广东省信宜市信宜中学2025—2026学年高二下学期期中考试生物学试题

参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B C B C A B B C B A 题号 11 12 13 14 15 16 答案 C A D C A ACD 1．B 【分析】泡菜的制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、泡菜腌制时利用的主要菌种是乳酸菌，不产生气体，故不用定期打开泡菜坛盖排气，A错误； B、制作泡菜利用的乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，发酵过程需保证无氧环境，故泡菜坛的选择、发酵过程中坛沿要注满水都有利于泡菜的无氧发酵，B正确； C、泡菜在发酵过程中出现的白膜可能是由于氧气进入发酵罐内，导致酵母菌在发酵液面大量繁殖而引起的，而乳酸菌是厌氧呼吸，不会在发酵液表面出现该情况，C错误； D、制备菹时，盐水煮沸冷却后才能使用，以防止将乳酸菌杀死，D错误。 故选B。 2．C 【分析】用酵母菌酿酒的原理：在无氧的条件下，酵母菌发酵能把葡萄糖分解成酒精和二氧化碳。在制作酒时，先加入的酵母菌数量太少，因此需要酵母菌先大量的生长和繁殖，所以开始先通入一段时间的空气，然后隔绝空气，目的是让酵母菌先进行有氧呼吸，快速增加酵母菌的数量，此时不产生酒精，因为在有氧呼吸的情况下酵母菌将有机物分解为二氧化碳和水；只有氧气耗完后，进行无氧呼吸，才将有机物分解为酒精和水。 【详解】A、制作过程中蒸米和烫容器均能达到高温消毒的目的，此过程处理时间比较短，可能灭菌不彻底，A错误； B、发酵过程产生的水是有氧呼吸的产物，无氧呼吸不产生水，B错误； C、晾凉后再加入酒曲，是为了利用其中的微生物，如酵母菌，将糯米中的淀粉分解成葡萄糖，并进一步转化为酒精和二氧化碳，C错误； D、醋酸菌是好氧型生物，酿酒是无氧条件，即使此流程中的温度条件适合酿醋，氧气条件也不满足，D错误。 故选C。 3．B 【分析】无菌技术：（1 ）关键：防止外来杂菌的入侵。（2 ）具体操作：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 【详解】A、耐高温的、需要保持干燥的物品可用干热灭菌法进行灭菌，A正确； B、乙醇能使蛋白质变性，75%酒精浓度是临床消毒浓度，过高浓度的酒精能够使细菌表面的蛋白质凝固，形成一层膜，阻碍酒精分子进一步渗入细菌内部，导致杀菌效果不佳，B错误； C、为了避免周围环境中微生物的污染，接种时应在酒精灯火焰旁进行，C正确； D、巴氏消毒最大的优点是能杀死绝大多数微生物的同时基本不会破坏物质的营养成分，果酒可用巴氏消毒法进行消毒，D正确。 故选B。 4．C 【详解】A、改造后的产甲烷古菌可利用工业废气中的CO2和H2为原料合成生物可降解塑料PHA，PHA是微生物在体内合成的高分子物质，用作能量储备，再结合图可知，代谢类型是自养厌氧型，A正确； B、接种前需要扩大培养增加菌体的数量，扩大培养时使用液体培养基，有利于菌体增殖，B正确； C、发酵工程的中心环节是发酵罐中的发酵，C错误； D、用稀释涂布平板法对产甲烷古菌进行计数，当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，因此计数的结果往往比实际活菌数少，D正确。 故选C。 5．A 【分析】根据图分析，过程①为接种外植体，②为诱导脱分化形成愈伤组织，③为诱导再分化，④为诱变育种，⑤为获得原生质体，⑥是通过获得愈伤组织获得代谢产物。 【详解】A、过程③为再分化，一般是先诱导生芽再诱导生根，根本原因是基因的选择性表达，A正确； B、丙植株是经过化学或物理手段导致其发生了基因突变，因此核基因不一定与甲相同，B错误； C、由于基因突变具有低频率性，所以用射线或化学物质处理不一定能够获得大量的突变体植株，C错误； D、过程⑥利用愈伤组织分裂能力强，可大量获得黄酮类化合物，与愈伤组织全能性高没有关系，D错误。 故选A。 6．B 【详解】A、试管奶牛的培育经过了精子和卵细胞的体外受精，属于有性生殖，A错误； B、对供体母牛注射促性腺激素，可以促进其超数排卵，获得更多的卵母细胞，用于体外受精，B正确； C、从优良母牛卵巢中采集的卵母细胞，还需要在体外进行培养，使其发育到减数第二次分裂中期时，才具备与获能精子进行体外受精的能力，不能直接与获能精子进行体外受精，C错误； D、在进行胚胎移植前，可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定。这样既可以在不影响内细胞团发育的前提下确定胚胎性别，又能满足生产中对不同性别后代的需求，D错误。 7．