[中学联盟]湖北省宜昌市葛洲坝中学高中生物选修一：专题5课题2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》学案

专题5课题2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》 【学习目标】 1.体验PCR（多聚酶链式反应）技术这一常规分子生物学实验方法 2.理解PCR的原理 3.讨论PCR的应用 【知识链接】 人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析，而分析DNA碱基序列就需要一定的DNA片段，PCR技术就能实现DNA分子的扩增。 【新知预习】 一、基础知识[来源:Z|xx|k.Com] 1．DNA扩增 (1)生物体内DNA分子的复制条件 ①原料：4种________________。②模板：DNA母链。③酶：A.____________，作用是打开DNA双链。B．DNA聚合酶，作用是催化合成DNA子链。④引物：一小段DNA或____________，使DNA聚合酶能够从引物的____________开始连接脱氧核苷酸。⑤能量：由ATP提供。 (2)PCR的原理 ①条件：体外进行DNA复制时，参与的组分：DNA模板、分别与两条模板相结合 的______________、四种脱氧核苷酸、耐热的________________，同时PCR反应需在一定 的____________中进行，通过控制____________使DNA复制在体外反复进行。 ②子链的延伸方向为从________向________。 ③原理：在________°C的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这个过程称 为____________；当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链结构。 这一过程称为____________。 2．PCR的反应过程 (1)过程：PCR一般要经历____________多次循环，每次循环可以分为____________、复性[来源:Z|xx|k.Com] 和____________三步，所需要的温度分别约为：95 °C、________°C、72 °C。从第二轮循环开始，________________作为模板，参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会 与____________结合，进行DNA的延伸。 (2)结果：DNA聚合酶能特异的复制处于____________之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈____________扩增。 二、操作提示 1．避免外源DNA污染：所用仪器、缓冲液