重庆市第一中学校2026-2027学年高三上学期9月阶段检测生物试题

重庆一中高2027届高三9月月考 生物试题 注意事项： 1,答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号码填写在答题卡上。 2.作答时，务必将答案写在答题卡上。写在本试卷及草稿纸上无效。 3.考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题：本题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合 题目要求的。 1.有心栽花花不开，无心插柳柳成荫。有时，充分的生物学知识可以弥补部分实验上的失误。下列非 标准的实验操作中，不能够实现原实验目的的是 A.利用祥葱鳞片叶观察植物细胞分裂时细胞核、染色体的形态变化 B.可以通过斐林试剂制备双缩脲试剂，验证豆浆中含有蛋白质 C.选取水体中的轮藻，在高倍显微镜下观察胞质环流现象 D,利用电子显微镜和有机溶剂等，以大肠杆菌为实验材料证明细胞膜由双层脂质分子构成 2.生长激素是由垂体分泌的蛋白质类激素，能促进蛋白质合成和骨的生长。人生长激素是由191个氨 基酸组成的一条多肽，其中含有赖氨酸残基18个(R基是C,H。N,含有氨基)，已知肽酶A专 一性水解赖氨酸羧基端的肽键，下列有关说法正确的是 A.生长激素彻底水解后的产物中至少含有209个氨基 B.生长激素中含有的非必需氨基酸有13种，能够在人类体内自主合成 C.生长激素被肽酶A作用后，剩余多肽的分子量之和比生长激素高324 D.幼年时期缺乏生长激素，可通过口服的方式补充 3.某科研团队构建了工程细菌与巨噬细胞的内共生系统，为肿瘤免疫治疗提供新方向。该系统包括三 个核心机理：①高表达细菌ATP合酶，并减少ATP消耗途径，使其成为人工“ATP工厂”；②使 用脂质膜包裹细菌，避免被巨噬细胞的溶酶体降解，延长工程细菌的存在时间；③工程细菌分泌的 免疫刺激因子进人巨噬细胞细胞核，使巨噬细胞功能增强。下列相关叙述错误的是 A.工程细菌的遗传物质都是环状双链DNA B.内共生巨噬细胞生命活动所需ATP并不全部由工程细菌产生 C.工程细菌产生的免疫刺激蛋白到达巨噬细胞细胞核内需要穿过2层磷脂双分子层 D.导入工程细菌后，巨噬细胞内ATP浓度明显上升 4.为研究胰腺癌细胞自噬能力的强弱，研究人员构建了表达GFP-LC3-RFP融合蛋白的胰腺癌细胞系 (GFP为绿色荧光蛋白，RFP为红色荧光蛋白，LC3为内质网膜上的驻留蛋白)。内质网出芽形成 隔离膜包裹细胞器形成自噬体，当自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体后，酸性环境会淬灭GF 荧光，而RFP荧光得以保留。如图，下列说法错误的是 A.细胞自噬可以维持细胞内部环境的稳定，激烈 的细胞自噬可能会引发细胞凋亡 GFP-LC3-RFP ⊙溶酶体 B.自噬能力越强的胰腺癌细胞，绿色与红色的荧光 强度比值越小 C.参与GFP-LC3-RFP融合蛋白合成加工的细胞器 隔离膜 自噬体 自噬溶酶体 有核糖体、内质网、高尔基体和线粒体 D.通过细胞自噬清除受损的线粒体，水解产物有核 苷酸、氨基酸和脂肪酸 ]第1页·预祝考试顺利 5.青红酒以糯米为主要原料，拌入糖化剂和酒曲酿制而成，其酿制过程主要包括浸泡与蒸煮、糖化与 拌曲、密封发酵、过滤与澄清、陈酿等，发酵过程中乙醇含量和残糖量（未被微生物利用的糖含 量)变化如图所示。下列叙述正确的是 300 120 A.图中第3~4天乙醇产生速率最快，可用溴麝香草酚 100 蓝溶液检测是否有乙醇生成 80 B.蒸煮冷却的糯米加人糖化剂和酒曲后应立即密封， 150 以防止发酵过程中杂菌污染 120 90 40 C.