精品解析：广东省阳江高级中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

阳江高级中学2025-2026学年第二学期期中测试 高二生物学科试卷 注意事项： 1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息。 2.请将答案正确填写在答题卡上。 一、单项选择题（本大题包括16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分） 1. 西瓜黄豆酱是民间的一种酱料，参与其发酵的微生物有霉菌、酵母菌等，家庭制作时先将大豆蒸煮熟透后裹上面粉，均匀铺摊在适当通风处，待表面长满霉菌后，再与西瓜瓤混合并加入食盐和香辛料，定期翻酱后制成成品。下列叙述错误的是（　　） A. 霉菌产生的蛋白酶可将蛋白质和脂肪分解成小分子物质 B. 蒸煮可以使大豆中的蛋白质发生变性而更容易被酶分解 C. 通风不畅导致发酵温度升高会影响霉菌和酵母菌的繁殖 D. 定期翻酱可以加快发酵速率并能抑制厌氧微生物的生长 【答案】A 【解析】 【详解】A、霉菌产生的蛋白酶只能分解蛋白质，而分解脂肪需要脂肪酶，A错误； B、高温蒸煮使蛋白质变性，空间结构破坏，更易被酶水解，B正确； C、通风不畅导致热量积累，温度升高可能超过霉菌和酵母菌的最适生长温度，影响繁殖，C正确； D、翻酱增加溶氧量，促进好氧菌（如霉菌）代谢，同时抑制厌氧菌生长，D正确； 故选A。 2. 高中生物学实验中，下列实验操作与目的不匹配的是（ ） 实验操作 目的 A DNA粗提取时需往研钵中加入研磨液，充分研磨实验材料 破碎细胞，使得DNA从细胞核中释放出来并溶解在研磨液中 B 设置PCR的循环程序时，需设置“预变性” 使DNA充分变性，双链打开，以利于引物之间更好地结合。 C 制作果酒时，每隔12h将瓶盖拧松一次 防止发酵瓶中的压力过大 D 纯化微生物需在超净工作台酒精灯火焰旁操作 防止杂菌污染 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【详解】A、DNA粗提取实验中，加入研磨液充分研磨可以破碎细胞，使细胞核中的DNA释放出来并溶解在研磨液中，操作与目的匹配，A不符合题意； B、PCR设置预变性的目的是让模板DNA充分变性、双链完全打开，便于后续引物与模板链互补结合，引物之间结合会形成引物二聚体，会干扰PCR反应，是实验需要避免的情况，该操作与目的不匹配，B符合题意； C、制作果酒时酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的同时会释放大量CO₂，每隔12h拧松瓶盖可以排出多余CO₂，避免发酵瓶内压力过大，操作与目的匹配，C不符合题意； D、酒精灯火焰旁存在无菌区域，在该区域进行微生物纯化操作可以防止环境中的杂菌污染培养物，操作与目的匹配，D不符合题意。 3. 现生产啤酒主要有利用传统方法生产啤酒(记为方法一)，和借助外源赤霉素处理大麦种子后再生产啤酒(记为方法二)，现某厂家有等量的大麦种子可以选择如图所示方法一或方法二进行啤酒生产。下列说法错误的是（ ） A. 利用赤霉素处理大麦种子，可以使大麦种子无需发芽就能产生淀粉酶 B. 主发酵结束后，还要在低温、通风的环境下储存一段时间进行后发酵 C. 与方法一相比，通过方法二理论上可以产生更多的啤酒 D. 啤酒花的添加让啤酒产生特殊的风味组分，蒸煮终止了酶进一步作用，并对糖浆灭菌 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。 【详解】A、赤霉素能促进种子萌发，用适宜浓度的赤霉素处理大麦，可以使大麦种子无需发芽就能产生淀粉酶，A正确； B、后发酵应在低温、密闭环境下储存，若通风啤酒会变质，B错误； C、发芽会消耗部分糖类，导致酒精发酵底物减少，方法二无需发芽，发酵底物更多，能制更多啤酒，C正确； D、啤酒特殊的风味组分来自于啤酒花，蒸煮对糖浆进行灭菌的同事，高温会破坏酶的空间结构，因此煮沸还可以终止酶进一步作用，D正确。 故选B。 4. 基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生领域和食品工业等方面展示出广阔的前景。下列有关基因工程的叙述，正确的是（　　） A. 基因工程操作程序的核心步骤是目的基因的获取 B. 限制酶可以切割磷酸二酯键形成平末端，也能切割氢键形成黏性末端 C. 检测出受体细胞含有目的基因，则表明产生了目的产物 D. 基因工程可以按照人们的意愿创造符合需要的生物类型和产品 【答案】D 【解析】 【详解】A、基因工程操作程序的核心步骤是基因表达载体的构建，而非目的基因的获取，A错误； B、限制酶仅切割DNA链中的磷酸二酯键，形成黏性末端或平末端，而氢键的断裂由解旋酶或高温处理完成，B错误； C、检测到受体细胞含有目的基因仅说明导入成功，但目的基因是否转录或翻译需通过分子杂交或抗原-抗体检测进一步验证，C错误； D、基因工程通过定向改造生物遗传物质，实现生物类型或产品的定向设计，D正确。 故选D。 5. 从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A. 将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 B. 连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 C. 接种后的平板，将皿盖朝上放入恒温培养箱中培养 D. 微生物只能在琼脂固体培养基表面生长 【答案】A 【解析】 【详解】A、分离土壤微生物时，需先将土样和无菌水混匀制得土壤悬液，经梯度稀释后取悬液涂布平板，可将聚集的微生物分散为单个细胞，最终获得单菌落，A正确； B、平板划线法连续划线时，应从上一次划线的末端开始划线，以此实现逐步稀释微生物、获得单菌落的目的，B错误； C、接种后的平板需倒置（皿盖朝下、皿底朝上）放入培养箱培养，可避免皿盖冷凝水滴落污染培养基，C错误； D、微生物的培养可使用固体培养基、液体培养基等多种类型，液体培养基常用于微生物的扩大培养，并非只能在琼脂固体培养基表面生长，D错误。 6. 厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列有关叙述错误的是（ ） A. 配制培养基后需进行灭菌处理 B. 应从富含淀粉的环境如厨房垃圾堆积处采集菌种进行培养 C. 培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个甚至几个活菌 D. 