内容正文:
一、植物组织培养及其影响因素
1.植物组织培养
(1)理论基础:细胞的全能性。
(2)植物细胞的全能性
当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。
(3)基本过程
2.影响植物组织培养的因素
(1)材料选取
①不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。
②对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。
③菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
(2)营养成分
常用的一种培养基是 MS培养基,其主要成分包括:
①大量元素,如 N、P、K、Ca、Mg、S。
②微量元素,如 B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。
③有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。
(3)植物激素:生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,二者的浓度、使用顺序及用量比例等都会影响实验结果。
(4)外界条件:如pH、温度、光照等环境条件。
二、菊花组织培养的实验操作
1.制备MS固体培养基
(1)配制各种母液:大量元素、微量元素,激素类、维生素类等有机物。
(2)配制培养基。
(3)灭菌:高压蒸汽灭菌。
3.接种
(2)菊花茎段插入培养基时注意方向,不要倒插。
4.培养:最好在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒。培养温度控制在18~22_℃,pH控制在5.8左右,每日用日光灯光照12 h。
5.移栽和栽培
(1)移栽前应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
(2)移栽后,每天观察并记录幼苗生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。
[共研探究]
1.植物组织培养
(1)概念:在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。
(2)原理:植物细胞的全能性。
(3)基本过程
根据植物组织培养的过程,回答下列问题:
①A过程表示脱分化,是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,又叫去分化。脱分化的实质是已分化的细胞回到未分化状态。
②B是愈伤组织,其特点是:细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
③C过程表示再分化,是指愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。
(4)影响植物组织培养的因素
①内因
植物的种类、材料的年龄或保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说,容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。例如,菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝作材料(选取生长旺盛的嫩枝进行组织培养的原因是嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化)。
②外因
c.环境因素:pH、温度、光照等
2.细胞分化
(1)概念:在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
(2)实质:基因的选择性表达。
(3)结果:形成不同的细胞和组织。
3.植物细胞的全能性
(1)概念:已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。
(2)原因:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。
(3)全能性大小:一般分化程度越低的细胞,全能性越高。特例:卵细胞的分化程度和全能性都比较高。
(4)全能性表达的条件
①离体的植物组织或细胞(用于离体培养的植物器官或组织片段,叫做外植体)。
②一定的营养物质。
③植物激素。
④其他适宜的外界条件。
(5)在生物体内,细胞并不表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官的原因是什么?
提示:细胞全能性表达的基本条件之一是处于离体状态。例如,植株上的分生组织细胞在体内只能进行分裂分化,形成不同的组织,但不能表现出全能性,这是生物体内基因程序性表达的结果。
[总结升华]
1.细胞全能性大小与细胞种类的关系
(1)受精卵>生殖细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞;分化程度低的细胞>分化程度高的细胞。
(2)一般地说,离体后的植物细胞的全能性在一定条件下可充分体现。
(3)离体的动物细胞的全能性受到限制,但其细胞核的全能性可借助卵细胞的细胞质体现出来。
(4)未离体的细胞的全能性不能表达,只是在机体的调控下进行定向分化。
2.植物激素在组织培养过程中的重要作用
(1)在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
(2)激素使用的先后顺序及同时使用时,两者用量的比例对细胞分裂和分化的影响
①激素使用的先后顺序产生的影响
使用顺序
实验结果
先使用生长素,后使用细胞分裂素
有利于细胞分裂,但细胞不分化
先使用细胞分裂素,后使用生长素
细胞既分裂也分化
同时使用
分化频率提高
②激