内容正文:
环节一
环节二
环节三
学业达标测评
第一节
生物体活细胞
细胞内
细胞外
温度、酸碱性
空间
结构
变性
酶的活力
底物的消耗量
产物的生成量
分光光度
一、酶的存在及提取
1.酶是在 中合成的。其参与反应部位可以在 ,也可以在 。
2.在酶的提取过程中, 等多种环境条件都可能影响酶的
,导致酶 ,甚至丧失活力。因而提取出的酶首先需要检测 。
3.酶的活力通常以单位时间内 或者在单位时间内 来表示。在测定单位时间内麦芽糖的生成量来检测淀粉酶的活力的实验中,测麦芽糖的产量可用 法。
充分研磨
使酶失活
NaOH溶液
钝化酶的活性,使反应终止
二、酶活力的测定方法和原理
1.提取酶液:研磨水稻种子时需加石英砂,目的是 。制取匀浆并离心后,取上清液,其中一份要在水浴中加热,目的是 。
2.滴加酶液。
3.恒温处理。
4.钝化处理:酶促反应进行一段时间后要向反应液中加物质的量浓度为0.4 mol/L的 ,目的是 。
2mL3,5—二硝基水杨酸
沸水浴
麦芽糖
比色杯
520
5.测定吸光值:测定吸光值时要把反应液与 试剂混匀,并 5 min,才能产生 产物。然后分别移入四支 ,用分光光度计在波长 nm处进行比色。
6.绘制标准曲线。
预习完成后,请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中
问题1
问题2
问题3
问题4
一、植物淀粉酶活力的测定
原理:淀粉酶将淀粉水解成麦芽糖。在NaOH和丙三醇存在下,3,5二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈橘红色,在520 nm波长处有最大吸收峰,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。
如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液,经酶促反应后,在酸性条件下,用标准高锰酸钾溶液滴定多余的H2O2,反应如下:
5H2O2+2KMnO4+4H2SO4―→5O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4
根据消耗的H2O2的量计算出过氧化氢酶的活力。
酶活力用每克鲜重样品1 min内分解H2O2的毫克数表示。
过氧化氢酶活力[mg/(g·min)]=(A-B)×(VT/VS)×1.7/W×t
式中:A为对照KMnO4滴定毫升数(mL);B为酶反应后KMnO4滴定毫升数(mL);VT为提取酶液总量(mL),VS为反应时所用酶液量(mL),W为样品鲜重(g);t为反应时间(min);1.7为换算系数,即每消耗1 mL物质的量浓度为0.1 mol/L的高锰酸钾溶液,相当于样品中含有1.7 mgH2O2。
用分光光度法也可测定过氧化氢酶的活力。在有过氧化氢存在时,H2O2将愈创木酚氧化生成茶褐色物质,后者在波长为470 nm处有最大吸收峰,再用721型分光光度计进行测定。
探究影响酶活力的因素
为了研究温度对某种酶活性的影响,设置三个实验组:A组(20 ℃)、B组(40 ℃)和C组(60 ℃),测定各组在不同反应时间内的产物浓度(其他条件相同),结果如图。回答下列问题:
(1)三个温度条件下,该酶活性最高的是________组。
(2)在时间t1之前,如果A组温度提高10 ℃,那么A组酶催化反应的速度会________。
(3)如果在时间t2时,向C组反应体系中增加2倍量的底物,其他条件保持不变,那么在t3时,C组产物总量________,原因是_________________________。
(4)生物体内酶的化学本质是____________,其特性有____________(答出两点即可)。
【审题导析】
eq \x(胰蛋白酶)—eq \b\lc\|\rc\ (\a\vs4\al\co1(—\x(酶的特性),—\x(酶的作用特点),—\x(影响酶活力的因素)))
【精讲精析】 (1)在60 ℃条件下,反应的最终产物浓度比20 ℃和40 ℃条件下小很多,说明酶在60 ℃条件下最终失活。20 ℃与40 ℃条件下相比,40 ℃时酶促反应到达反应平衡的时间短,说明40 ℃条件下酶活性较高。(2)在时间t1前,如果A组温度提高10 ℃变成30 ℃,由该酶活性随温度的变化规律可知,30 ℃条件下的该酶活性大于20 ℃条件下的,那么A