专题训练3（微生物的接种与培养）2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

专题训练3（微生物的接种与培养） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 答案 B B B D A D B C B 1．B 【详解】①纯培养是微生物学中的基本操作，包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，目的是获得单一菌种的纯培养物，①正确； ②液体培养基更有利于微生物的生长和繁殖，且便于后续的分离和纯化操作，扩大培养时用不加琼脂的液体培养基效果更好，②正确； ③平板划线法是一种常用的分离纯化微生物的方法，在第二区域内划线时，接种环上的菌种确实来自第一次划线的末端，目的是逐步稀释菌液，获得单个菌落，③正确； ④灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，包括芽孢和孢子，④正确； ⑤用选择培养基筛选特定菌种时，需要设置一组用完全培养基培养的实验作为对照，两者所接种的菌种相同，⑤错误； ⑥梯度稀释过程中，用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸几次的目的是使菌液与水充分混匀，⑥正确。 2．B 【详解】A、倒平板时冷却后的培养皿须倒置主要是为了防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基中造成污染，同时还可防止培养基中的水分过快挥发，A错误； B、通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，该过程中只蘸取一次菌液，B正确； C、在配制固体培养基时需要先对pH进行调节，再进行灭菌，C错误； D、纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，D错误。 3．B 【详解】A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确； B、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，B错误； C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验的准确性，C正确； D、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，D正确； 4．D 【详解】A、过程①为倒平板，获得的平板冷凝后，需要进行导致，A正确； B、依据图③可知，图②中共进行了五次划线，第一次划线前和每一次划线后都要进行灭菌处理，所以过程②中一共需要灼烧接种环1+5=6次，B正确； C、图示为纯化培养固氮菌的部分操作步骤，所以③中使用的培养基中不需要添加含氮有机物，C正确； D、题中纯化培养固氮菌的方法是平板划线法，不能用于细菌的计数，D错误。 5．A 【详解】A、3种菌种能在同一个培养基、同种条件下生长，因而可推测3种菌生长所需pH值、氧气条件基本相同，A正确； B、作画时用到的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌，不属于干热灭菌法，而接种工具-接种环需经过灼烧灭菌处理，属于干热灭菌法，B错误； C、显色培养基属于鉴别培养基，即作画的培养基必须用鉴别培养基，C错误； D、分次接种的目的是为了在不同的部位出现不同的颜色，D错误。 6．D 【详解】A、由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，而非代谢产物，A错误； B、因为鲜奶富含多种营养物质，是天然物质，相当于天然培养基，已经含有各种维生素，所以不必再往培养基添加维生素，B错误； C、酵母菌的数量测定可用血细胞计数板完成，细菌数量测定用细菌计数板，C错误； D、第二次发酵前需搅拌以促进酵母菌的代谢和繁殖，增加酵母菌数量，D正确。 7．B 【详解】A、制作果酒时先用清水冲洗，可以去除果实表面的灰尘、泥土及部分杂菌等污染物。先冲洗后去枝梗能有效减少污染风险，A正确； B、接种室在使用前，应先用消毒液加强消毒效果，再用紫外线照射 30 min，先用消毒液进行初步消毒，可以降低接种室整体的微生物负荷，包括紫外线难以杀灭的芽孢、孢子等。然后再用紫外线照射，可进一步杀灭空气中悬浮的微生物以及物体表面残留的微生物，两者结合能更全面、更彻底地杀灭各种病原微生物，B 错误； C、涂布平板时，用移液枪取菌液 0.1 mL 滴加到培养基表面，再用涂布器均匀涂布，以形成单菌落，C正确； D、光照可能会诱导植物细胞形成叶绿体等结构，促使愈伤组织过早地分化出维管等组织，而愈伤组织的形成需要细胞处于未分化状态，所以避光培养有利于形成典型的愈伤组织，后续培养过程中给予适当时间和强度的光照，有利于植物的光合作用，光照可以影响植物体内激素的合成、运输和分布，进而调节再分化过程，D正确。 8．C 【详解】A、步骤①倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，A错； B、灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再沾取菌液进行平板划线，B错误； C、步骤③通过连续划线，使接种物逐渐稀释分布在培养基的表面，在数次划线后培养，可分离到一个细胞繁殖而来的单个菌落，C正确； D、平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，所以无法对其计数，D错误。 