山东省威海市第二实验高级中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

威海二中高二生物期中检测试题（2026.5) 一、单选题（本题共20小题，每小题2分，共40分，每小题给出的四个选项中，只有一个选 项是最符合题目要求的) 1、下列关于发酵工程及其应用的叙述，正确的是（) A.利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分蛋白，可制成微生物饲料 B可将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵工程获得乙肝疫苗 C利用放线菌产生的抗生素防治水稻纹枯病，属于化学防治 D.利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进豆科植物生长 2.野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基 酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③ ④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是( 无菌落 紫外线 无菌绒布 A ③ B C原位影印 37C48h ② A图中①②④为基本培养基，③为完全培养基 B.A操作的目的是提高突变频率，增加突变株的数量 C.B的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面 D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养 各黄葛树的叶子、果实（榕果）和枝干含有独特的次生代谢产物酚类化合物。为探究校内黄 葛树下土壤中分解酚类化合物的细菌数量，进行了相关实验。下列分析正确的是() 0.1mL 0.1mL 0.1mL a) ®275 游 33⊙ 线285 1号 2号3号4号 5号 32图 ®280 5g土壤 加入无菌水 定容至50mL 0.9mL无菌水 0.1mL A.甲组中a培养基上的菌落连成一片，可能是稀释度过低造成的 B.以乙组计数，5g土壤中分解酚类化合物的细菌估算数目是1.4×10°个 C.土壤样液先在锥形瓶内进行富集培养，再等比稀释后涂布计数 D.以酚类为唯一碳源的培养基上生#的细菌都能合成酚类降解酶 4、某兴趣小组为探究不同抗生素分别对三种细菌的抑制作用，将含有不同抗生素的纸片放在 生长有细菌的培养基上，观察抑菌圈的直径，结果如图所示。下列叙述错误的是() ■大肠杆菌 口金黄色葡萄球菌 回枯草芽孢杆菌 0.3oT 0.30 芦02 幕25 0.20 0.20 015 0.10 0.05 8ae idd 0.00 0.04 阿莫西林浓度(mgmL) 试卷第1页，共12页 A.三种细菌的抗药性随着抗生素浓度升高而不断增强 B. 实验过程中需使用不含抗生素的滤纸片作空白对照 C.枯草芽孢杆菌对阿莫西林和四环素的敏感度均较大 D抑菌圈直径越大，说明抗生素对细菌的抑制作用越强 5研究表明，髓系细胞触发受体2(TREM2)是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重 要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制 备流程图，下列说法正确的是 令免疫小鼠 )8 ① ☒→ 特定培养 ② 基筛选 专一抗体检测 ③ ④ A步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞 B.经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖 C.步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交 D.步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养 6.下列关于生物技术安全性和伦理的叙述，正确的是 A. 生物技术可广泛应用在人类自身基因组改造和新物种创造中 B.生殖性克隆人破坏了人类遗传多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化 C鼓励发展基因编辑技术来设计试管婴儿解决不孕问题 D.转基因食品中的外源基因经过食用后会进入人体细胞并整合到人体的基因组 7.近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量 野生亚测黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下 说法正确的是 动物园亚洲熊♀A 野生亚洲黑熊♀B 超数排卵 ② 野生亚 洲黑熊。C3① 无核卵母细胞体细胞 ③T o83o88o D受体雌性←88⊙重构胚 ↓1 = 妊娠分娩 妊娠分娩 E后代 F后代 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵 B.A超数排卵排出的细胞必须生长到MTT期才能与C的获能后的精子发生受精 C.D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑能♀B同期发情处理 丑E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致 8.如图是某科研人员制备新冠病毒(SARS-CoV-2)单克隆抗体的相关过程。相关叙述正确的 是() 试卷第2页，共12页 过程① 经免疫的 B淋巴细胞 鼠瘤细胞 过程② LLL··1“」多孔玻璃板 过程③ 细田胞集落 a b C d L上的III1 细胞群体) 阳性反应 过程④ L的LLLL幽L A.已免疫的小鼠脾脏中，每个脾B淋巴细胞可产生多种抗体，所以需要进行细胞筛选 B 过程③培养后的细胞均能产生抗新冠的单克隆抗体 C. 克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象 D. 细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上有差异 9.胡萝卜具有清热解毒的功效，羊角芹有祛风止痛的功效。科研人员利用胡萝卜、羊角芹进 行育种，如图为部分育种流程。下列分析正确的是( QD.OD TODD +植株①秋水仙素植株② 胡萝卜 花粉粒 Y射线胚状体 ◆植株③ 262 A公公 ·芽、根·植株④ ● 愈伤组织 体细胞 界 原生质体A >◆独合细胞·植株⑤ 羊角芹 267 ●) 一界 体细胞 原生质体B A.用胰蛋白酶处理植物组织获得分散的单细胞 B不能用秋水仙素处理植株①的种子获得植株② C.获得植株③和植株④的过程称为器官发生途径 .获得融合的原生质体标志着植物体细胞杂交实验的成功 10.·科学家以番茄(2n=24)和马铃薯(2n=48)为材料，利用植物体细胞杂交技术，培育出若 干株番茄一马铃薯，其中有一株番茄一马铃薯（甲）经鉴定有71条染色体。下列相关叙述正 确的是( A获取番茄和马铃薯的原生质体，必须用到纤维素酶和蛋容酶 B.杂种细胞在形成愈伤组织的过程中，先发生脱分化后发性再然化 C.获得杂种植株甲所用多种培养基的成分差异在于激素种类不同、 D.甲体内，处于减数分裂I前期的细胞内可能会出现35个四分体 11.科学家利用蛋白质工程技术将水蛭素（一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质）第47位的天 冬酰胺替换为赖氨酸，显著提高了它的抗凝血活性，流程图如下。已知天冬酰胺对应的密码子 为AAU、AAC,赖氨酸 对应的密码子为AAA、GUA等。下列叙述错误物是 试卷第3页，共12页 一-4M月老双4单16k分开印599份(2)a402 目的基因 具有特定氨基酸 蛋白质 mRNA a 序列的多肽链 三维结构 b →生物功能 A.上图的操作流程是从预期的水蛭素功能出发的 B.在这项替换研究中目前可行的直接操作对象是基因 C上图中大分子物质a和b的单体序列均是唯一的 D.用蛋白质工程可生产基因工程所不能生产的蛋白质 12.通过动物细胞工程技术，可以利用患者自身的细胞在体外诱导发育成特定的组织器官，然 后再移植回患者体内。图1和图2表示利用自身细胞进行器官移植的两种方法，其中诱导多 能干细胞(PS细胞)类似于人类的胚胎干细胞。下列叙述正确的是 Oct3/4基因、Sox基因、c-Myc基因、KIf基因 导入 卵母细胞 →重构胚诱导 特定的组 患者→成纤维细胞→卫s诱导特定的 注 分化 织器官 细胞分化组织器宫 患者 移植 体细胞 移植 图1 图2 A.