密封不严时醋酸菌可在酒液表面形成菌膜，将酒精 6 20 转化为醋酸并释放C0, 10 012345678910 D.酿造过程不必严格灭菌，发酵前添加一定比例的葡 发酵时间 萄糖可提高酒精的产量 6,利用胚胎干细胞法可获得转基因动物：将目的基因导入胚胎干细胞，再注入囊胚构建嵌合体胚胎， 经胚胎移植后可获得嵌合体小鼠，具体过程如图甲所示。研究人员将红色荧光蛋白基因导入小鼠胚 胎干细胞，获得发红色荧光的胚胎干细胞(ES-R),将ES-R分成5组，分别置于5种不同培养基 中培养后，注入小鼠囊胚，继续培养一段时间后检测囊胚中红色荧光面积占比，结果如图乙所示。 下列叙述错误的是 20 Primed 4CL HENSM PXGL 5iLA 注射 5 8 移植代孕妊娠、嵌合体 母鼠出生小鼠 →后代 透明带 小鼠囊胚 种类 嵌合胚胎 甲 乙 A.嵌合胚胎需在代孕母鼠体内正常孵化后，才能与子宫内膜接触并着床继续发育 B.培养ES-R时，在培养基中添加血清是为了促进ES-R分化为特定的组织细胞 C.培养基4CL中红色荧光面积占比最高，说明4CL更有利于ES-R参与嵌合胚胎的发育 D.若嵌合体小鼠雌雄随机交配，后代受精卵中不一定均存在红色荧光蛋白基因 7.植物生物反应器具有成本较低、可大规模生产等优点。某科研团队利用烟草叶片生产抗狂犬病病毒 的单克隆抗体，主要流程如图所示。下列有关叙述正确的是 ●● 筛选。● 分泌■ ∥ 测序 合成 +0000 狂犬病病毒 杂交瘤 阳性 抗狂犬病 编码抗体的 免疫的小鼠 细胞 克隆 病毒抗体 DNA 抗体 检测 侵染 导入 表达情况 烟草叶片 基因工程的农杆菌 基因表达载体 A.常用灭活病毒或聚乙二醇诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，该过程发生了基因重组 B.利用狂犬病病毒免疫的小鼠，经细胞融合和筛选可获得多种抗狂犬病病毒的单克隆抗体 C.经CCl,处理的农杆菌细胞壁通透性增大，处于一种易于吸收外源DNA分子的生理状态 D.将含有目的基因的农杆菌与烟草叶圆片共培养后，可用PCR技术检测抗体是否生成 [,第2页·预祝考试顺利 8.豌豆为严格自花传粉、闭花受粉的二倍体植物，已知豌豆种皮由母本体细胞发育形成，子叶由受精卵 发育而来。控制豌豆种皮颜色褐色(R)与无色透明()、子叶颜色黄色(Y)与绿色(y)的两对 基因独立遗传。科研人员借助荧光原位杂交技术对染色体进行特异性标记：携带显性等位基因R的染 色体区段可被绿色荧光标记；携带显性等位基因Y的染色体区段可被红色荧光标记；隐性基因无荧光 标记。选取基因型为RYy的豌豆植株甲进行自交，不考虑互换与突变。下列叙述正确的是 A.子代所有结褐色种皮、黄色子叶种子的植株，体细胞内均可同时观察到绿色与红色荧光 B.子代只结褐色种皮、绿色子叶种子的植株，体细胞含红色荧光染色体个体所占比例为2/3 C.子代结无色透明种皮种子的植株共包含3种基因型，其中仅1种基因型的体细胞能检测到绿色荧光 D.若将豌豆植株甲与隐性纯合个体测交，植株甲上所结种子有4种表现型且比例为1：1：1：1 9.二倍体烟草的水杨酸可增强植物抗病性，独立遗传的3个基因G、H、K分别控制水杨酸合成途径 中三种关键催化酶的合成；基因隐性突变后，代谢停止在突变位点前的物质，野生型(G、H、K 均正常)最终积累水杨酸。研究者构建了6种单倍体隐性突变体，分别积累物质如下表所示，下列 说法正确的是 基因突变组合 G K G+K G+H H+K 积累产物 苯甲醇 苯甲酸酯 水杨酸酯 苯甲醇 苯甲醇 苯甲酸酯 A.代谢物质出现的先后顺序：苯甲醇→水杨酸酯→苯甲酸酯→水杨酸 B.向积累苯甲酸酯的突变体细胞中导人正常H基因，即可合成水杨酸 C.基因型为GgHhKk的植株自交，后代能积累水杨酸酯的植株中纯合子占1/3 D.