透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该菌降解淀粉的能力越弱 【答案】D 【解析】 【详解】A、配制微生物培养基后需进行灭菌处理，避免杂菌污染，干扰目标菌种的筛选培养，A正确； B、筛选高效降解淀粉的菌种时，富含淀粉的环境（如厨房垃圾堆积处）中能降解淀粉的菌种占比更高，更易获得目标菌种，B正确； C、当样品稀释度足够高时，一个菌落来源于样品稀释液中的1个活菌；若稀释度不足，多个相邻的活菌也可共同形成一个菌落，因此一个菌落可能来源于1个甚至几个活菌，C正确； D、淀粉遇碘液显蓝色，菌种降解淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明同等菌落规模下该菌降解淀粉的能力越强，D错误。 7. 下图为蓝莓组织培养过程的流程图，相关叙述错误的是（　　） A. 蓝莓幼茎用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒处理 B. 过程①、过程②分别称为脱分化、再分化 C. 过程①、过程②所用培养基中含有的植物激素比例不同 D. 过程①、过程②用封口膜封盖培养瓶的瓶口以隔绝空气 【答案】D 【解析】 【详解】A、蓝莓幼茎作为外植体需消毒处理，常用酒精和次氯酸钠溶液消毒表面，再用无菌水冲洗，A正确； B、过程①使外植体形成愈伤组织，为脱分化；过程②诱导愈伤组织形成芽和根，为再分化，B正确； C、脱分化（①）和再分化（②）阶段需调整生长素与细胞分裂素的比例以调控细胞分化方向，C正确； D、封口膜的作用是防止微生物污染，但需允许气体交换（如氧气进入、二氧化碳排出），而非隔绝空气，D错误。 8. 动物细胞工程技术在动物育种中有着广泛的应用，下列叙述错误的是（ ） A. 2过程可用于濒危动物的繁育，核心技术是动物细胞核移植 B. 早期胚胎发育经过桑葚胚、囊胚等阶段 C. 3过程中通常将目的基因通过显微注射法导入到受精卵中以定向改变生物性状 D. 试管动物和克隆动物都是通过无性生殖方式产生 【答案】D 【解析】 【分析】克隆动物的培育一般采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，因此属于无性生殖。试管动物的培育一般采用了体外受精技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，因此属于有性生殖。 【详解】A、2过程克隆可用于濒危动物的繁育，核心技术是动物细胞核移植，A正确； B、早期胚胎发育一般经过桑葚胚、囊胚等阶段，B正确； C、转基因动物培育过程中，如果受体细胞是受精卵，通过显微注射法将目的基因导入到受精卵中，基因工程的优点是可以定向改变生物性状，C正确； D、试管动物一般采用了体外受精技术，属于有性生殖，克隆动物一般采用了核移植技术，属于无性生殖方式产生的，D错误。 故选D。 9. 现有研究表明，向分化的体细胞中导入4个特定转录因子（OCT4、SOX2、c-MYC、KLF4）进行重编程可获得多能干细胞（iPS细胞），这些iPS细胞可被诱导分化为能够分泌胰岛素的胰岛B细胞，用于糖尿病治疗。下列相关叙述错误的是（ ） A. 在体外培养iPS细胞时，需定期更换培养液 B. 胰岛B细胞与iPS细胞相比，基因组成与基因表达产物均不相同 C. iPS细胞用病人自身体细胞制备，规避了伦理问题和免疫排斥反应 D. 重编程过程中导入外源转录因子可能会引起突变，存在导致肿瘤发生的风险 【答案】B 【解析】 【详解】A、体外培养动物细胞时，细胞代谢产生的废物会在培养液中积累，定期更换培养液可清除代谢废物，为细胞提供适宜的生存环境，A正确； B、胰岛B细胞由iPS细胞分化形成，细胞分化的实质是基因的选择性表达，二者的基因组成完全相同，仅基因表达产物存在部分差异，并非基因组成与表达产物均不相同，B错误； C、用病人自身体细胞制备iPS细胞，无需使用胚胎，规避了胚胎干细胞相关的伦理问题，且细胞来源于患者自身，不会发生免疫排斥反应，C正确； D、重编程过程中导入的外源转录因子可能随机整合到宿主细胞的基因组中，引发基因突变，其中c-MYC属于原癌基因，异常表达存在诱导细胞癌变、导致肿瘤发生的风险，D正确。 10. 某生物兴趣小组在实验室进行DNA的粗提取与鉴定实验，他们从香蕉中提取DNA，并进行了如下操作：将香蕉切碎后放入研钵中，加入适量的洗涤剂和食盐，充分研磨。将研磨后的混合物过滤，得到滤液。向滤液中加入冰冷的酒精，静置一段时间后，观察到有白色絮状物析出。取少量白色絮状物放入试管中，加入二苯胺试剂，水浴加热后观察颜色变化。在上述实验中，以下说法正确的是（　　） A. 加入洗涤剂的目的是为了溶解细胞壁，释放DNA B. 加入食盐的目的是为了破坏细胞膜，使DNA更容易释放 C. 加入酒精的目的是为了使DNA从溶液中沉淀出来 D. 加入二苯胺试剂后，溶液呈现红色说明DNA含量较高 【答案】C 【解析】 【详解】A、洗涤剂的主要成分是表面活性剂，能破坏细胞膜和核膜的磷脂双分子层，使DNA释放，但无法溶解主要由纤维素和果胶组成的细胞壁（细胞壁需通过研磨破坏），A错误； B、食盐（NaCl）的作用是提供Na⁺离子，增加溶液的离子强度，促进DNA溶解或稳定DNA结构，并非破坏细胞膜（破坏细胞膜由洗涤剂完成），B错误； C、酒精（通常为95%冷乙醇）能降低DNA的溶解度，使DNA以白色絮状物沉淀析出，这是DNA粗提取的关键步骤，C正确； D、二苯胺试剂在酸性条件下与DNA发生反应，生成蓝色化合物，并非红色；溶液呈蓝色说明DNA存在，红色可能是其他物质干扰或操作错误，D错误。 故选C。 11. 科学家利用重组DNA技术将人工改造后的某植物的抗虫基因导入大肠杆菌，通过发酵工程大规模生产抗虫蛋白，用于制备生物杀虫剂。下列关于重组DNA技术操作过程中所用工具的叙述，正确的是（ ） A. 可选用DNA聚合酶将抗虫基因与质粒进行连接 B. 限制酶能特异性识别抗虫基因和质粒的特定脱氧核苷酸序列 C. 质粒可作为载体，其本质是大肠杆菌的拟核DNA D. 该过程还须用到解旋酶来断开氢键 【答案】B 【解析】 【详解】A、将抗虫基因与质粒进行连接的工具是DNA连接酶，DNA聚合酶的功能是将单个脱氧核苷酸连接到已有的核苷酸链上，无法连接两个独立的DNA片段，A错误； B、限制酶具有特异性，能够特异性识别特定的脱氧核苷酸序列并在特定位点切割磷酸二酯键，切割抗虫基因和质粒时，需要限制酶识别二者的特定序列完成切割，B正确； C、质粒是独立于大肠杆菌拟核DNA之外的小型环状双链DNA分子，本质不是拟核DNA，C错误； D、重组DNA技术操作过程中不需要解旋酶，解旋酶的作用是断开氢键，用于DNA复制、转录等过程，该过程仅需要限制酶、DNA连接酶和载体等工具，D错误。 12. 