌细胞内获得得ECOR1为例
粘性末端
动手试试吧
提示:剪刀、针线无情,请小心。
提供的物品:
剪刀、两种含有目的基因的DNA片段
要求:
一个DNA片段用ECOR1限制酶切;另一个DNA片段用PstⅠ限制酶切。
背景知识提供:
ECOR1识别序列:GAATTC,特定切点:G与A之间
PstⅠ识别序列:CTGCAG,特定切点: A与 G之间
一、限制性核酸内切酶 ——基因剪刀
1.来源:微生物
2.种类:4000多种
3.功能:
识别和切割特定的核苷酸序列
4.限制酶作用的部位
磷酸二酯键(梯子的扶手)
而不是氢键(梯子的踏板)
5.结果
两个相同的黏性末端
G
C
T
T
A
T
G
C
A
T
C
G
A
A
二、基因进入受体细胞的载体——基因运输车
讨论:具备哪些条件才能充当“基因运输车”?
1、外源DNA片段怎样才能插入载体呢?
2、插入载体的DNA片段怎样才能确保自己在受
体细胞分裂时不被丢失从而稳定地存在于子
细胞内?
3、目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉?
4、如果载体对受体细胞有害将怎样?
1、载体必须具备的条件:
A、具有多个 ,以便与外源基因插
入其中;
B、具有特殊的遗传 ,便于进行筛选。
C、能够在宿主细胞中 ;
D、对受体细胞 。
2,载体的种类:
受体细胞
细菌
植物细胞
动物细胞
限制酶切点
标记基因
复制并稳定地保存
无害
载体的种类
质粒、噬菌体
植物病毒
动物病毒
3、基因工