故选C。 9．B 【详解】A、微生物培养过程中，为避免杂菌污染，实验前对器皿、接种工具和培养基等进行灭菌是确保培养成功的关键操作，A正确； B、过程①②是进行梯度稀释，在梯度稀释操作中，一般是吸取0.1mL菌液进行转移，B错误； C、刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解菌分解后，复合物无法形成，会出现以这些菌为中心的透明圈。透明圈直径越大，说明微生物分解纤维素的能力越强，所以应选择菌落直径与周围透明圈直径比值小的菌落进行纯化，因为这样的菌落对应的微生物分解纤维素的能力更强，C正确； D、利用该过程统计的是活菌数，直接计数法统计的是包括死菌在内的所有菌数。所以利用该过程统计得到的菌落数比直接计数法得到的菌数少，D正确。 10．(1) 控制脲酶合成的基因 30~300 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (2) 稀释度过高（或涂布器灼烧后没冷却） 该土样中有多种细菌能分解尿素 (3) C种细菌不能分解尿素 C种细菌可从A或B种细菌的代谢产物中获得氮源 【详解】（1）分解尿素的细菌之所以能分解尿素的根本原因是具有控制合成脲酶的基因，故能分解尿素的细菌能分解尿素，而其他微生物不能，其根本原因是前者具有控制脲酶合成的基因；一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。经过稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 （2）利用稀释涂布平板法进行接种培养后，若有3个平板均没出现菌落，可能的原因是稀释度过高，导致涂布的菌液中不含分解尿素的分解菌或涂布器灼烧后未冷却，导致接种液中尿素分解菌被杀死。 若在某个稀释度下涂布接种的3个平板经适宜培养后均存在多种不同特征的菌落，说明接种用的土样中有存在多种尿素分解菌，而不同分解菌形成的菌落特征不同所致。 （3）①结合题意分析，A、B、C三种菌落能混合生长在筛选尿素分解菌的选择培养基中，但C菌落却不能单独生长在这样的选择培养基中，说明利用A、B菌落分解利用尿素，但C菌落不能单独分解利用尿素； ②C种细菌与A、B两种细菌在同一个平板上能生长繁殖，原因可能是C种细菌可从A或B种细菌的代谢产物中获得氮源。 11． (1)选择 (2) 基本 防止基本培养基中混入特定氨基酸 (3)菌落A (4) 突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶 突变株D可以提供突变株C生长需要的营养物质甲，突变株C可以提供突变株D生长需要的营养物质乙 【详解】（1）培养基灭菌的常用方法是湿热灭菌法，通常可用高压蒸汽灭菌法。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是将不接种的培养培养基（空白培养）在恒温培养箱中培养一段时间，观察是否有微生物生长。如果在培养基上没有微生物生长，说明灭菌效果良好。 （2）根据用途分类，氨基酸缺陷型菌株不能在基本培养基中生长，图中基本培养基属于选择培养基。 （3）进行过程②培养时，为防止特定氨基酸混入基本培养基中，应先将丝绒布转印至基本培养基上，再转接至完全培养基上。 （4）分析题图，菌落A在完全培养基上能生长，而在基本培养基上不能生长，最可能是某种氨基酸缺陷型菌株，应挑取完全培养基中的菌落A进行接种培养，并进一步鉴定。 （5）由表格分析可知，突变株C的生长依赖于营养物质甲，突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶；突变株C的生长依赖物质甲，而突变株D的生长依赖于营养物质乙，不添加营养物质甲和乙，二者混合培养时都能生长，最可能的原因是突变株C为突变株D提供了营养物质乙，突变株D为突变株C提供了营养物质甲。 答案第4页，共4页 答案第1页，共4页 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题训练3（微生物的接种与培养） 1．下列有关微生物实验室培养的说法，正确的有几项（   ） ①微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 ②扩大培养时用不加琼脂的液体培养基效果更好 ③平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自第一次划线末端 ④灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子 ⑤选择培养基筛选特定菌种时，设置一组完全培养基培养的实验作对照，两者接种菌种不同 ⑥使用稀释涂布平板法进行梯度稀释时，移液枪把菌液从一支试管转移到下一支试管后要吹吸试管中溶液几次，目的是使菌液和水充分混匀 A．6项 B．5项 C．4项 D．3项 2．酵母菌的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。叙述正确的是（   ） A．倒平板时冷却后的培养皿需倒置主要是为了方便观察 B．利用平板划线法接种时，接种环只蘸取一次酵母菌液 C．在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节 D．纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物 3．