为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转入大豆植株中，获得转基因大豆。下列叙述错误的是（ ） A. 可将耐低磷基因OsPTF插入Ti质粒的任意位置 B. 以水稻RNA为模板经逆转录可获得OsPTF基因 C. 该操作可打破物种界限，实现遗传物质跨物种转移 D. 该转基因大豆的种植可能有助于减少化肥的使用 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序：1、目的基因的获取：①从基因文库中获取，②人工合成（反转录法和化学合成法），③PCR技术扩增目的基因；2、基因表达载体的构建①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质；②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端；③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因；（3）基因表达载体的构建；3、将目的基因导入受体细胞；4、目的基因的检测和表达（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术；（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交；（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交；（4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 【详解】A、耐低磷基因OsPTF要插在质粒启动子和终止子之间，A错误； B、以水稻RNA为模板通过逆转录可以合成cDNA，然后再以cDNA为模板利用PCR扩增可获得大量OsPTF基因，B正确； C、转基因技术可以打破物种界限，实现遗传物质跨物种转移，C正确； D、该转基因技术提高了大豆对磷元素的吸收能力，该转基因大豆的种植可能有助于减少化肥的使用，D正确。 故选A。 13. 利用山金柑愈伤组织细胞（2N）和早花柠檬叶肉细胞（2N）进行体细胞杂交可以得到高品质的杂种植株。下图是对某杂种植株核DNA和线粒体DNA的来源进行鉴定的结果。下列分析正确的是（　　） A. 该实验中，诱导原生质体融合有多种手段，包括物理法、化学法和灭活病毒诱导法 B. 细胞融合后获得的融合原生质体需放在无菌蒸馏水中以防杂菌污染 C. 可通过比较融合后细胞的颜色进行初步筛选 D. 杂种细胞经过组织培养得到的杂种植株是四倍体 【答案】C 【解析】 【分析】由图可知，杂种植株核DNA与早花柠檬7组重合，线粒体DNA与山金柑7组重合，说明杂种植株的核基因来自早花柠檬，质基因来自山金柑。 【详解】A、该实验中，诱导原生质体融合有多种手段，包括物理法、化学法，A错误； B、细胞融合后获得的融合原生质体需放在无菌的等渗的甘露醇溶液中以防杂菌污染，同时防止原生质体吸水涨破，B错误； C、愈伤组织细胞无色，叶肉细胞因为含有叶绿体为绿色，所以可通过观察叶绿体的有无，即有无绿色作为初步筛选杂种细胞的标志，C正确； D、杂种植株的核基因来自早花柠檬，经过组织培养得到的杂种植株是二倍体，D错误。 故选C。 14. 下图为某生物工程操作流程模式图，①、②为具体制备方法。下列叙述正确的是（ ） A. 若此图表示植物体细胞杂交，则①表示脱分化，②表示再分化 B. 若此图表示克隆羊的培育，则①需要体外受精技术 C. 若此图表示单克隆抗体的制备，则①可用PEG融合法 D. 若此图表示胚胎分割移植，则②对囊胚期的胚胎分割后，不可以直接移植给受体母牛 【答案】C 【解析】 【详解】A、若该图表示植物体细胞杂交，①表示原生质体制备及诱导融合的过程，脱分化、再分化是获得杂种细胞后进行植物组织培养的步骤，A错误； B、克隆羊的培育属于无性繁殖，利用的是动物体细胞核移植技术，不需要体外受精技术，B错误； C、若该图表示单克隆抗体的制备，①是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合过程，PEG（聚乙二醇）是常用的细胞融合诱导试剂，因此可用PEG融合法，C正确； D、胚胎分割移植时，将囊胚期的胚胎对内细胞团均等分割后，可以直接移植给受体母牛，D错误。 15. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（ ） A. ②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D. ④→⑤利用了植物组织培养技术 【答案】D 【解析】 【详解】A、构建②重组Ti质粒（基因表达载体）时，需要限制酶切割目的基因和Ti质粒、DNA连接酶连接二者的黏性末端/平末端，不需要DNA聚合酶，A错误； B、③农杆菌侵染植物细胞后，仅重组Ti质粒上的T-DNA片段会整合到④植物细胞的染色体上，并非整个重组Ti质粒整合，B错误； C、④的染色体上含抗虫基因，不代表抗虫基因能成功表达出抗虫蛋白，还需检测基因是否转录、翻译，以及进行个体水平的抗虫接种实验，才能确认抗虫植株培育成功，C错误； D、将离体的植物细胞④培养为完整植株⑤，利用了植物组织培养技术，原理是植物细胞的全能性，D正确。 16. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B. c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C. 高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D. 若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 【答案】D 【解析】 【详解】A、PCR的3个步骤依次是a变性（高温，95℃左右，双链解旋）、b复性（退火，55℃左右，引物结合模板）、c延伸（72℃左右，Taq酶合成DNA），对应温度是先升高、再降低、再升高，不是依次降低，A错误； B、c是延伸过程，DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸DNA链，B错误； C、TaqDNA聚合酶是耐热的DNA聚合酶，在PCR反应体系中需要加入Mg2+来激活该酶的活性，C错误； D、1个DNA进行n轮循环，最终得到2ⁿ个DNA分子，每个DNA复制时都需要2个引物（引物Ⅰ和引物Ⅱ），若1个DNA进行6轮循环，共合成26=64个DNA分子，其中只有最初的模板DNA分子不需要引物Ⅰ和引物Ⅱ，所以需要消耗引物Ⅰ和引物Ⅱ的数量都是64-1=63，D正确。 二、解答题（本大题包括5小题，共60分。