B 【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：基因的选择性表达； 2、动物细胞培养的条件： （1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害； （2营养物质：无机物（无机盐、微量元素等）、有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）、 血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) ； （3）温度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）； （4）气体环境（95%的空气+5%CO₂的混合气体），其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定。 【详解】A、动物培养的过程中要定期更换培养液，以便清除代谢产物防止废物积累对肺上皮干细胞自身产生危害，A正确； B、肺类器官自组装成肺类装配体1的过程为器官自组装或器官与细胞组装成装配体的过程而不是动物细胞融合的过程，B错误； C、肺上皮干细胞的分化程度高于ES细胞，具有组织特异性，即只能增殖分化形成肺部细胞，不能形成各种细胞，C正确； D、由题意及图示可知，与体内器官相比，肺类装配体2的结构更与体内器官相似，因此推测肺类装配体2较肺类装配体1 的仿真度更高，D正确。 故选B。 8．C 【分析】受精作用过程：a、顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠；b、透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应；c、卵细胞膜反应：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程；d、精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。 【详解】A、精子获能是在获能溶液或专用的受精溶液中进行，获能液的有效成分有肝素、Ca2+载体等，而不是Ca2+，A错误； B、受精完成的标志是雌、雄原核融合形成合子，而不是观察到两个极体或雌、雄原核，B错误； C、精子入卵后，卵细胞膜会迅速发生生理反应，即卵细胞膜反应，这是防止多精入卵受精的第二道屏障，C正确； D、精子的大小与动物体型大小无关，同种动物的雄原核一般比雌原核小，D错误。 故选C。 9．B 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、A途径是植物组织培养进行快速繁殖，该过程主要是有丝分裂，有丝分裂过程中可能发生基因突变，但不会发生基因重组（基因重组一般发生在减数分裂过程中），所以A途径中发生的可遗传变异主要是基因突变，A错误； B、B途径中花药离体培养步骤体现了生殖细胞的全能性，该育种方法可以明显缩短育种年限，B正确； C、次生代谢产物不是生物生长和生存所必需的物质，而初生代谢产物才是生物生长和生存所必需的，E途径得到的是次生代谢产物，C错误； D、通过植物组织培养（如A途径）得到的植株体细胞染色体数与原植株相同；通过单倍体育种（B途径），先得到单倍体，其染色体数是原植株的一半，再经染色体加倍后与原植株相同；植物体细胞杂交（F途径）得到的植株体细胞中的染色体数是两融合细胞染色体数之和，与原植株不同，所以上述应用得到的植株体细胞中的染色体数并不都相同，D错误。 故选B。 10．A 【详解】A、可利用机械方法或胰蛋白酶将胚胎甲状腺组织分散成单个细胞制成细胞悬液进行培养，A正确； B、甲状腺细胞应置于95%空气和5%CO₂的混合气体环境中培养，B错误； C、激活cAMP信号可诱导hFTO成熟为具有甲状腺激素分泌能力的hMTO，hMTO与hFTO相比，细胞中的RNA和蛋白质发生改变，遗传物质DNA未改变，C错误； D、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，甲状腺类器官的培养过程中没有体现细胞的全能性，D错误。 11．C 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A．DNA的粗提取利用的是DNA不溶于酒精而某些蛋白质溶于酒精的性质，初步分离DNA和蛋白质，A正确； B．琼脂糖溶液混合的核酸染料能与DNA分子结合，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，B正确； C．PCR的延伸阶段需耐高温的DNA聚合酶（如Taq酶）催化合成DNA链，在复性阶段引物与模板结合时该酶未起作用，C错误； D．DNA与二苯胺需沸水浴加热后显蓝色，D正确； 故选C。 12．A 【详解】A、据题图分析可知，磷酸基团为DNA的5'端，羟基为DNA的3'端，由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，所以在PCR扩增中引物与DNA模板链的3'端结合进行延伸，故选择图中引物②和引物③，A错误； B、PCR过程中，以引物为起点进行DNA链的延伸。