内容正文:
(1)来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针;
(2)从相应的基因转录获得的mRNA,再通过逆转录得到的探 针,称为cDNA探针。
(3)在体外人工合成的碱基数不多的与相应基因序列互补的DNA片段,称为寡核苷酸探针(ASO探针)。
探针的标记:
为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。
探针的来源有3种:
归纳:
1、构建基因探针:利用已知致病基因的核酸序列
基因诊断的一般程序
2、获取待测组织单链DNA,进行PCR扩增,
热处理后得到大量的单链DNA
3、将单链DNA转到尼龙膜上,观察基因探 针和它能否进行杂交
结果:有杂交DNA分子的说明待测组织中有
已知该致病基因的核酸序列
ASO探针法优点:灵敏度高、特异性强、
费用低。
缺点:一次只能检测一种基因。
4、基因芯片
基因芯片概念:基因芯片,也叫DNA芯片,是将大量特定序列的DNA片段(分子探针)有序地固定在经过处理后的尼龙膜、玻璃片、硅片等支持物上 ,从而能快速、准确地对大量DNA分子序列进行测定和分析的一种类似电脑的芯片。
原理:利用碱基的互补配对原则
(DNA分子杂交)
材料:分子探针,尼龙膜,玻璃片,硅片
基因芯片
制作基因芯片的大致步骤:
确定突变的基因──制作探针──将大量探针有序地固定在硅片等上。
基因芯片
诊断特点:可以用尽可能少的样品和尽可能少的检测次数,检测出多个病人或多种疾病,比普通的基因诊断效率更高
原因:每个芯片的基面上都可划分出数万至数百万个小区,基因芯片技术具有无可比拟的高效、快速
基因诊断的应用
感染性疾病的病原诊断
结核病、柯萨奇B3病毒感染的心肌炎、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV),爱滋病等
各种肿瘤的生物学特性的判断
遗传病的基因异常分析(包括产前诊断)
器官移植组织配型
法医学中个体识别、亲子鉴定
探讨个人基因信息隐私权的保护:
书本74页
第一章
生物科学与健康
第二节 疾病治疗中的生物科学
一、合理使用抗生素
抗生素一般是