内容正文:
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题2 微生物的培养与应用
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一、研究思路
1、PCR技术及提示
2、实验室微生物的筛选原理(P21)
3、选择培养基(阅读配方)
(一) 筛 选 菌 株
人为提供有利于目的菌株的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。
能分解尿素的细菌的筛选
阅读教材22页第一大段相关内容,并思考回答下列问题:
1.在培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质?
碳源是葡萄糖,氮源是尿素。
2.分析该配方的培养基对微生物是否具有筛选作用?如果有,又是如何进行筛选的?
有筛选作用。尿素是培养基中的唯一氮源,因此,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
答:不一定,有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖,因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需要的微生物,还需要进一步的验证。
3.只要能够在选择培养基上生长的微生物是否就是所需要的微生物?
统计菌落数目的理论依据是:
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。因此,恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确,通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上,培养后再选择菌落数在30~300的平板进行计数。
(二) 统计菌落数目
1.想一想,如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?
答:统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数的平均值,然后按课本旁栏的公式进行计算。
实例分析
第一同学只涂布了一个平板,没有设置重复组,因此结果不具有说服力。
第二位同学考虑到设置重复组的问题,涂布了三个平板,但是其中1个平板的计数结果与2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。
实例启示
1、在实验设计时,一定要涂布至少3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力和准确性
2、在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验。
微生物数量测定方法
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