在第1次循环后，得到的两个DNA分子只有一端含引物；第2次循环后，得到的4个DNA分子中有2个DNA分子两端都含引物；第3次循环结束后可以得到两端都含引物的目的基因，B正确； C、在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，C正确； D、由题干信息和图b可知，2号来自含蛛丝蛋白基因的质粒，3、5、8号羊的电泳结果与2号相似，说明3、5、8号羊含有蛛丝蛋白基因，使用抗原 - 抗体结合法可能在3、5、8号羊的乳汁中检测到蛛丝蛋白，D正确。 故选A。 13．D 【详解】A、外植体消毒后需用无菌水冲洗，而非普通蒸馏水，否则可能引入微生物导致污染，A错误； B、胚胎分割通常选择桑葚胚或囊胚，但囊胚期的细胞已开始分化（如内细胞团和滋养层），B错误； C、单克隆抗体制备依赖细胞融合和增殖，不涉及细胞全能性；植物体细胞杂交需通过细胞全能性形成植株，C错误； D、核移植技术通过体细胞核移植克隆动物，可保留供核个体的遗传性状，D正确。 故选D。 14．C 【详解】A、②③④为固体培养基，固体培养基需要加入琼脂作为凝固剂，该灰色浅灰链霉菌是精氨酸合成缺陷型，自身不能合成精氨酸，要筛选产比考扎霉素的菌株，需在培养基中添加精氨酸，这样缺陷型放线菌才能生长，所以含有精氨酸的培养基为①②④，A错误； B、配制该灰色浅灰链霉菌（细菌）培养基时应先将pH调至中性或弱碱性再进行高压蒸汽灭菌，B错误； C、为了防止将特定营养成分带入培养基，故进行原位影印操作时，先将无菌绒布转印至培养基③（缺乏精氨酸的培养基），再转印至培养基④（含有精氨酸的培养基），C正 确； D、甲菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明甲菌落只能生活在完全培养基中， 不能生活在缺精氨酸的完全培养基中，即甲菌落是精氨酸合成缺陷型，可能会产生比考扎霉素，而乙菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无精氨酸均可生存，所以乙菌落不是精氨酸合成缺陷型，不能产生比考扎霉素，故应挑取甲菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素，D错误。 15．A 【详解】A、若用Hind Ⅲ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，转录的产物可能不同，A错误； B、若用Pvu Ⅰ酶切，重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因（TetR），因此在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因，B正确； C、琼脂糖凝胶电泳技术可以分离不同大小的DNA片段，重组质粒的大小与质粒不同，能够鉴定重组质粒构建成功与否，C正确； D、我们利用四环素或氨苄青霉素对受体菌进行筛选，首要条件就是受体菌本身应不具有对这两种抗生素的抗性，若受体菌本身有抗性，则无论是否成功导入质粒，受体菌均能在相应抗生素的培养基中存活，D正确。 16．ACD 【详解】A、用电刺激或PEG诱导B细胞与骨髓瘤细胞融合依赖于细胞膜的流动性，而不是细胞间的信息交流，A错误； B、杂交瘤细胞需放在含动物血清且pH为7.2~7.4的培养液中培养，B正确； C、最适浓度也可能在5~10ng·mL-1VC之间，所以应在5~20ng·mL-1VC之间设置更小的浓度梯度来确定其最适浓度，C错误； D、从图中可知，20ng·mL-1VC时杂交瘤细胞数量与不添加VC(0ng·mL-1VC)相比，细胞数量增加，故并未抑制细胞增殖，D错误。 故选ACD。 17.（12分，除特殊注明外，每空2分） 答案：(1) 使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 补充答案：使土壤中的微生物释放（2分）、使微生物分布均匀 （1分），其他意思相近即可 1000/103（1分）补充答案：1千 (2) P1（1分）唯一答案 P1的透明圈直径与菌落直径的比值最大，降解能力最强补充答案：P1的透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值大（2分）、P1的透明圈直径（D）最大（1分），其他意思相近即可。 (3) 先上升后下降 补充答案：先上升（1分）、后下降（1分），其他意思相近即可。上升或下降则无分 高效解磷菌可能通过产生酸性代谢物分解难溶磷 补充答案：高效解磷菌可能产生酸性物质分解难溶磷（2分）、高效解磷菌能降低PH或使PH降低（1分）、高效解磷菌可能通过产生酸性代谢物（1分）、高效解磷菌磷菌可能产生酸性物质（1分），其他意思相近即可 (4) 可将其制成微生物菌肥，增加土壤肥力，促进植物对磷元素的吸收 补充答案：制成微生物菌肥（1分）、增加土壤肥力（1分）、利用该高效解磷菌分解难溶磷，增加土壤磷元素（2分），其他意思相近即可。 