河南省林州市第一中学 生物人教版（选修一 生物技术实践）5.2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 导学案

选修1课时13 多聚酶链式反应扩增DNA片段 班级:__________姓名:__________设计人__________日期__________ 课前预习 · 预习案 学习目标 1 1．体验PCR常规的分子生物学实验方法。[来源:学科网ZXXK] 2．理解PCR的原理。 3．讨论PCR的应用。 自主梳理 1 1．PCR原理： (1)概念：PCR，即________，能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝，是一种体外迅速________的技术。 (2)原理。 ①DNA变性：在________的温度范围内，________解体，双链分开的过程。 ②DNA复性：当________后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链的过程。 ③DNA合成：DNA聚合酶从引物的________开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的________向________延伸。 (3)条件 2．PCR的反应过程： (1)循环次数：一般是________次。 (2)过程。 ①变性：当温度上升到________时，双链DNA________。 ②复性：温度下降到________，两种引物通过________与两条单链DNA结合。 ③延伸：温度上升到________，溶液中的四种脱氧核苷酸在________的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 (3)结果：DNA聚合酶只能特异地复制处于________之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈________扩增。 3．PCR的实验步骤： 准备：按照PCR反应体系的配方将所需试剂摆放于实验桌上 ↓ 移液：用________按照配方在微量离心管中依次加入各组分 ↓ 混合：盖严离心管口的盖子，用手指轻轻弹击管的侧壁，使反应液________ ↓ 离心：将微量离心管放在离心机上，离心约10s。目的是使反应液集中在________ ↓ 反应：将离心管放入________中，设置程序进行反应 4．PCR的操作提示： (1)为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的一些用具及缓冲液、蒸馏水等在使用前必须进行________。 (2)PCR所用的缓冲液和酶应________，并在________下储存。[来源:Z&xx&k.Com] (3)在微量离心管中添加反应成分时，