人教版高中生物选修1专题二课题3　分解纤维素的微生物的分离(共17张PPT)

专题2 :微生物的培养与应用 学习目标： 1.简述纤维素酶的种类及作用 2.掌握从土壤中分离纤维素分解菌的操作技术 纤维素，一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子多糖类化合物 一、基础知识 1.某些微生物能分解纤维素，是因为它们能够产生纤维素酶。 2.纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、 Cx酶和葡萄糖苷酶。 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 纤维素酶水解滤纸实验 ①取二支20mL的试管 ②各加入一张滤纸条 ③分别加11mL、10mL 0.1mol/L的PH为4.8的醋酸－醋酸钠缓冲液 ④乙试管加入1mL纤维素酶 ⑤将试管放在140r/min的摇床上振荡1h 3.纤维素分解菌的筛选 1）方法：刚果红染色法 2）原理： 纤维素 刚果红 红色复合物 纤维素 纤维素酶 红色复合物消失 出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 分解 请根据实验流程图和提供的三个资料，思考有关问题，然后进行实验设计，并写出详细的实验方案。在小组内进行交流。 (1)土壤取样的环境是怎样的？作出这种选择的理由是 什么？ (2)选择培养基培养基对微生物是如何进行选择的？ (3)选择培养用液体培养基还是固体培养基？为什么？ (4)刚果红染色法有几种方法？怎样操作？两种方法各 有哪些优缺点？ 选择纤维素丰富的环境，因为在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高。 土壤取样 选择培养 1.用什么样的培养基进行选择培养？ 以纤维素为唯一碳源的培养基，只有纤维素分解菌能够生长繁殖，其他微生物生长受到抑制。 2.用液体培养基还是固体培养基？为什么？ 液体培养基，因为可以获得更多菌体，而且进行稀释涂布操作更简单。 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1、制备培养基:参照旁栏中的比例 2、涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上30℃倒置培养 挑选产生透明圈的菌落 参照课本刚果红染色法，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落 刚果红染色法 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进 行颜色反应 方法二：在倒平板时就加入刚果红 思考：这两种方法各有哪些优点与不足？ 优点 缺点 方法一 显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂 方法