除特殊标明外，每空1分） 17. 某化工厂的生产废水中含有一种含氮有机物Y，直接排放会污染土壤，现需将废水中物质Y降解处理后方可排放。某研究小组欲从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。根据所学知识回答下列问题： （1）培养基的配方一般都含有______（至少写出3个）等营养物质。若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y作为______。 （2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙、丙3种细菌都能生长并形成菌落（如图一所示）。如果要得到目标菌，应该选择______菌落进一步纯化，选择的依据是______。 （3）分离纯化上述菌种的方法有______、______。某生物兴趣小组进行了如图二所示的操作：其中最明显的一处错误是______，整个操作过程中要灼烧接种环______次。 （4）接种前需要对培养基进行灭菌，常用的灭菌方法是______。 【答案】（1） ①. 水、碳源、氮源和无机盐 ②. 唯一氮源 （2） ①. 甲 ②. 甲菌落透明圈直径与菌落直径的差值（或比值）最大，说明其分解Y的效率最高 （3） ①. 稀释涂布平板法 ②. 平板划线法 ③. 最后一次（第四次）划线与第一次划线区域重叠 ④. 五##5 （4）湿热灭菌法（或高压蒸汽灭菌法） 【解析】 【小问1详解】 培养基的配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。该实验目的是从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），因此若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y（一种含氮有机物）作为唯一氮源，在此培养基上不能分解Y的微生物会因为缺乏氮源而不能生长，因此可筛选出降解Y的目标菌。 【小问2详解】 已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。若Y被分解，则会在菌落周围出现透明圈，根据图示可知，甲菌落透明圈直径与菌落直径差值（或比值）最大，说明其分解Y的效率最高，因此应该选择甲菌落进一步纯化。 【小问3详解】 分离纯化上述菌种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，前者还可用于计数。某生物兴趣小组进行了如图二所示的操作：其中较明显的一处错误是最后一次（第四次）划线与第一次划线区域重叠，因而可能导致不能获得单菌落，整个操作过程中要灼烧接种环5次，因为图示平板接种了4个区域。 【小问4详解】 接种前需要对培养基进行灭菌，常用的灭菌方法是湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌法）。 18. 某研究小组利用品种1（2N=28）和品种2（2N=40）两个鸢尾属远缘种作为亲本，通过植物体细胞杂交技术，培育出了结实率高、观赏性更好和适应性更强的品种3（含62条染色体）。回答下列问题： （1）实验过程中可用_______________酶处理获得原生质体，诱导植物原生质体融合时常用到的化学方法有（答出1种）。科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记品种1和品种2的原生质体膜上的蛋白质，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到___________种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到融合细胞的表面既有红色荧光又有绿色荧光时可判断该原生质体是由品种1和品种2融合而成的。 （2）植物体细胞杂交技术的关键环节是过程_______________（填序号）。从过程④到过程⑤需要更换新的培养基，原因是_______________（答出1点）。 （3）研究人员利用离体培养的品种1细胞生产细胞产物。为了筛选出高产细胞，研究者常用诱变的方法处理_______________细胞，该细胞团一直处于不断增殖状态，在诱变因素下容易产生突变。 （4）据图分析，品种1和品种2通过体细胞杂交技术培养出的品种3的染色体只有62条的原因是___________。 【答案】（1） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 3##三 （2） ①. ② ②. 诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同 （3）愈伤组织 （4）γ射线对品种1的原生质体进行处理，引起其部分染色体丢失，导致融合的原生质体中只有62条染色体 【解析】 【分析】图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中①表示去壁获取原生质体的过程，该过需要通过酶解法进行，因为植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此需要用到纤维素酶和果胶酶；②表示人工诱导原生质体融合；③表示再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。 【小问1详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，实验过程中可用纤维素酶和果胶酶处理得到原生质体。若只考虑细胞两两融合的情况，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到3种不同的原生质体，即只有红色荧光（品种1融合而成)，只有绿色荧光（品种2融合而成），或既有红色荧光又有绿色荧光（品种1和品种2融合而成）。 【小问2详解】 植物体细胞杂交技术的关键环节是过程②：人工诱导原生质体融合。④表示脱分化、⑤表示再分化，脱分化诱导生成愈伤组织，培养基中生长素含量和细胞分裂素比例适中，再分化诱导生芽培养基中生长素含量小于细胞分裂素，诱导生根培养基中生长素含量大于细胞分裂素，即脱分化形成愈伤组织、愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同，所以从过程④脱分化到过程⑤再分化需要更换新的培养基。 【小问3详解】 愈伤组织细胞团一直处于不断增殖状态，在诱变因素下容易产生突变，因此研究者常用诱变的方法处理愈伤组织。 