细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m3）。叙述错误的是（　　） A.采样前需对空气微生物采样器无菌处理 B.稀释涂布平板法检测细菌气溶胶浓度比实际高 C.同一稀释度下至少对3个平板计数取平均值 D.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 4．固氮菌能固定空气中的氮气，为豆科植物制作“氮餐”，使其枝繁叶茂。某兴趣小组纯化培养固氮菌的部分操作步骤如图所示。下列相关分析错误的是（    ） A．过程①获得的平板冷凝后要倒置 B．过程②中一共需要灼烧接种环6次 C．③中使用的培养基中不需要添加含氮有机物 D．上述纯化培养固氮菌的方法也可以用于固氮菌的计数 5．在微生物培养过程中利用培养基为画布、细菌为颜料可以创作艺术图形。下图是利用3种微生物在同一培养基上作画的流程，有关叙述正确的是（　　） A．推测3种菌生长所需pH值、氧气条件基本相同 B．作画用的培养基及接种工具均需要采用干热灭菌 C．作画的培养基必须用选择培养基，否则无法显现颜色 D．分次接种的目的是为了形成单菌落，防止菌落重叠 6．奶啤是以富含多种营养物质的鲜奶为原料，通过微生物发酵得到的一种集酸奶与啤酒风味为一体的乳饮料。如图表示制作奶啤的流程图，下列相关叙述正确的是（    ） A．单一菌种繁殖所获得的微生物代谢产物称为纯培养物 B．若菌种①为乳酸杆菌，其培养基中必需需添加维生素 C.菌种①和②的数量测定都用细菌计数板 D第二次发酵前需搅拌促进菌种②代谢和繁殖 7．下列操作不利于达到实验目的的是（    ） A．制作果酒时先用清水冲洗，再去除枝梗和腐烂的籽粒 B．接种室在使用前，用紫外线照射30 min，再用消毒液加强消毒效果 C．涂布平板时，用移液枪取菌液滴加到培养基表面，再用涂布器均匀涂布 D．诱导愈伤组织期间无光照培养，后继培养过程中给予适当时间和强度的光照 8．下图表示培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（    ） A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B．步骤②为防止污染，接种环灼烧灭菌后应快速挑取菌落 C．步骤③划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D．步骤④在恒温培养箱培养后，可用于对酵母菌进行计数 9．已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。某研究员利用刚果红配制培养基，通过下列过程分离土壤中能分解纤维素的微生物并进行计数。有关叙述错误的是（　　） A．实验前，微生物培养的器皿、接种工具和培养基等应灭菌 B．过程①②一般都取1mL菌液转移 C．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值小的菌落进行纯化 D．利用该过程统计得到的菌落数比直接计数法得到的菌数要少 10．为调查某地土质状况，某科研小组利用以尿素为唯一氮源的选择培养基对该地土壤中能分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题： (1)能分解尿素的细菌能分解尿素，而其他微生物不能，其根本原因是前者具有 。采用稀释涂布平板法，既能经培养观察到分离的单菌落，又能统计样品中的活菌数目。为了保证数量测定结果准确，一般选择菌落数为 的平板进行计数。但统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为 。 (2)该研究小组将10 g土样进行梯度稀释，在某个稀释度下涂布接种了3个平板（接种量均为0.1mL），经适宜培养后，3个平板均没出现菌落，分析可能原因 （答一点）。明确原因后，该科研小组用先前制作的未使用的平板重新涂布接种3个平板完成实验，经适宜培养后3个平板均存在多种不同特征的菌落（已排除杂菌污染的可能），推测最可能的原因是 。 (3)该科研小组从上述同一平板中挑选出A、B、C三种菌落分别接种到液体培养基中，培养一段时间后，采用稀释涂布平板法接种在能分解尿素的细菌的选择培养基上，经适宜培养后，均能检测到A、B两种菌落，却始终检测不到C种菌落。 ①由此可得出的结论是 ;②推测C种细菌与A、B两种细菌在同一个平板上能生长繁殖的原因可能是 。 11．人工诱变后的部分细菌因基因突变导致某种酶无法合成，细胞中某些化学反应不能正常进行，形成营养缺陷型菌株，在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程： (1)根据功能分类，图中基本培养基属于 培养基。 (2)进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至 （填“基本”或“完全”）培养基上，原因是 。 (3)影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株接种位置相同，为了完成对初检的营养缺陷型菌株鉴定，实验员应挑取 （填“菌落A”或“菌落B”）接种培养，并进一步鉴定。 (4)科研人员用射线处理目的菌获得两个突变株C和D，用突变株C和D做实验，结果如表。 ①突变株C不能在一般培养基上生长的原因可能是 。②将突变株C和D混合在一起，接种于一般培养基上，都能生长的最可能的原因是 。 学科网（北京）股份有限公司 $