18.（12分，除特殊注明外，每空1分） 答案：(1)HER2（1分，补充：表皮生长因子受体） (2) 细胞膜具有一定的流动性（1分，补充：细胞膜的流动性） 灭活病毒（1分，补充：灭活病毒诱导法） (3) 选择 （1分，唯一答案） 既能产生抗体，又能大量增殖（2分）（答到1点得1分，补充：既能迅速大量增殖，又能产生抗体。写产生专一性或特异性抗体不扣分。） (4) 克隆化培养 抗体检测（答到1点得1分，不考虑顺序） (5) 等剂量的磷酸缓冲液（2分，补充：等量的磷酸缓冲液2分，漏等量只得1分） 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用（1分），且效果较其他药物更好（1分）（2分，补充： 抗HER2-ADC能促进BT-474细胞的凋亡1分，效果比其他药物更好1分。 抗HER2-ADC可以抑制过度表达的胃癌细胞的代谢，1分，回归实验目的的，答案合理，酌情给分） 19.（12分，除特殊注明外，每空1分） 答案：（1）MⅡ、减数分裂Ⅱ中期、减数第二次分裂中期、MⅡ中期（1分）（答任意1点即可；答减数分裂中期不给分） 细胞核全能性（2分）（或“体细胞核的全能性”、“全能性”） （2）诱导细胞融合（1分）（答“促进体细胞与去核卵母细胞融合”、“促进细胞融合/介导细胞融合”给1分） Kdm4d的mRNA翻译形成的酶可去除染色体组蛋白上的甲基化修饰，使相关基因更容易表达，促进胚胎发育（2分）（答“去甲基化”或“去除组蛋白甲基化”给 1 分；答“促进相关基因表达”或“使基因更容易表达”、“激活基因”给1分） （2）同期发情（1分，答案唯一） （3）桑葚胚（1分，答案唯一，错别字不得分） 将内细胞团均等分割（2分）（只写“分割内细胞团”，未写“均等”，给1分；答“均等分割”给1分） （4）减少个体差异对实验结果的干扰、遗传背景相同（2分，答1点即可）（或“排除个体差异”、“提高实验结果可比性”、“实验结果更准确”、“基因型相同”、“遗传物质一致”） 20.（12分，除特殊注明外，每空2分） 答案:(1)激活耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶或TaqDNA酶或DNA聚合酶）补充说明：只写耐高温的DNA聚合酶或激活不得分；酶种类写错不得分 (2) 可携带目的（GbVel）基因转移到受体细胞，并将其整合到受体细胞的染色体DNA上 补充说明：携带目的基因（1分），并整合到染色体上（1分），其他意思相近且合理可酌情给分 EcoRI和SacI 补充说明：一种酶1分，酶名称写错不得分，写三种酶且有对的（1种或2种对）得1分，写四种的不得分 (3) Ca2+（CaCl2） 唯2答案 潮霉素（错字不得分） 对获得的转基因棉花植株进行大丽轮枝菌接种处理，（观察其是否患黄萎病）补充说明：进行大丽轮枝菌接种处理（2分）；对棉花植株进行接种处理或接种实验得1分，其他意思相近且合理可酌情给分 第21题评分标准与参考答案（12分） （1）第一空（1分） 标准答案：具有互补的碱基片段 说明： “存在互补序列或片段/能发生碱基互补配对/部分互补，会相互结合，无法作为引物与模板结合”等均可得1分；答“序列不同/序列相反”等错误表述，得0分）。 第二空（2分） 标准答案：引物1和引物4（答对1个得1分，顺序颠倒不扣分，答错不扣分，共2分） （2）第一空（2分） 标准答案：b（唯一答案） 第二空（2分） 标准答案：工程菌b的Noxa蛋白在37℃不表达，仅在42℃热诱导条件下表达（2分） 说明： 完整表述“工程菌b的Noxa蛋白在37℃不表达、42℃表达”两层意思， 如“37℃无Noxa蛋白表达，42℃有Noxa蛋白表达，符合温控诱导的要求”； “工程菌b在37℃时Noxa蛋白不表达，42℃热诱导后才表达，符合温控诱导的设计”； “工程菌b的Noxa蛋白表达受温度调控，37℃无表达，42℃诱导表达，能实现可控表达”等答案即可得2分 只答出其中一层意思的得1分； 答“工程菌b的Noxa蛋白在37℃和42℃都表达/工程菌a更合适”，得0分。 （3）判断与说明（3分） 标准答案：成功（1分）；理由：该工程菌能够靶向小鼠体内的肿瘤组织（2分） 说明： 先答“可以/能/成功”（1分），再说明“肿瘤组织中工程菌数量远高于其他器官，实现了靶向分布”（2分），共3分； 只答“可以或能或成功”但未说明理由，得1分； 答“不能”或理由表述错误（如“各器官数量差不多/肿瘤中数量少”），得0分； 理由中答出“肿瘤组织工程菌数量多、其他器官数量少/实现肿瘤靶向分布”核心意思，如“注射后72小时，工程菌在肿瘤组织中的数量远高于心、肝、脾、肺等器官，说明工程菌能靶向肿瘤组织”； “工程菌在肿瘤中大量富集，其他组织中数量少，体现了靶向性，证明构建成功”； “该工程菌能特异性聚集在肿瘤组织中，实现了肿瘤靶向分布”等均可得2分。 （4）标准答案：将工程菌介导的细菌肿瘤疗法与近红外光照射的光热治疗结合进行联合治疗（2分） 说明： 同时体现“工程菌靶向肿瘤”和“近红外光热治疗”的结合，且逻辑合理，得2分，如： “将近红外光敏材料与该工程菌结合，利用工程菌的肿瘤靶向性将光敏材料递送到肿瘤部位，再通过近红外光照射实现光热治疗，同时热诱导Noxa蛋白表达，双重杀伤肿瘤细胞”； “先将工程菌注射到体内使其靶向肿瘤，再用近红外光照射肿瘤区域，既利用光热杀伤肿瘤，又通过局部热诱导激活工程菌的Noxa蛋白表达，增强治疗效果”。 但答“只使用近红外光热疗法/只使用工程菌靶向疗法”，得0分。 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026学年度第二学期高二期中考试 生物学试题 一、单项选择题（本题共16小题，共40分。第1-12小题，每小题2分；第13-16题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。） 1．泡菜，古称“菹”，《齐民要术》中较为系统地介绍了泡渍蔬菜的加工方法：“收菜时，即择取好者，营蒲束之。作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内瓮中。若先用淡水洗者，菹烂。洗菜盐水，澄取清者，泻者瓮中，令没菜把即止，不复调和。”下列相关叙述正确的是（ ） A．菹在发酵早期会出现一些气体，需要定期打开坛盖排气 B．泡菜坛的选择、发酵过程中坛沿要注满水都有利于泡菜的无氧发酵 C．发酵坛内发酵液表面出现的白膜可能是由于乳酸菌大量繁殖而引起的 D．制备菹时，盐水煮沸后可以立即使用 2．醪糟是我国传统食品，制作的大致流程为：将泡好的糯米蒸20分钟，晾凉倒入开水烫过的容器中，加入酒曲搅匀后在中间掏个洞，用保鲜膜密封。在此环境下3天后就能闻到酒香。有关叙述正确的是（ ） A．制作过程中蒸米和烫容器均能达到灭菌的目的 B．发酵过程产生的水是酵母菌无氧呼吸的产物 C．晾凉后再加入酒曲，是为了防止高温影响酒曲中微生物的活性 D．上述流程中只需要提高温度条件继续发酵即可得到大量米醋 3．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列相关叙述错误的是（ ） A．耐高温的、需要保持干燥的物品可用干热灭菌法进行灭菌 B．酒精能使细胞中的蛋白质变性，95%的酒精较75%的酒精消毒效果好 C．为了避免周围环境中微生物的污染，微生物接种应在酒精灯火焰旁进行 D．巴氏消毒可杀死绝大多数微生物同时不破坏物质的营养成分，可用于果酒消毒 4．我国科学家通过基因工程改造产甲烷古菌，利用工业废气中的CO2和H2为原料合成生物可降解塑料PHA（PHA是微生物在体内合成的高分子物质，用作能量储备），其工艺流程如下图所示。相关叙述错误的是（ ） A．改造后的产甲烷古菌的代谢类型是自养厌氧型 B．改造后的产甲烷古菌在接种前需要利用液体培养基扩大培养 C．发酵工程的中心环节是灭菌，尤其是发酵罐必须进行严格灭菌 D．用稀释涂布平板法对产甲烷古菌进行计数，计数的结果往往比实际活菌数少 5．狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，且其细胞中的黄酮类化合物可入药。为满足狼爪瓦松市场化需求，某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程如图所示（其中数字序号代表相应的处理过程）。下列有关分析不正确的有（ ） A．过程③先在生长素/细胞分裂素的值低的培养基中培养，再转移至其值高的培养基中 B．制备培养基的正确顺序是：称量→溶解→定容→调pH值→分装→灭菌 C．过程④常用射线或化学物质处理，筛选可能获得少量所需的突变体植株丙 D．过程⑥利用愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点可大量获得黄酮类化合物 6．为了提高奶制品质量，衢州荷鹭牧场精选进口纯种荷斯坦奶牛。为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述正确的是（ ） A．试管奶牛的繁殖属于无性繁殖 B．对供体母牛注射促性腺激素可以使其超数排卵 C．从优良母牛中采集卵母细胞可直接与获能精子进行体外受精 D．进行过程②胚胎移植前，需取原肠胚的滋养层细胞进行性别鉴定 7．肺类器官是体外组装出的仿生类器官，拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似。通过肺上皮干细胞诱导生成的肺类器官，可自组装或与成熟肺细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A．培养时定期更换培养液以防代谢废物积累对肺上皮干细胞自身造成危害 B．肺类器官自组装成肺类装配体1，发生了动物细胞融合现象 C．肺上皮干细胞分化程度高于ES细胞且具有组织特异性 D．与体内器官相比，推测肺类装配体2较肺类装配体1的仿真度更高 8．