纯合积累苯甲酸酯植株与纯合积累水杨酸酯植株杂交，子代可积累水杨酸或水杨酸酯 10.Lov型和Col型是拟南芥的两种品系。研究发现Lov型拟南芥3号染色体上的L3区有两个相邻基 因，分别编码可杀死花粉的毒蛋白和对应的解毒蛋白，Cl型的L3区仅保留功能缺失的同源序列。 纯合Lov型与纯合Cal型的杂交种(Lov-Col)3号染色体上L3区基因如图所示，已知L3区几乎 不发生重组交换。科研人员分别构建了相关基因缺失的杂交种(Lov-Cl),检测其花粉育性如下 表，下列叙述正确的是 L3区 Lov型3号 染色体 基因P基因A Lov-Col编号 1号 2号 3号 4号 杂交种Lov-Co) 花粉母细胞 缺失基因 p A 不缺失 Col型3号 染色体 基因P 花粉育性 50%可育100%可育全部不育 A.编码毒蛋白的基因是A基因 B.P基因的表达时间晚于A基因 C.推测杂交种(Lov-Col)4号的花粉育性为100%可育 D.杂交种(Lov-Col)4号自交产生的子代中，纯合Lov型植株的比例为1/2 11.果蝇性染色体组成如图甲所示，其刚毛的主要成分是几丁质。粗刚毛与细刚毛由常染色体上的等 位基因A/a控制，性染色体上存在等位基因B/b控制刚毛的有无。研究人员取一只粗刚毛雄果蝇 与细刚毛雌果蝇杂交得到F1,F,随机交配得到F2,表型统计结果如图乙所示。下列说法错误的是 Ⅲ非同源区 D 粗刚毛d 细刚毛9 红同源区 粗刚毛d粗刚毛？无刚毛？ 2 随机交配 非同源区 F2粗刚毛d。细刚毛d粗刚毛？细刚毛？无刚毛？ 24 8:15: 5 9 甲 e ]第3页·预祝考试顺利 A.无刚毛为隐性性状，基因B/凸位于X、Y染色体的同源区段 B.致死基因型为aaXX或AAXX C.群体中雌果蝇最多有7种基因型，3种表现型 D.基因B/b控制刚毛的形成体现了基因通过控制酶的合成来控制代谢过程 12.大麦(2n=14)属于自花传粉、闭花受粉作物，其雄性育性受基因M/m控制，基因型为mm的个 体雄性不育，颗壳颜色受基因B/b控制，褐色(B)对黄色(b)完全显性，两对基因位于同一对 同源染色体上。科研人员构建了一条含有基因M和B的异常染色体，将其导入黄色雄性不育的大 麦中，获得三体品系甲。已知含异常染色体的卵细胞有4/7不存活，含异常染色体的花粉均无法 存活。若甲品系减数分裂产生配子时，异常染色体不参与联会，随机移向细胞一极。各基因型个 体存活率相同，不考虑染色体互换及其他变异，下列叙述错误的是 A.甲品系产生配子时，细胞中染色体数目最多可达16条，成熟花粉的基因型为b B.人工将甲品系自交得到的F,进行随机交配，后代中黄色颖壳植株的比例为119/128 C.让甲品系自交后代F,中褐色颗壳的大麦在自然状态下传粉，F2中三体大麦的比例为3/7 D.若甲品系减数分裂时M或m所在的染色体均可参与联会，则MB雌配子所占比例为1/I0 l3.EdU和BdU均为胸腺嘧啶类似物，能摻人DNA复制产物。实验将多个造血干细胞培养于多孔板 中，所有孔同时加人Ed0,随后在不同时间点依次向各孔加人BdU,并检测各时间点双标记 (EdU'BrdU)细胞占EdU单标记细胞的百分比。游离的EdU和BrdU会被迅速降解，不影响检 测。结果如图（横坐标为加BdU的时间， 培养孔组1←号 4加人EdU 纵坐标为百分比)，下列叙述正确的是 培养孔组2 O加人BrdU A.细胞内RNA的合成过程中，也能掺入 。检测 培养孔组9 EdU和BrdU 培养孔组10 B.在培养细胞时需要进行稀释，使各个孔中 100 只有一个造血干细胞 5 C.PM段可表示一个完整的细胞周期的时长， 25 但不能准确表示一个细胞周期 0 D.QR段等于DNA复制的时长，PQ段的 时间 EU单标记细胞中无完整核膜结构 14.研究人员发现玉米籽粒胚乳的粉质与硬质分别受等位基因Q“和Q"调控。