两种方法都需要运用动物细胞培养技术，需要将细胞置于含有9%0，和5%C02的混合气体的 C02培养箱中 &.利用两种方法所获得的组织器官的遗传物质均与患者的完全相同，因此移植后不会发生免 疫排斥反应 C.可利用农杆菌转化法或显微注射法将Oct3/4基因、Sox基因、cMyc基因和K1f基因导入 成纤维细胞 D.图2中卵母细胞去核实际去除的是纺锤体一染色体复合物，为保证成功率注入时可将整个 供体细胞注入去核的卵母细胞中 13.1993年诺贝尔化学奖授予了美国科学家莫里斯，以表彰其在PC技术发明过程中的突出贡 献。PCR 全称为聚合酶链式反应，是一种DNA体外复制技术。下列相关叙述正确的是 A.PCR过程中所需的两种引物能互补配对 B.升高PCR的退火温度有利于增加目标产物量 C.PCR过程中需要用解旋酶打开DNA双链 D热稳定DNA聚合酶可将脱氧核苷酸与引物3'端相连 14.基因工程会用到多种限制酶，下列为部分限制酶的识别序列和酶切位点及其在某质粒上的 酶切位点。下列叙述错误的是( X抗生素抗性基因BcI 动子 BclK 限制酶： BamH I Bel Sau3A I HindIII HindII 识别序列GGATCC Sau3A I TGATCA GATC 质粒 及切制位点CCTAGG ACTAGT CTAG BamH I 终止子 A.Sau3AI可切割BamH I和BclI的识别序列，其具有专一性 B.质粒被BamH I和BclI切割后，并在DNA连接酶的作用下，会发生环化 C.构建重组质粒时，切割该质粒的限制酶只能是BamH I D.分别用Sau3AI和BamH I切割目的基因和质粒，形成的重组质粒能被Sau3AI切成4 试卷第4页，共12页 个片段 15增强子是可促进基因转录的一小段特殊DNA序列，现用PCR扩增增强子和B基因，然后 重叠延伸使两片段融合，以实现对Bt基因表达的调控，如图所示。下列叙述正确的是() 增强子 引物B Bt基因 引物D 3 3 5 3 5 引物A· PCR 号引物C PCR DNA单链A 5' DNA单链C3, 3 3 DNA单链B DNA单链b 渠合 I 融合片段 A.增强子中含多个起始密码子以促进基因转录 B.引物B、C的序列需一致以促进两片段融合 CDNA单链B、C混合后才能延伸出融合片段 D.为获得大量融合片段可用引物A、D扩增融合片段 16.双元载体系统由微型质粒（含T-DNA,不含Vir区）和辅助Ti质粒（含Vir区，不含T-DNA) 组成，辅助Ti质粒可使微型质粒上的T-DNA整合到受体植株细胞染色体上。某研究团队利用 该系统研究了P启动子的调控活性，部分过程如图所示。下列说法错误的是( 启动子 滹潮霉素抗 GUS基因 r区《铺助正 性基天因 T-DNA (表达情况可检测) 复制原点 质粒 卡那霉素 抗性基因 复制原点 衣杆菌 微型质粒 P启动子 vir☒ 铺功工1 滹潮膏素抗 左DN GUS基天因 质粒 生基因因 (表达情况可检则) 复伟制 卡那素 原点 → 抗性基 复制原点 微型质拉 农杆菌 A. 可以将农杆菌转入双子叶植株进行研究 B通过检测GUS基因的表达情况可知P启动子的调控活性 6.检测发现受体植株具有卡那蠹抗性或潮霉素抗性能说明受体植株转化成功 D辅助Ti质粒可使T-DNA整合到受体植株细胞染色体上，依靠的可能是Vir区表达产物 17.为了获得抗白叶枯病的水稻品种，研究人员构建了含有抗病基因D的重组Ti质粒（如图）， 通过农杆菌转化法将D基因导入水稻种子诱导的愈伤组织，最终获得抗病植株。下列叙述正确 的是 试卷第5页，共12页 T-DNA T-DNA ,左边界 U6启动子 D基因 潮霉素抗性基因 右边界 卡那霉素抗性基因 A.水稻愈伤组织细胞中RNA聚合酶无法识别U6启动子 P在含重组Ti质粒的农杆菌中U6启动子不能驱动卡那霉素抗性基因表达 C。农杆菌侵染愈伤组织后所用的筛选培养基中需加入卡那霉素 D.愈伤组织再分化获得的含有D基因的幼苗属于抗病植株 l8.CRISPR./Cas9技术在遗传病治疗中展现出巨大潜力。镰刀型细胞贫血症是因B-珠蛋白基 因(BB)发生点突变所致，患者红细胞呈镰刀状。科学家计划利用CRISPR/Cas9技术治疗该 疾病，流程大致为：设计靶向突变BB基因的单链向导RNA(SgRNA),引导Cas9蛋白切割突 变序列，同时导入正常BB基因片段作为修复模板，最终使细胞表达正常B-珠蛋白。