下列有关哺乳动物精子、卵子的发生及受精作用的叙述，正确的是（ ） A．可将精子培养在人工配制的获能液中使其获能，获能液的有效成分有肝素、Ca2+等 B．胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精完成的标志 C．精子入卵后，卵细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子入卵 D．体型大的动物产生的精子也大，同种动物的雄原核比雌原核大 9．植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。如图表示植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是（ ） A．A途径中发生的可遗传变异主要有基因突变和基因重组，该方法属于无性生殖 B．B途径体现了生殖细胞的全能性，该育种方法可以明显缩短育种年限 C．经E途径得到的次生代谢物是生物生长和生存所必需的 D．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同 10．有研究者利用捐献的人类胚胎，在体外构建了人类胚胎甲状腺类器官（hFTO）培养系统，如图所示。在体外培养体系中通过激活cAMP信号可诱导hFTO成熟为具有甲状腺激素分泌能力的hMTO，从而模拟甲状腺的关键发育事件。下列叙述正确的是（ ） 人类胚胎甲状腺 A．可利用机械方法或胰蛋白酶将胚胎甲状腺组织分散成单个细胞进行培养 B．甲状腺细胞应置于95%O2和5%CO2的混合气体环境中培养 C．hMTO与hFTO相比，细胞中的DNA、RNA和蛋白质都发生了改变 D．甲状腺类器官的培养过程中体现了细胞的全能性 11．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A．DNA的粗提取与鉴定实验，利用了DNA不溶于酒精而某些蛋白质溶于酒精的化学性质 B．向电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 C．PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在复性过程中起作用 D．将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，需要进行沸水浴加热溶液才能变为蓝色 12．蛛丝有超强韧性，将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中可以生产蛛丝蛋白。图a是蛛丝蛋白基因的DNA片段；利用PCR技术对蛛丝蛋白基因进行检测，电泳结果如图b。其中1号来自普通羊，2号来自含蛛丝蛋白基因的质粒，其余来自转基因羊。下列叙述错误的是（ ） A．用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B．PCR过程在第3次循环结束后可以得到两端都含引物的目的基因 C．在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象等有关 D．使用抗原-抗体结合法可能在3、5、8号羊的乳汁中检测到蛛丝蛋白 13．细胞工程在农业、医药、生物技术等领域均有广泛应用。下列叙述正确的是（ ） A．外植体用化学试剂消毒后需经蒸馏水冲洗才可用于接种 B．植物体细胞杂交——用胰蛋白酶处理细胞以获得原生质体 C．单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理 D．核移植技术可用于转基因动物的克隆，以保持转基因动物的优良性状 14．病毒PEDV会使猪患流行性腹泻，在制备抗PEDV的单克隆抗体时加入不同浓度维生素C（VC），杂交瘤细胞增殖情况及抗体分泌情况如图和表格所示。叙述错误的是（ ） VC/（ng·mL-1） 抗体效价 0 1∶4000 5 1∶4000 10 1∶8000 20 1∶2000 注：抗体效价指经系列稀释后，能检测出抗原抗体反应的血清最高稀释度的倒数 A．单克隆抗体的制备过程用到了动物细胞融合技术、动物细胞培养技术等 B．克隆化培养得到的杂交瘤细胞产生的抗体不一定能抗PEDV C．10 ng·mL-1VC显著促进杂交瘤细胞增殖 D．20 ng·mL-1VC通过抑制细胞增殖降低抗体效价 15．比考扎霉素可用于治疗细菌性腹泻，该抗生素是由精氨酸合成缺陷型灰色浅灰链霉菌（属于细菌）产生。为筛选出能产比考扎霉素的菌种，科研工作者对采自土壤的灰色浅灰链霉菌进行诱变与选育，实验的部分流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A．含有琼脂的培养基为②③④，含有精氨酸的培养基为④ B．配制培养基①时应先将pH调至酸性再进行高压蒸汽灭菌 C．进行原位影印操作时必须先将无菌绒布转印至培养基③，再转印至培养基④ D．由培养结果推断，应挑取乙菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素 16．用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ） A．受体菌本身应不具有对这两种抗生素的抗性 B．若用Pvu Ⅰ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用Sph Ⅰ酶切，可通过琼脂糖凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用Sph Ⅰ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 二、非选择题：本大题共5小题，共60分。考生根据要求作答。 17．（12分）土壤中的磷大多数以难溶性磷酸盐如Ca3(PO4)2的形式存在，不利于植物吸收。科研人员尝试从土壤中筛选将难溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌（可形成溶磷圈），主要流程如图1所示。回答下列问题： （1）步骤②需充分振荡20 min，主要目的是___________________________________，步骤③中将土壤悬浮液稀释了__________倍。 （2）科研人员在过程④中挑选出了3株能降解难溶性磷酸盐的菌种，分别记为P1、P2和P3，并在难溶性磷酸盐Ca3(PO4)2的培养基上培养，三组溶磷透明圈直径（D）与菌落直径（d）如图所示。据图分析，应选用__________（填“P1”“P2”或“P3”）进行扩大培养，理由是______________________________。 （3）将得到的高效解磷菌接入已灭菌的含难溶磷的液体培养基中培养，每天取样测定溶磷量和pH变化情况，结果如图2所示。 ①结果表明，高效解磷菌分解难溶磷的能力呈现____________________的趋势。 ②根据培养液的pH变化情况，推测高效解磷菌的溶磷原理为__________________________________。 （4）请预期该高效解磷菌在农业生产方面可能的应用是________________________（答出1点即可）。 18．（12分）HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC的过程中，需要用__________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。 （2）过程①的原理是__________，跟植物体细胞杂交相比，动物细胞特有的融合方法是__________。 （3）过程②所用的HAT培养基从用途上看属于____________________培养基，能在其上生长的细胞特点为_________________________________________________________________。 （4）经过程②筛选的细胞还需进行过程③____________________和____________________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （5）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200 mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射______________________________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明_________________________________________________________________。 19．（12分）为了应对非洲猪瘟疫情突发对我国生猪产业产生的影响，2018年我国科学家采集、分离了涵盖各个地方猪种的体细胞，并冻存于-196℃的液氮中，实现了品种、家系全覆盖。2025年我国科学家首次利用冻存5年体细胞成功克隆，获得了纯种仙居花猪，这种将体细胞冷冻保存技术与克隆技术结合应用于地方猪资源保护的成功实践，对于保护地方猪品种的珍贵血统具有重要意义。如图表示克隆猪的培育过程，回答下列问题： （1）①过程中需要将猪的卵母细胞培育到__________再进行去核处理，从细胞结构角度分析，选择卵供体猪的去核卵母细胞作为受体细胞的原因之一是其细胞质中含有促进__________表达所需的物质。 （2）②过程需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，作用是__________。Kdm4d是一种染色体组蛋白去甲基化酶，研究人员将Kdm4d的mRNA注入重构胚，可使胚胎的发育率明显提高，推测可能的原因是__________________________________________________。