动物的克隆第2课时(共21张PPT)

动物的细胞融合技术及其应用 1.简述动物的细胞融合技术及应用。 2.描述动物细胞全能性表现程度，说出动物难以克隆的原因。 3.简述动物细胞核移植 目标导读 重难点击 1.动物的细胞融合技术及应用； 自主学习一　动物的细胞融合技术及应用 阅读P31-33介绍：4min 1.说出动物细胞融合及其方法？ 2.说出什么是动物细胞杂交？有何应用？ 3.简述杂交瘤技术制备单抗的基本方法？ 动物细胞融合 生物法 物理法 化学法 单核细胞 动物细胞融合：又动物细胞杂交，是指两个或多个动物细胞融合形成一个细胞的过程。 原理：细胞膜的流动性 诱导动物细胞融合的方法： ①物理法：电刺激。 ②化学法：聚乙二醇。 ③生物法：灭活的仙台病毒。 单克隆抗体的制备 Y形抗体 抗体：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 抗原不纯 抗体不纯 什么是单克隆抗体？ 单克隆抗体：由单个B淋巴细胞经过克隆形成细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 克隆 什么是杂交瘤技术？ 杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 能无限增殖 肿瘤细胞与体细胞融合形成的杂交细胞成为杂交瘤细胞，建立杂交瘤细胞系的技术成为杂交瘤技术。 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 只有杂交瘤细胞才能活 动物细胞培养技术 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 获得杂交瘤细胞 1975年，米尔斯坦（英）和科勒（德） 融合 选择性培养基 抗体检测 问题探究 1.第一次筛选和第二次筛选的目的有何不同？ 2.单克隆抗体有何特点？ 单克隆抗体的优点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高。 第一次筛选：用选择性培养基获得杂交瘤细胞。 第二次筛选：通过抗体检测获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 例题：用a表示骨髓瘤细胞，b表示B淋巴细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为（ ） A. a、aa、ab、bb、b →a、aa、ab →ab培养 B. a、aa、ab、bb、b →ab、bb、b →ab培养 C. a、aa、ab、bb、b →ab →产生特定抗体的ab培养 D. a、aa、ab、bb、b →aa →能无限增殖的aa培养 细胞融合 从脾脏中分离 注射特定抗原 体内培养：从小鼠腹水中提取； 体外培养：从培养液中提取。 活动：简述单抗制备的过程