【小问4详解】 品种1是28条染色体，品种2是40条染色体，γ射线对品种1的原生质体进行处理，有可能会引起其部分染色体丢失，从而融合的原生质体中只有62条染色体。 19. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤的单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。 （2）过程①的原理是___________。 （3）过程②所用的HAT培养基从用途上看属于_____培养基，能在其上生长的细胞特点为_____________。 （4）经过程②筛选的细胞还需进行过程③_______和________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （5）过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，这依赖于________原理。 （6）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的乳腺癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②从坐标轴可知实验结果：___________，且比初始肿瘤体积小；表明___________。 【答案】（1）HER2 （2）细胞膜具有一定的流动性 （3） ①. 选择 ②. 既能产生抗体，又能大量增殖 （4） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 （5）抗原-抗体特异性结合 （6） ①. 等剂量（或等量）的磷酸缓冲液 ②. 抗HER2-ADC组裸鼠的肿瘤体积最小（类似表述即可，要答到“最小”） ③. 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好 【解析】 【小问1详解】 制备单克隆抗体时，需要用对应的抗原（即HER2）免疫小鼠，才能获得能产生相应抗体的B淋巴细胞。 【小问2详解】 细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。 【小问3详解】 HAT培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞，从用途上划分属于选择培养基；未融合的亲本细胞、同种融合细胞都不能存活，只有B细胞和骨髓瘤融合的杂交瘤细胞，既能产生抗体，又能大量增殖，还能在该培养基中存活。 【小问4详解】 第一次筛选得到杂交瘤细胞后，还需要经过克隆化培养和抗体检测，才能得到能稳定分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 【小问5详解】 抗HER2-ADC可依靠抗原-抗体特异性结合，将药物定向递送到HER2过度表达的癌细胞处，减少对正常细胞的杀伤，从而降低药物副作用。 【小问6详解】 ①实验的空白对照组遵循单一变量原则，需要注射等量的溶剂，即等剂量磷酸缓冲液。②根据实验结果可知，抗HER2-ADC组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。 20. 异种器官移植是解决人类供体器官短缺的核心途径。我国科学家于2025年成功培育出无特定病原体的10只基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10只基因编辑猪，为异种器官移植提供安全供体，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题： （1）图中过程①培养时，应使用_____培养基（按物理性质划分）；贴壁细胞培养一段时间后，会因_____（写两点）等因素停止增殖，因此需使用_____处理贴壁细胞，再使用离心法得到单个细胞后进行传代培养。 （2）过程②常用_____方法对卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是_____，“去核”前卵母细胞要培养至_____期。 （3）过程③形成的重构胚还需用物理或化学方法激活，其目的是_____。 （4）重构胚成活率低是限制核移植成功的主要因素之一、研究人员探究了不同浓度的TSA（组蛋白去乙酰化酶抑制剂）对猪重构胚发育成囊胚的影响，结果如下表所示： TSA浓度（nM） 0 20 40 60 囊胚的形成率（%） 13% 22.8% 35.7% 21% 由上表可知，选用浓度为_____nM的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率，由此推测组蛋白乙酰化程度的升高会_____（填“促进”或“抑制”）重构胚的发育。 （5）为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是_____。 【答案】（1） ①. 液体 ②. 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏、接触抑制 ③. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （2） ①. 显微操作 ②. 纺锤体—染色体复合物 ③. MⅡ 中 （3）使其完成细胞分裂和发育进程 （4） ①. 40 ②. 促进 （5）胚胎细胞分化程度低，全能性更容易恢复 【解析】 【小问1详解】 图中过程①为动物细胞培养，培养时应使用液体培养基，以便于细胞充分接触营养物质和氧气；贴壁细胞培养一段时间后，会因细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏、接触抑制等因素停止增殖。需使用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理贴壁细胞，使细胞分散，再使用离心法得到单个细胞后进行传代培养。 【小问2详解】 过程②常用显微操作方法对卵母细胞进行“去核”，实际上去除的是纺锤体—染色体复合物，这是由于在减数分裂过程中，遗传物质主要集中在纺锤体牵引的染色体上，去除这一复合物可以确保后续植入的体细胞核能够成为新细胞的遗传控制中心。而“去核”前卵母细胞要培养至MⅡ 中期，处于这一时期的卵母细胞细胞质环境最有利于体细胞核的全能性表达。 【小问3详解】 重构胚在形成后，其细胞周期可能处于停滞状态，通过物理或化学方法对重构胚进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程。 【小问4详解】 由表中数据可知，当为40 nM时，囊胚形成率达到最高的35.7%，因此选用40 nM的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率。