这对等位基因的序列长 度不同（图甲）。现用纯合粉质和纯合硬质玉米进行杂交，获得F,提取F,和纯合粉质玉米的基 因组，加入图甲所示3种引物进行PCR。已知Taq DNA聚合酶延伸速度约为1000bp/min,每轮循 环的延伸时间为30s,下列说法正确的是 标准 Q100 缺失片段 350 参照物①②③④⑤ 2000bp☐ Q1001961054350 1000bp ■ 引物1引物2 引物3 500bp 注：数字示碱基对(p)数量 300hp= 多 A.PCR遵循DNA半保留复制的原理，在反应时边解旋边复制 B.对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳时，点样孔更靠近图乙的b侧 C.只用引物1和引物3也可以区分这两种玉米的PCR产物 D.预测F,的PCR产物电泳结果符合图乙中③泳道的带型 ]第4页·预祝考试顺利 15.为制备出在可特定环境中优先生长的工程菌，用于生物治疗，研究人员向细菌中导入一些特殊的 DNA序列作为生物传感器。图I所示分别为氧气传感器和乳酸传感器的工作原理。现有含抗肿瘤 基因的工程菌甲（图Ⅱ），研究人员计划通过导入传感器，增强工程菌甲在缺氧且高乳酸的肿瘤 组织中增殖的靶向优势，下列说法错误的是 阻遏蛋白、 0 转录因子 乳酸 注： →促进 转录 转录 象L蛋白 转录 抑制 启动子A特定基因 启动子BL蛋白基因 启动子C特定基因 氧气传感器 乳酸传感器 I 类型 传感器中的特定基因 传感器1：氧气传感器 ① 类型 传感器中的特定基因 传感器2： ② ③ 组氨酸合成缺陷型菌 A.启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，是一段有特殊序列结构的DNA片段 B.氧气充足、乳酸充足对特定基因表达的影响都为促进基因表达 C,可通过增强启动子B的表达，避免特定基因在低乳酸环境下发挥作用 D,图Ⅱ中①、③可分别选择组氨酸合成酶基因和对细菌生长有毒性的T基因 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 16.(10分)绿眼虫是一种小梭形单细胞生物，生活在淡水池沼中，因细胞内含有叶绿体而体呈绿色。 绿眼虫生活在有阳光处，能进行光合作用。在黑暗的环境中则叶绿素消失，靠体表的渗透作用来 摄取营养，当回到阳光下又能重新恢复正常生活。结合已学知识，据图回答下列问题： 内质网 伸缩泡 高尔基体细胞核 叶绿体 鞭毛 线粒体 (1)绿眼虫和蓝细菌共有的细胞器是 眼虫在光照较弱的环境中，叶绿体会在细胞 内部向光源靠近，这是借助 (填细胞结构)的作用实现的。 (2)绿眼虫在刚被发现时，植物学家认为它是植物，依据是 (从细胞代谢的角度 回答)；动物学家认为它是动物，依据是 (从细胞结构的角度回答)。 (3)眼虫通常具有红色的眼点，对光的反应机制较为复杂。为探究眼虫感光的机制，某科学小组 观察眼虫的运动模式，发现主要有两种运动模式，A:鞭毛规律性摆动，使眼虫趋向光源定向运 动；B:鞭毛不规律摆动，使眼虫随机运动。并由此展开了以下实验： a.用自然光照射去眼点的眼虫的鞭毛区域，眼虫呈现B运动模式 b.用红光照射去眼点的眼虫的鞭毛区域，眼虫呈现A运动模式 [山 考试顺利 c.用蓝光照射正常的眼虫的鞭毛区域，眼虫呈现B运动模式 d.用自然光照射正常的眼虫的鞭毛区域，眼虫呈现A运动模式 ①小明去除了眼虫的眼点，发现去除眼点的眼虫在自然光照射下呈现B运动模式，而在红光照射 下为A运动模式；这说明眼点 (填“是”或“不是”)眼虫的感光器官，原因是 ②小红观察到，眼虫向光运动时，光源、眼点、鞭毛总能连成一线，因此小红认为眼虫的感光器 官在鞭毛附近，上述实验结果证明，眼虫的鞭毛区域在 条件下会出现趋光运动 (自然光由多种波长的光叠加而成)，解释眼虫在自然光下具有趋光性的原因： 17.(12分)土壤中大部分磷以难溶性磷酸盐（如磷酸三钙）形式存在，难以被植物直接吸收利用。 解磷菌能分解难溶性磷酸盐，提高土壤有效磷含量。科研人员从作物根部土壤中初步分离能分解 磷酸三钙的解磷菌，过程如图I所示。回答下列问题： 培养一段时间 挑选菌落获得分解能力强 的解磷菌 土壤10g 富集培养 甲培养基 25℃、100r·min1 (1)在培养基的制备过程中，操作方法包括以下步骤，其正确顺序为 (填序号)。 ①溶化②调整pH③倒平板④称量⑤灭菌⑥分装至锥形瓶 (2)图【中的富集培养基和甲培养基都是以磷酸三钙为唯一磷源的选择培养基，选择培养基的作 用是 在接种解磷菌时采用的方法是 。培养过程中平板需倒置，其原因是 (3)为提高菌株的安全性，科研人员通过紫外线诱变获得亮氨酸缺陷型菌株（无法合成亮氨酸， 细胞停止生长)，再采用夹层平板法筛选出该菌株。夹层平板法的原理如图Ⅱ所示：先在培养皿 上倒一层基本培养基，凝固后再接种一层待检菌液，其上再浇一薄层基本培养基，凝固后待培养 出菌落，再倒一层X培养基继续培养，最终培养结果如图Ⅲ所示。 ,X培养基 口一■■■口口日}基本培养基 (中间一层含菌) ①从营养构成上看，X培养基与基本培养基的区别在于 ②亮氨酸营养缺陷型菌株为图Ⅲ所示的 (填“甲”或“乙”)菌株。 (4)最终将诱变筛选后的解磷菌进行扩大培养。为监测培养液中解磷菌的活细胞密度，将抽取的 培养液稀释100倍后，再从中取1mL稀释液与台盼蓝染液等体积混合，用细菌计数板（计数室面 积为1mm2,深度为0.02mm,16×25型)对无色细胞进行计数。若要求培养液中活菌密度达到 3.36×10个/mL,则理论上平均每个中格中无色细胞数应不少于 个。 18.(9分)杂交水稻之父一袁隆平院士开创的“三系法杂交水稻”是我国粮食安全的重大科技成 果。三系水稻如下表所示。已知水稻雄性不育由细胞质基因(N/S)和细胞核基因(R/)共同 一]第6页·预祝考试顺利 控制，只要有N或R时，即为雄性可育，基因型S(T)才表现为雄性不育。 类型 功能 不育系 接受外来花粉结实 保持系 自交为保持系，与不育系杂交后代为不育系 恢复系 自交为恢复系，与不育系杂交产生可育杂交种 回答下列问题。 (1)水稻的育种通常需要借助雄性不育植株才能实现，利用雄性不育株培育杂交水稻的优点 是 (2)雄性可育水稻的基因型共有种。保持系的基因型为；恢复系的基因型为 (3)现有3个品系的纯合易感稻瘟病水稻()，其中恢复系易感病水稻发生显性突变产生了抗稻瘟 病水稻(TT),请根据三系配套法设计杂交实验，验证控制稻瘟病抗性的基因与控制育性的核基因 位于非同源染色体上。用遗传图解表示，要求写出亲本基因型和表型，子代基因型和表型分离比。 (4)2026年7月，中国水稻研究所培育出一系法杂交水稻技术，是杂交水稻领域的里程碑式突 破，大大消减了三系法制种繁琐、年年制种的局限。“华胥”基因(Hx/hx)是水稻体内与孤雌 生殖相关的一种基因，携带Hx基因的单倍体卵细胞可以在非受精的状态下进行一次染色体加倍， 从而发育成正常的植株。现有一株基因型为Hxx的水稻，其自交子代中，基因型与亲本相同的 比例为 19.(12分)囊性纤维病（以下简称CF疾病）是由CTR蛋白功能异常引起。已知CFTR基因两侧存 在酶切多态，如图I所示酶切可能产生21kb或16kb片段，突变本身不改变dⅢ酶切位点。某 家庭父母均正常，生育一个患CF疾病的女儿甲，图Ⅱ是该家庭不同个体的CFTR基因所在DNA 片段用HindⅢ酶切后的电泳图。 CFTR基因 甲父母 21kb HindⅢ Hind l 21kb CFTR基因 16kb -16kh HindΠ HindΠ (1)CF疾病的遗传方式为 。若该夫妇再生育了一个胎儿，电泳结果为21kb/16kb,则 其为患病男孩的概率为 。甲同时为红绿色盲携带者，与一个表现型正常的男性婚配生 育一个同时患C℉疾病和红绿色盲症男孩的概率是 (已知该地区CF疾病的发病率为 1/2500)。 (2)膜蛋白CTR功能异常导致细胞内CI浓度升高，支气管被黏液堵塞会引起CF疾病。图Ⅲ为 正常呼吸道上皮细胞中CTR功能的调控过程。 RAR 气道腔 CFTR 上皮细胞膜 GRK5 ATP CAMP ]第7页·预祝考试顺利 据图分析，CFTR功能异常会导致呼吸道上皮细胞外渗透压 ,引起黏液中水分流失。 下列可能缓解某CF疾病患者症状的方案有 A,向患者呼吸道上皮细胞导入正常CFTR基因 B.使用抑制剂降低GRK5基因的表达活性 C.敲除患者细胞内发生了致病突变的CFTR基因 D.大量补充CI,弥补气道腔中C数量缺陷 (3)研究发现某类CF疾病，是由正常CFTR基因非模板链上第350位碱基发生A→G突变、第 1651位碱基发生G→T突变，致使CFTR蛋白第117、551位两个氨基酸均变为色氨酸所致。按照 5'+3'的方向，推测转运色氨酸的tRNA上反密码子为“C ”。现用定点突变实验分 析正常C℉TR基因上的两个突变位点对呼吸道上皮细胞CI通道功能的影响，实验思路为：分别构 的CFTR基因表达载体作为实验组， 分别导人 (填“CFTR功能正常”或“CFTR功能缺陷”)的呼吸道上皮细胞，检 测各组细胞转运C的能力。 20.(12分)番茄为雌雄同花，是常见的蔬菜作物。研究人员发现，番茄的抗旱性与ZFP基因有关， ZFP基因可通过影响脱落酸的含量从而影响番茄的逆境响应能力。为进一步验证ZFP基因的作 用，研究人员需要构建ZFP基因敲除番茄。构建过程需要在载体上的限制酶BbsI切点处插入 ZFP基因的向导DNA序列，将载体导入番茄细胞后，其转录产物(gRNA)可特异性结合基因组 上的ZFP基因，并引导Cs9核酸酶发挥剪切作用。载体信息、ZFP基因部分序列及相关结果等 如图所示，回答下列问题。 Bbs I 启动子 Cas9核酸酶基因HKan Amp RR 5-CACCGGGTCTTCGAGAAGACCTGTTT-3 3'-GTGGCCCAGAAGCTCTTCTGGACAAA-5 LB/RB:T-DNA的边界序列；Kan:卡那霉素抗性基因；Amp:氯苄青霉素抗性基因。 甲载体信息 Bbs I 5'-GAAGACNN-3' 5'-GTCACCTCCAATGACTAGGG-3() 3'-CTTCTGNN NNNN-5 3'-CAGTGGAGGTTACTGATCCC-5'() N代表任一碱基 乙ZFP基因部分序列及B弘，I识别序列 (1)和限制酶相比，Cs9核酸酶作用过程的不同之处在于 (2)使用BbsI进行酶切时，理论上可产生的黏性末端最多有 种。本实验只使用BbsI进 行单酶切，但是在构建重组质粒时，并不会造成目的基因的反接，其原因在于 (3)本实验所用载体信息如图甲所示，载体经BbsI酶切后，需要在切点处插人人工合成的ZFP 基因的向导DNA序列，序列信息见图乙。已知gRNA发挥作用时，结合番茄基因组中ZFP基因 的非模板链。且图乙所示片段中，b链为ZFP基因的非模板链。由于ZFP基因的向导DNA序列 较短，可人工合成，在人工合成该片段时，还需要在a链和b链的5'端分别添加 和 序列（按照5'→3'方向写出碱基序列），才可以让该片段与载体成功连接 (4)为获得含有T-DNA片段的番茄细胞，需要在植物细胞培养基中加入 进行筛选。 在成功获得ZFP单基因敲除番茄之后，以该番茄作为唯一亲代，最早可从 (填 “亲代”“子一代”或“子二代”)种子中获得ZFP基因敲除纯合突变体番茄。该纯合突变体番 茄不一定携带Cas9核酸酶基因，理由是 即第8页·预祝考试顺利