[中学联盟]湖北省宜昌市葛洲坝中学高中生物选修一：专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》学案

专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》 【学习目标】 1．尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法 2．了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理 【知识链接】 血红蛋白由四条链组成，含两条α链和两条β链，其中每条肽链环绕一个亚铁血红素基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳，血红蛋白因含有血红素而呈现红色。 【新知预习】 一、基础知识 1．凝胶色谱法 (1)概念：凝胶色谱法也称做分配色谱法，是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。 (2)原理：大多数凝胶是一些微小的________球体，内部有许多贯穿的通道，当____________不同的蛋白质通过凝胶时，________________的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程________，移动速度较慢；而______________的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程________，移动速度较快。____________不同的蛋白质因此得以分离。 2．缓冲溶液 (1)作用：在一定范围内，缓冲溶液能抵制外界的________对溶液pH的影响，维持pH基本不变。 (2)配制：通常由1～2种________溶解于水中配制而成。调节________的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。 3．电泳 (1)概念：是指_______粒子在电场的作用下发生_______的过程。 (2)原理：许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的________下，这些基团会带上____________。在电场的作用下，这些________分子会向着与其所带电荷________的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子________的差异以及________的大小、________不同，使带电分子产生不同的________，从而实现样品中各种分子的分离。 (3)常用的电泳方法：琼脂糖凝胶电泳和______________电泳。 二、实验操作 蛋白质的提取和分离一般分为四步：________、粗分离、纯化和纯度鉴定。 1．样品处理和粗分离 (1)红细胞的洗涤：采集血样，____________离心，吸取血浆后加________洗涤，再低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色。目的