TSA作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂，其作用是抑制组蛋白去乙酰化酶的活性，从而使组蛋白乙酰化程度升高，由此可推测组蛋白乙酰化程度的升高会促进重构胚的发育。 【小问5详解】 胚胎细胞分化程度低，全能性更容易恢复，因此，为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植。 21. 注射胰岛素是目前治疗Ⅰ型糖尿病（胰岛素依赖型糖尿病）最有效的手段，而利用基因工程技术获得人胰岛素是常用胰岛素最主要的来源。科研人员利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构如下图所示。已知β-半乳糖苷酶能分解β-半乳糖苷（无色）产生蓝色物质。 回答下列问题： （1）基因工程技术的基本步骤包括：目的基因的筛选与获取、___________、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 （2）研究人员提取人________细胞中的总RNA，________形成cDNA，再设计引物PCR扩增人胰岛素基因。在设计引物时，引物1需能与胰岛素基因________（填“A”或“B”）链的左侧序列互补配对，且需在引物1的端________（填“5'”或“3'”）添加脱氧核苷酸序列5'-________-3'，使PCR扩增的人胰岛素基因能与上图中质粒正确连接。 （3）启动子包括组成型启动子（不需要诱导物，目的基因即可持续表达）、组织特异性启动子（使目的基因只在特定的器官或组织中表达）、诱导型启动子（当诱导物存在时，目的基因才能表达）等，为优化人胰岛素基因在大肠杆菌中的表达效果，持续高效生产人胰岛素，研究人员应选择________型启动子。 （4）研究人员将基因表达载体导入用________处理大肠杆菌细胞，并将上述大肠杆菌转入含有________的培养基中，从培养基上挑选呈________（填“无色'”或“蓝色”）的菌落，进行工业发酵培养，从而生产人胰岛素。 【答案】（1）基因表达载体的构建（或构建基因表达载体） （2） ①. 胰岛B ②. 逆转录##反转录 ③. B ④. 5' ⑤. GAATTC （3）组成 （4） ①. Ca2+（或CaCl2或Ca2+处理法或感受态细胞法） ②. β-半乳糖苷和氨苄青霉素 ③. 无色 【解析】 【小问1详解】 基因工程技术的基本步骤包括：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【小问2详解】 胰岛素由胰岛B细胞合成、分泌，所以提取人胰岛B细胞的总RNA ，经逆转录得到cDNA。引物需要与模板链的3端结合，DNA分子中磷酸端为5'端，羟基(-OH)端为3'端，因此引物1与B链左侧序列互补配对。要使扩增的胰岛素基因与质粒正确连接需在引物1的5'端添加限制酶识别序列。在构建基因表达载体时，不能选择Mun Ⅰ，会破坏质粒的标记基因，由于Sal I和Nhe I会破坏目的基因(胰岛素基因)，因此不能选择Sal Ⅰ和Nhe Ⅰ。综上所述，需选择EcoR I和Xho I限制酶切割质粒，且根据启动子的位置和转录方向，需在引物1添加限制酶EcoR Ⅰ识别序列，引物2添加xho Ⅰ限制酶识别序列，即引物1的5“端添加核苷序列为5'-GAATTC-3'。 【小问3详解】 为持续高效生产人胰岛素，需要目的基因在大肠杆菌中持续表达，组成型启动子（不需要诱导物，目的基因可持续表达）符合需求，所以选组成型启动子。 【小问4详解】 将基因表达载体导入大肠杆菌，常用Ca2+（或CaCl2）处理细胞，使其处于感受态，便于吸收外源 DNA 。质粒上有lacZ基因（β-半乳糖苷酶基因），用限制酶切割质粒和目的基因构建载体时，若目的基因插入会破坏lacZ基因。培养基中加入β - 半乳糖苷 ，含重组质粒的大肠杆菌因lacZ基因被破坏，不能分解β-半乳糖苷产生蓝色物质，而含空质粒的会产生蓝色。但还需考虑质粒上的Ampr（氨苄青霉素抗性基因），实际应是含氨苄青霉素和β-半乳糖苷 （同时筛选抗性和利用lacZ基因筛选 ），不过根据题意及常见筛选，这里从lacZ基因功能看，培养基含β-半乳糖苷，成功导入重组质粒（含目的基因）的菌落，因lacZ被破坏，呈无色（未被破坏的分解底物显蓝色，被破坏的不能分解显无色）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 阳江高级中学2025-2026学年第二学期期中测试 高二生物学科试卷 注意事项： 1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息。 2.请将答案正确填写在答题卡上。 一、单项选择题（本大题包括16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分） 1. 西瓜黄豆酱是民间的一种酱料，参与其发酵的微生物有霉菌、酵母菌等，家庭制作时先将大豆蒸煮熟透后裹上面粉，均匀铺摊在适当通风处，待表面长满霉菌后，再与西瓜瓤混合并加入食盐和香辛料，定期翻酱后制成成品。下列叙述错误的是（　　） A. 霉菌产生的蛋白酶可将蛋白质和脂肪分解成小分子物质 B. 蒸煮可以使大豆中的蛋白质发生变性而更容易被酶分解 C. 通风不畅导致发酵温度升高会影响霉菌和酵母菌的繁殖 D. 定期翻酱可以加快发酵速率并能抑制厌氧微生物的生长 2. 高中生物学实验中，下列实验操作与目的不匹配的是（ ） 实验操作 目的 A DNA粗提取时需往研钵中加入研磨液，充分研磨实验材料 破碎细胞，使得DNA从细胞核中释放出来并溶解在研磨液中 B 设置PCR的循环程序时，需设置“预变性” 使DNA充分变性，双链打开，以利于引物之间更好地结合。 C 制作果酒时，每隔12h将瓶盖拧松一次 防止发酵瓶中的压力过大 D 纯化微生物需在超净工作台酒精灯火焰旁操作 防止杂菌污染 A. A B. B C. C D. D 3. 现生产啤酒主要有利用传统方法生产啤酒(记为方法一)，和借助外源赤霉素处理大麦种子后再生产啤酒(记为方法二)，现某厂家有等量的大麦种子可以选择如图所示方法一或方法二进行啤酒生产。下列说法错误的是（ ） A. 利用赤霉素处理大麦种子，可以使大麦种子无需发芽就能产生淀粉酶 B. 主发酵结束后，还要在低温、通风的环境下储存一段时间进行后发酵 C. 与方法一相比，通过方法二理论上可以产生更多的啤酒 D. 啤酒花的添加让啤酒产生特殊的风味组分，蒸煮终止了酶进一步作用，并对糖浆灭菌 4. 