内容正文:
人教版选择性必修三
第一章 发酵工程
微生物的培养技术及应用(第二课时)
第二节
授课人:xxx
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酵母菌的纯培养
微生物的纯培养
NO.1
微生物的纯培养
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微生物的纯培养
重点区分三个概念:
培养物,纯培养物,纯培养
在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。
获得纯培养物的过程
叫做纯培养
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微生物的纯培养
补充:菌落
定义:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
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微生物的纯培养
描述菌落,鉴别不同菌落,一般从形态,边缘,突起三个方面来看
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酵母菌的纯培养
课本p12.13
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酵母菌的纯培养
培养原理:
1.分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
2.采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
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酵母菌的纯培养
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酵母菌的纯培养
微生物的纯培养步骤:
配制培养基
灭菌
接种
分离
培养
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酵母菌的纯培养
一.配制培养基
1.称取去皮的马铃薯200 g,切成小块,加水1 000 mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15〜20 g琼脂,用蒸馏水定容至1 000 mL。
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酵母菌的纯培养
2.灭菌:将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100 kPa、温度为121 ℃的条件下,灭菌15〜30 min。将5〜8套培养皿包成一包,用几层牛皮纸包紧,放入干热灭菌箱内,在160〜170 ℃灭菌2 h。
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酵母菌的纯培养
3.倒平板:
待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。具体操作步骤如下。
1.拔出锥形瓶的棉塞。
2.将瓶口迅速通过火焰。
3.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,将培养基(10 〜 20 mL)倒入培养皿,立即盖上皿盖。
4.等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置。
不要完全打开,防止杂菌污染培养基
平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高;将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
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酵母菌的纯培养
二.接种和分离酵母菌
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养,可以分离得到单菌落。
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酵母菌的纯培养
步骤:
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酵母菌的纯培养
补充:平板划线法
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养,可以分离得到单菌落。
分区划线法
连续划线法
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酵母菌的纯培养
第4次划线
灼烧接种环灭菌
第五次划线
灼烧接种环灭菌
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酵母菌的纯培养
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酵母菌的纯培养
灼烧目的:【重点】
思考:【重点】
1.在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因?
以免接种环温度太高,杀死菌种。
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酵母菌的纯培养
思考2.在作第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线的原因?
使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,以便获得单个菌落。
三、培养酵母菌
完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28 ℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24〜48 h。
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酵母菌的纯培养
【课本p13】结果分析与评价
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酵母菌的纯培养
小结
重要概念辨析
补充
练习与应用【课本p14】
一、概念检测
1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基,又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。
(1) 培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利。( )
(2) 消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。( )
(3) 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。 ( )
X
√
X
答案与解析
(1) ×
解析:营养物质浓度过高,会造成渗透压过高,微生物细胞失水,不利于微生物生长,需要适宜浓度,不是越高越好。
(2) √
解析:灭菌是杀死物体内外所有微生物(包括芽孢、孢子);消毒仅杀灭部分微生物,一般不能杀死芽孢,二者杀菌程度不同。
(3) ×
解析:纯培养物指培养物中只有一种微生物,无杂菌。微生物自身代谢一定会产生代谢废物,纯培养物可以含有代谢废物。
概念检测
概念检测
培养皿和培养基。
接种
概念检测
(3) 从实验结果来看,洗手后我们就能进行无菌操作了吗?操作时,我们可以采用什么方法来避免手上微生物的污染?
通过实验结果可以看到,洗手后手上还有一些微生物,不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精棉球擦拭双手,或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。
概念检测
培养时间/h
意味着培养液中O2含量不同。
培养液中O2含量越高,酵母菌种群密度越大。
概念检测
(3) 为什么培养8h后,其中2个锥形瓶中酵母菌的种群密度基本达到稳定?
这时候已经达到了环境容纳量。
本课结束
谢谢大家
微生物的培养技术及应用(第二课时)
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