1.2.3微生物的培养技术及应用课件（第三课时）(1)——2026-2027学年高二下学期人教版生物学选择性必修三

人教版选择性必修三 第一章 发酵工程 微生物的培养技术及应用（第三课时） 第二节 授课人：xxx 课堂坐标 学习全览 1 选择培养基 2 3 微生物的选择培养 微生物的数量测定（第四课时） 课堂引入 本节聚焦 NO.1 选择培养基 1 选择培养基 📍美国黄石国家公园 水生栖热菌 提取 耐高温的DNA聚合酶 1 选择培养基 思考：为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢？ 这是因为水生栖热菌能在 70~80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 进阶思考：根据这个原理，我们能不能从许多微生物中筛选出我们需要的一种呢？ 耐热微生物 耐寒微生物 石油分解菌 1 选择培养基 1.概念： 选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2.原理： 原理：人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和PH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。 1 选择培养基 选择培养基四种常见制备方法（四种原理） 营养缺陷法 改变培养基的营养成分 培养基缺乏氮源时 可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存 培养基缺乏有机碳源时 异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物而生存 1 选择培养基 特殊营养法 利用培养基“特定化学成分”分离 当石油为唯一碳源时 不能利用石油的微生物不能生存，能够利用石油的微生物能生存，从而分离出能降解石油的微生物 当尿素是唯一氮源时 不能利用尿素的微生物因缺乏氮源而不能正常生长，能够分解尿素的微生物能利用尿素作为氮源而正常生长 当以纤维素为唯一碳源时 能分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖 1 选择培养基 加入某些特定的物质 原理 依据某些微生物对某些物质的抗 性，在培养基中加入某些物质，以“抑制”不需要的微生物的生长， “促进”所需要的微生物的生长（前提是培养基具备全部营养成分） 举例 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 特殊物质法 1 选择培养基 特殊环境法 通过某些“特殊环境分离” 在高盐环境中 可分离耐盐微生物，其他微生物在— 盐浓度高时易失水而不能生存 在高温环境中 可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温中因酶失活而无法生存 1 选择培养基 【资料】尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，被某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3－、NH4＋等才能被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。 思考讨论 CO(NH2)2+H2O 脲酶 CO2+2NH3 NO3-、NH4＋ 被植物吸收 1 选择培养基 1. 如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 思考讨论 1 选择培养基 多思一题 3.怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 设计思路：设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照组；选择培养基作为实验组。 结果分析：若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数多于该选择培养基的菌落数，则该选择培养基具有选择性。 选择培养基有选择性，适合一部分微生物或一种微生物生长，而基础培养基适合大部分微生物的生长。 1 选择培养基 扩展：鉴别培养基： 说明：加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应 作用：鉴别目标微生物 例如：可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色) 对比：选择培养基： 加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质 培养、分离出目标微生物 培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌 NO.2 微生物的选择培养 2 微生物的选择培养 分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物 计数：测定分解尿素的细菌的数量 土壤细菌的数量庞大，该如何获得土壤中特定微生物的纯培养物计数呢？ 稀释涂布平板法 获得纯培养物 2 微生物的选择培养 释涂布平板法 概念：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别 涂布到固体培养基的表面，进行培养。 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 稀释涂布平板法的基本操作： ①铲取土样，将样品装入纸袋中。 1×10 10g 1 mL 逐步稀释 ②在火焰旁将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 取 1 mL 上清液加入盛有 9 mL 无菌水的试管中，依次等比稀释。 2 微生物的选择培养 ③用微量移液器取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 微量 移液器 2 微生物的选择培养 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 2 微生物的选择培养 恒温培养箱 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30〜37 ℃的恒温培养箱中培养1〜2 d。 2 微生物的选择培养 恒温培养箱 稀释涂布平板法完整流程图 2 微生物的选择培养 实验结果：已接种的不同稀释倍数 牛肉膏蛋白胨培养基 2 微生物的选择培养和计数 已接种的稀释不同倍数的的选择培养基 课堂检测 1．下列选项中，不是使用选择培养基培养微生物的目的的是（） A．除去其他微生物 B．使需要的微生物大量繁殖 C．通过表现特殊性状，与其他微生物相区别 D．可以增加要培养的微生物的浓度 C 【解析】A、利用选择性培养抑制或阻止其他微生物生长，从而除去其他微生物，A正确；B、利用选择性培养基分离特定微生物，目的是允许某种特定微生物生长繁殖，B正确； C.通过表现特殊性状，如观察菌落特征与其他微生物相区别，此过程可以不使用选择培养基，C错误； D.利用选择性培养基可以增加要培养的微生物的浓度，D正确。 故选C。 课堂检测 2.下列有关涂布平板操作的叙述，不正确的是( )　　）   A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面 C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10秒再用 D．涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀 A 【解析】AC、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中，将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、 涂布器冷却后，再进行涂布，A错误，C正确。 B、取少量菌液（0.1 mL），滴加到培养基表面，B正确； D、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，使涂布均匀，D正确。 故选A。 课堂检测 2．地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H3）n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列说法正确的是（    ）   A．覆盖地膜的土壤在富集培养前需要进行湿热灭菌处理 B．X培养基以聚乙烯为唯一碳源，属于选择培养基 C．降解地膜最高效的是细菌①，可挑选①中的菌种接种到Y培养基上 D．Y培养基属于固体培养基，其pH一般调至中性或弱酸性 B 【解析】A、所需菌种来自土壤，不可对覆盖地膜的土壤进行湿热灭菌处理，否则无法获得菌种，A错误； B、结合题意可知，目标菌种为能分解聚乙烯的菌种，故X培养基中以聚乙烯为唯一的碳源，属于选择培养基，B正确； C、抑菌圈越大，说明降解地膜的效果越好，故可挑选⑤中的单菌落接种到Y培养基上，C错误； D、在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，扩大培养一般用液体培养基，D错误。 故选B。 本课结束 谢谢大家 Multimedia Cloud Transcode (cloud.baidu.com) Content Adaptive Encoding 3.0 $