基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生领域和食品工业等方面展示出广阔的前景。下列有关基因工程的叙述，正确的是（　　） A. 基因工程操作程序的核心步骤是目的基因的获取 B. 限制酶可以切割磷酸二酯键形成平末端，也能切割氢键形成黏性末端 C. 检测出受体细胞含有目的基因，则表明产生了目的产物 D. 基因工程可以按照人们的意愿创造符合需要的生物类型和产品 5. 从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A. 将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 B. 连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 C. 接种后的平板，将皿盖朝上放入恒温培养箱中培养 D. 微生物只能在琼脂固体培养基表面生长 6. 厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列有关叙述错误的是（ ） A. 配制培养基后需进行灭菌处理 B. 应从富含淀粉的环境如厨房垃圾堆积处采集菌种进行培养 C. 培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个甚至几个活菌 D. 透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该菌降解淀粉的能力越弱 7. 下图为蓝莓组织培养过程的流程图，相关叙述错误的是（　　） A. 蓝莓幼茎用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒处理 B. 过程①、过程②分别称为脱分化、再分化 C. 过程①、过程②所用培养基中含有的植物激素比例不同 D. 过程①、过程②用封口膜封盖培养瓶的瓶口以隔绝空气 8. 动物细胞工程技术在动物育种中有着广泛的应用，下列叙述错误的是（ ） A. 2过程可用于濒危动物的繁育，核心技术是动物细胞核移植 B. 早期胚胎发育经过桑葚胚、囊胚等阶段 C. 3过程中通常将目的基因通过显微注射法导入到受精卵中以定向改变生物性状 D. 试管动物和克隆动物都是通过无性生殖方式产生 9. 现有研究表明，向分化的体细胞中导入4个特定转录因子（OCT4、SOX2、c-MYC、KLF4）进行重编程可获得多能干细胞（iPS细胞），这些iPS细胞可被诱导分化为能够分泌胰岛素的胰岛B细胞，用于糖尿病治疗。下列相关叙述错误的是（ ） A. 在体外培养iPS细胞时，需定期更换培养液 B. 胰岛B细胞与iPS细胞相比，基因组成与基因表达产物均不相同 C. iPS细胞用病人自身体细胞制备，规避了伦理问题和免疫排斥反应 D. 重编程过程中导入外源转录因子可能会引起突变，存在导致肿瘤发生的风险 10. 某生物兴趣小组在实验室进行DNA的粗提取与鉴定实验，他们从香蕉中提取DNA，并进行了如下操作：将香蕉切碎后放入研钵中，加入适量的洗涤剂和食盐，充分研磨。将研磨后的混合物过滤，得到滤液。向滤液中加入冰冷的酒精，静置一段时间后，观察到有白色絮状物析出。取少量白色絮状物放入试管中，加入二苯胺试剂，水浴加热后观察颜色变化。在上述实验中，以下说法正确的是（　　） A. 加入洗涤剂的目的是为了溶解细胞壁，释放DNA B. 加入食盐的目的是为了破坏细胞膜，使DNA更容易释放 C. 加入酒精的目的是为了使DNA从溶液中沉淀出来 D. 加入二苯胺试剂后，溶液呈现红色说明DNA含量较高 11. 科学家利用重组DNA技术将人工改造后的某植物的抗虫基因导入大肠杆菌，通过发酵工程大规模生产抗虫蛋白，用于制备生物杀虫剂。下列关于重组DNA技术操作过程中所用工具的叙述，正确的是（ ） A. 可选用DNA聚合酶将抗虫基因与质粒进行连接 B. 限制酶能特异性识别抗虫基因和质粒的特定脱氧核苷酸序列 C. 质粒可作为载体，其本质是大肠杆菌的拟核DNA D. 该过程还须用到解旋酶来断开氢键 12. 为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转入大豆植株中，获得转基因大豆。下列叙述错误的是（ ） A. 可将耐低磷基因OsPTF插入Ti质粒的任意位置 B. 以水稻RNA为模板经逆转录可获得OsPTF基因 C. 该操作可打破物种界限，实现遗传物质跨物种转移 D. 该转基因大豆的种植可能有助于减少化肥的使用 13. 利用山金柑愈伤组织细胞（2N）和早花柠檬叶肉细胞（2N）进行体细胞杂交可以得到高品质的杂种植株。下图是对某杂种植株核DNA和线粒体DNA的来源进行鉴定的结果。下列分析正确的是（　　） A. 该实验中，诱导原生质体融合有多种手段，包括物理法、化学法和灭活病毒诱导法 B. 细胞融合后获得的融合原生质体需放在无菌蒸馏水中以防杂菌污染 C. 可通过比较融合后细胞的颜色进行初步筛选 D. 杂种细胞经过组织培养得到的杂种植株是四倍体 14. 下图为某生物工程操作流程模式图，①、②为具体制备方法。下列叙述正确的是（ ） A. 若此图表示植物体细胞杂交，则①表示脱分化，②表示再分化 B. 若此图表示克隆羊的培育，则①需要体外受精技术 C. 若此图表示单克隆抗体的制备，则①可用PEG融合法 D. 若此图表示胚胎分割移植，则②对囊胚期的胚胎分割后，不可以直接移植给受体母牛 15. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（ ） A. ②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D. ④→⑤利用了植物组织培养技术 16. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B. c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C. 高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D. 若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 二、解答题（本大题包括5小题，共60分。除特殊标明外，每空1分） 17. 某化工厂的生产废水中含有一种含氮有机物Y，直接排放会污染土壤，现需将废水中物质Y降解处理后方可排放。某研究小组欲从土壤中筛选出降解Y效率最高的细菌（目标菌），已知Y在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。根据所学知识回答下列问题： （1）培养基的配方一般都含有______（至少写出3个）等营养物质。若要从土壤中分离目标菌，所用培养基应以Y作为______。 （2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙、丙3种细菌都能生长并形成菌落（如图一所示）。如果要得到目标菌，应该选择______菌落进一步纯化，选择的依据是______。 （3）分离纯化上述菌种的方法有______、______。某生物兴趣小组进行了如图二所示的操作：其中最明显的一处错误是______，整个操作过程中要灼烧接种环______次。 （4）接种前需要对培养基进行灭菌，常用的灭菌方法是______。 18. 某研究小组利用品种1（2N=28）和品种2（2N=40）两个鸢尾属远缘种作为亲本，通过植物体细胞杂交技术，培育出了结实率高、观赏性更好和适应性更强的品种3（含62条染色体）。回答下列问题： （1）实验过程中可用_______________酶处理获得原生质体，诱导植物原生质体融合时常用到的化学方法有（答出1种）。科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记品种1和品种2的原生质体膜上的蛋白质，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到___________种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到融合细胞的表面既有红色荧光又有绿色荧光时可判断该原生质体是由品种1和品种2融合而成的。 （2）植物体细胞杂交技术的关键环节是过程_______________（填序号）。从过程④到过程⑤需要更换新的培养基，原因是_______________（答出1点）。 （3）研究人员利用离体培养的品种1细胞生产细胞产物。为了筛选出高产细胞，研究者常用诱变的方法处理_______________细胞，该细胞团一直处于不断增殖状态，在诱变因素下容易产生突变。 （4）据图分析，品种1和品种2通过体细胞杂交技术培养出的品种3的染色体只有62条的原因是___________。 19. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤的单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。 （2）过程①的原理是___________。 （3）过程②所用的HAT培养基从用途上看属于_____培养基，能在其上生长的细胞特点为_____________。 （4）经过程②筛选的细胞还需进行过程③_______和________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （5）过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，这依赖于________原理。 （6）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的乳腺癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②从坐标轴可知实验结果：___________，且比初始肿瘤体积小；表明___________。 20. 异种器官移植是解决人类供体器官短缺的核心途径。我国科学家于2025年成功培育出无特定病原体的10只基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10只基因编辑猪，为异种器官移植提供安全供体，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题： （1）图中过程①培养时，应使用_____培养基（按物理性质划分）；贴壁细胞培养一段时间后，会因_____（写两点）等因素停止增殖，因此需使用_____处理贴壁细胞，再使用离心法得到单个细胞后进行传代培养。 （2）过程②常用_____方法对卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是_____，“去核”前卵母细胞要培养至_____期。 （3）过程③形成的重构胚还需用物理或化学方法激活，其目的是_____。 （4）重构胚成活率低是限制核移植成功的主要因素之一、研究人员探究了不同浓度的TSA（组蛋白去乙酰化酶抑制剂）对猪重构胚发育成囊胚的影响，结果如下表所示： TSA浓度（nM） 0 20 40 60 囊胚的形成率（%） 13% 22.8% 35.7% 21% 由上表可知，选用浓度为_____nM的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率，由此推测组蛋白乙酰化程度的升高会_____（填“促进”或“抑制”）重构胚的发育。 （5）为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是_____。 21. 注射胰岛素是目前治疗Ⅰ型糖尿病（胰岛素依赖型糖尿病）最有效的手段，而利用基因工程技术获得人胰岛素是常用胰岛素最主要的来源。科研人员利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构如下图所示。已知β-半乳糖苷酶能分解β-半乳糖苷（无色）产生蓝色物质。 回答下列问题： （1）基因工程技术的基本步骤包括：目的基因的筛选与获取、___________、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 （2）研究人员提取人________细胞中的总RNA，________形成cDNA，再设计引物PCR扩增人胰岛素基因。在设计引物时，引物1需能与胰岛素基因________（填“A”或“B”）链的左侧序列互补配对，且需在引物1的端________（填“5'”或“3'”）添加脱氧核苷酸序列5'-________-3'，使PCR扩增的人胰岛素基因能与上图中质粒正确连接。 （3）启动子包括组成型启动子（不需要诱导物，目的基因即可持续表达）、组织特异性启动子（使目的基因只在特定的器官或组织中表达）、诱导型启动子（当诱导物存在时，目的基因才能表达）等，为优化人胰岛素基因在大肠杆菌中的表达效果，持续高效生产人胰岛素，研究人员应选择________型启动子。 （4）研究人员将基因表达载体导入用________处理大肠杆菌细胞，并将上述大肠杆菌转入含有________的培养基中，从培养基上挑选呈________（填“无色'”或“蓝色”）的菌落，进行工业发酵培养，从而生产人胰岛素。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $