2017-2018学年同步备课套餐之生物浙科版选修1课件+讲义：第一部分 (共6份打包)

梳理知识　构建纲要 整合重点　提升技能 突破1　划线分离法和涂布分离法的比较 项目 划线分离法 涂布分离法 操作 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面(也是分离纯化的方法)。每一次划线都从上次划线末端开始，目的是获得由单个细菌形成的标准菌落 将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落 优点 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 可以计数，可以观察菌落特征 缺点 不能计数 (1)吸收量较少，较麻烦 (2)平板不干燥，效果不好，容易蔓延 用途 多用于菌种的纯化 (1)多用于筛选菌株 (2)用于平板培养基的回收率计数 易错提醒　两种分离法的易错点拨 (1)在稀释涂布平板操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果。 (2)每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板，作为实验重复，求平均值，若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者，应舍弃该实验数据，不进行统计、计算。 (3)平板冷凝后，皿盖上会凝结成水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基中造成污染。 突破体验 1.微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题： (1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为 。 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。 (3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→ (用字母和箭头表示)； 找出图乙中两处错误的操作： 、 (用字母表示)。 (4)上图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基培养12 h后的实验结果，如果培养基上 ，则说明无菌操作基本符合要求。 答案　(1)倒平板　(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生　(3)G→F→E→C→D→H　C　D　(4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点 突破2　培养基的配制和无菌技术 1.培养基的制备(以LB固体培养基为例) 计算→称量→融化→灭菌→倒平板。 2.无菌技术 (1)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法等，对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。 (2)微生物培养时获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下内容： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料、用具与周围的物品相接触。 3.倒平板操作 待培养基冷却至60 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，严格遵循教材上的操作步骤。 4.划线分离法 划线分离法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 5.涂布分离法 先将菌液进行系列稀释，然后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分解成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。 突破体验 2.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答下列相关问题： (1)图甲是利用 法进行微生物接种，图乙是利用 法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是 和 ；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是 和酒精消毒。 (2)接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？ 。 (3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？