内容正文:
人教版选择性必修三
第一章 发酵工程
微生物的培养技术及应用(第一课时)
第二节
授课人:xxx
课堂坐标
学习全览
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培养基的配制
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无菌技术
微生物的纯培养
(第二课时)
课堂引入
由于空气中有许许多多的微生物,所以在家庭制作发酵产品时会导致有其他杂菌进入,进而导致发酵失败
如何避免这类问题呢?
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培养基的配制
获得纯净的微生物培养物
为所需要的微生物提供合适的营养和环境条件
确保其他微生物无法混入,将需要的微生物分离出来
培养基的配制
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培养基的配制
为所需要的微生物提供合适的营养和环境条件
培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质
是营养物质,不是器械!!!!!
X
√
微生物:难以用肉眼观察的微小生物的总称。包括细菌,真菌,病毒等
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培养基的配制
培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质
1·作用:用以培养,分离,鉴定,保存微生物或积累其代谢物。
2·种类:液体培养基【不含琼脂,呈现液态】
固体培养基【含琼脂,呈现固态】
加入
琼脂
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培养基的配制
琼脂
扩展:
在液体培养基中加入琼脂后制成的琼脂固体培养基,是实验室中最常用的培养基之一
微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落
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培养基的配制
3培养基的营养成分
一、碳源 二、水 三、氮源 四、无机盐
主要来源:
无机碳源:CO2、NaHCO3等
备注:自养型微生物能通过自身光合作用或化能合成作用合成有机物,能利用无机碳源
有机碳源:牛肉膏、蛋白胨、糖类、脂肪酸和石油等
备注:异养型微生物不能自身合成有机物,只能利用现成的有机碳
作用:碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后,成为微生物自身的结构物质和代谢产物。
主要来源: 无机氮源:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等 有机氮源:肉膏、蛋白胨、尿素CO(NH2)2等
作用:氮源物质主要用于合成细胞中的蛋白质、核酸等
来源:无机盐一般有磷酸盐、硫酸盐、氯化物以及含钠、钾、钙、镁等元素的化合物。此外,还需要锌、锰、钼、铁、铜等微量元素。作用:是细胞的组成分,生理调节物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂等
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培养基的配制
补充:生长因子
生长因子通常是指微生物自身不能合成或合成量不足,但又是微生物生长和代谢所必需的小分子
如某些维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。酵母浸粉、牛肉浸膏或植物组织提取液等天然物质中含有不同的生长因子。
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培养基的配制
4、培养基的其他分类
天然培养基
合成培养基
VS
天然培养基含有蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉等化学组成不确定的成分,如培养常见细菌的牛肉膏蛋白胨培养基。
合成培养基是由化学成分完全确定的物质配制而成的培养基。
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培养基的配制
通用培养基:营养物质齐全,可以满足多种微生物的营养需求。
选择培养基:有利于目的微生物生长,使其成为优势菌,从而抑制杂菌生长,如仅以纤维素为碳源的培养基可用来筛选土壤中产纤维素分解酶的微生物。
鉴别培养基:鉴别培养基用于区分和鉴定不同微生物,如大肠杆菌在伊红美蓝培养基上的菌落呈现金属光泽的紫黑色。
根据作用分为三大培养基
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培养基的配制
某种常见的细菌培养基的营养构成【课本p10】
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培养基的配制
答案:
氮是微生物细胞内蛋白质、核酸(DNA、RNA)、磷脂等重要化合物的组成元素。微生物细胞的生长、增殖,需要不断合成蛋白质、核酸这些生命大分子,因此培养基必须提供氮源,用来合成含氮物质,满足微生物生长繁殖的需求。
补充拓展:
氮源作用:主要用于合成细胞中的含氮有机物;少数氮源(如铵盐、硝酸盐)还可以为微生物提供能量。
小辨析:
固氮菌特殊:可以直接利用空气中N2作为氮源,培养基中不需要额外添加氮源。
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培养基的配制
乳酸杆菌----维生素
霉菌---调制酸性
细菌---中性或弱碱性
厌氧微生物---无氧条件
常考,易混
例题:下列关于培养基满足微生物生长所需条件的叙述,错误的是()
A.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
B.培养霉菌时需要将培养基调至碱性
C.培养细菌时需要将培养基调至中性或弱碱性
D.培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件
B
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无菌技术
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括
消毒和灭菌。
定义
1.消毒:
是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。
2.灭菌:
是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
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无菌技术
对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒
将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
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无菌技术
1.消毒
煮沸消毒:在100 ℃煮沸5----6 分钟,可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。
巴氏消毒:对于一些不耐高温的液体,如牛奶,则可使用巴氏消毒法,即在62 ---65 ℃消毒30 min或80---90 ℃处理30 s ---1 min,可以杀死牛奶中的绝大多数微生物,并且基本不会破坏牛奶的营养成分。(啤酒啤酒、人乳及婴儿合成食物等)
接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可以用紫外线照射30 min,以杀死物体表面或空气中的微生物。
巴氏消毒法视频:
物理方法
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无菌技术
化学方法
如采用碘酒、体积分数为70%的酒精、双氧水等化学药剂,对实验室的空间、操作台表面、实验人员的工作服与手等进行消毒。
生物方法
生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。例如,有的微生物能够寄生于多种细菌体内,使细菌裂解,因此可以用它们来净化污水、污泥。
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无菌技术
2.灭菌
NO.1湿热灭菌
利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法。
高压蒸汽灭菌
实验室常用高压蒸汽灭菌锅,在压力100kpa、温度121℃条件下,维持15---30分钟
原理:高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性
优点:操作简便,效果可靠,可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。
对象:培养基等
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无菌技术
NO.2湿热灭菌
NO.3干热灭菌
干热灭菌箱内,在160---170℃的热空气中维持下2--3小时达到灭菌目的
原理:使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等
对象:耐高温,需保持干燥的物品
玻璃器皿 (如试管、培养皿、吸管、注射器)
金属器具 (如针头、 镊子、剪刀等)
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无菌技术
NO.4灼烧灭菌
将微生物的接种工具,如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。
本课结束
谢谢大家
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