胚胎移植前，要对代孕母猪进行__________处理，以使供、受体具有相同的生理状况，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。 （3）为了获得更多克隆猪，在得到的重构胚发育到__________或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意______________________________，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 （4）实验室常以体细胞克隆动物作为模型动物，体细胞克隆动物作为实验动物模型的显著优势是____________________________________________________________________________。 20．（12分）我国新疆是棉花种植的主要地区。棉花黄萎病是由大丽轮枝菌引起的。某研究小组从海岛棉中提取出抗黄萎病关键基因GbVel，通过农杆菌转化法将其导入易感病棉花品种“中棉所12号”。如图为GbVel基因转录非模板链部分序列及载体部分结构和酶切位点。已知GbVel基因区域无图示限制酶切割序列，回答下列问题： 限制酶 切割序列 EcoR I 5′-G↓AATTC-3′ Hind III 5′-A↓AGCTT-3′ Sac I 5′-GAGCT↓C-3′ Pst I 5′-CTGCA↓G-3′ 注：LB、RB为T-DNA的边界，HygR为潮霉素抗性基因。 （1）在利用PCR扩增GbVel基因时，反应体系中需加入Mg2+、引物等，其中Mg2+的作用是__________。 （2）载体中T-DNA的作用是___________________________________________。据图分析，为使GbVel基因准确插入载体中，应选择限制酶______________________________处理载体。 （3）将构建好的重组载体导入农杆菌前可先用__________处理农杆菌细胞。据图分析，可用含_________（填具体名称）的培养基筛选出成功转入重组载体的农杆菌，再将其导入棉花的愈伤组织中并最终获得转基因棉花植株。若要从个体水平上检测其是否抗黄萎病，应进行的操作是____________________。 21．（12分）细菌肿瘤治疗是利用细菌作为药物载体的免疫疗法。ClyA是一种细菌外膜蛋白，能促进细菌对肿瘤细胞的黏附与侵入，从而实现靶向递送。Noxa蛋白可诱导肿瘤细胞凋亡。研究人员在ClyA基因与Noxa基因的一端设计互补序列实现无缝连接，通过重叠延伸PCR技术将两者进行融合（如图10），并将其与温控元件相连构建热诱导表达载体（部分结构如图11），导入非致病性大肠杆菌中用于靶向治疗肿瘤。 注：pR-pL为启动子；Tel为温控调节元件，可抑制下游基因表达，热诱导可解除其抑制作用。 回答下列问题： （1）图10中PCR1与PCR2不能在同一个反应体系中进行，原因是引物2和引物3的碱基序列______________________________，上述4种引物中能作为PCR3过程的引物是____________________。 （2）研究人员将重组的ClyA-Noxa基因分别插入带有温控元件a和b的不同载体中，导入大肠杆菌中构建了工程菌a和b，分别在37℃和42℃条件下培养，检测Noxa蛋白的表达情况，结果如图12所示，其中WT表示未导入重组质粒的大肠杆菌。应选择工程菌__________进行后续的实验，理由是___________________________________________________________________________________________________________。 （3）研究人员将筛选的工程菌通过尾静脉注射到肿瘤小鼠体内，检测不同器官及肿瘤组织中工程菌的分布情况，下表的结果能否说明成功构建了工程菌，请作出判断并说明原因______________________________________________________________________________________________________________。 小鼠组织 注射后12小时 注射后72小时 心 肝 脾 肺 肿瘤 心 肝 脾 肺 肿瘤 工程菌数量 （“+”越多，数量越多） +++ +++++ ++++ +++ ++++ + ++ + ++ ++++++ （4）近红外光热疗法利用光敏感材料的光热转换能力高热杀伤肿瘤细胞，但多数材料肿瘤靶向性差、疗效不佳。结合上述实验结果提出一种新的肿瘤治疗思路：____________________________________________________________________________________________________。 学科网（北京）股份有限公司 $