下列叙 述错误的是( A,若SgRNA与某正常基因序列存在部分碱基互补，可能导致Cas9错误切割该基因（脱靶 效应) B.Cas9切割突变HBB基因后，细胞可利用导入的正常基因片段进行修复，但该过程易受 细胞内酶的影响，导致修复片段降解 C.构建重组表达载体时，需包含SgRNA基因、Cas9基因和正常BB基因模板，无需添加 启动子，需添加特定的标记基因 D.不同患者的BB基因突变位点可能存在差异，因此需根据患者具体突变序列设计特异性 SgRNA 9.某二倍体动物的基因型为AaXY,其一个精原细胞在减数分裂过程中每条染色体上的DNA 含量变化如图乙所示，图甲表示该分裂过程中的一个细胞图像（仅考虑图中的变异）。下列相 关叙述正确的是（ 每条染色体上的DNA含量 Y染色体 a de 细胞分裂时期 分 乙 A.图甲表明该精原细胞在减数分裂前的间期一定发生了基因突变 B.该精原细胞形成的另一个次级精母细胞的基因型可能为AaXx C.图甲细胞处于图乙曲线bd段，且细胞中含有两个染色体组 D.图乙cd段下降的原因是同源染色体分离，非同源染色体自由组合 0.图一表示某二倍体动物处于细胞分裂不同时期的细胞图像，图二表示该动物细胞分裂过程 中每条染色体上DNA含量的变化关系，图三中细胞类型是依据不同时期细胞中染色体数目和核 DNA分子数目的数量关系而划分的。下列有关的说法正确的是() 类笛4而计1？而 每条染色体上DNA含量 B 2 2 D 甲 丙 细胞分裂时期 图二 相4 染色体 ☐核DNA d 细胞类型 图三 A图一中甲所示细胞处于有丝分裂后期，在此时期之前细胞中央出现了赤道板 B.图一中乙所示细胞能发生基因重组，分裂后会产生一个极体和一个细胞 C处于图二AB段的细胞中可能发生基因突变，D点细胞中染色体数且是C点的2倍 D.若图三中的a、b、c细胞类型可表示某细胞分裂的不同时期，则该细胞的分裂方式最可 能是减数分裂 二、不定项选择（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题给出的四个选项中，有的只 有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的 雄0分) L某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列 操作下正确的是 内生菌 菌液划线 样品采集)→（样品消毒）→无菌检测→样品研磨 病原菌 抗性检测)←获得纯培养物←（稀释涂布 菌班 抗性检测 A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B.将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C.将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 ).判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 22.科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞(PS细胞)PS细胞能分化为 胰岛B细胞等多种组织细胞，可用于糖尿病的治疗等。下列有关叙述正确的是 A.iPS细胞存在于早期胚胎、外周血和脐带血中 B.获得PS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 ⅰPS细胞的分化程度高子成纤维细胞的分化程度 .上述思路治疗糖尿病埋论上可降低免疫排斥反应 3.不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法。加入的一对引 物中含量较少的被称为限制性引物，含量较多的被称为非限制性引物。P℃的最初的若干次循 环中，其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA),但当限制性引物消耗完后，就会产生大量的ssDNA。 不对称PCR的简单过程如图所示。假设模板DNA分子初始数量为a个，6次循环后开始扩增 试卷第7页，共12页 二生物月考双4单16k分开印599份(2)a404 生 SSDNA 列 叙 述 确 的 是 3 甲 限制性引物 非限制性引物 5 A限制性引物和非限制性引物均需要依据模板DNA的碱基序列来设计 B.据图可知，最后大量获得的ssDNA与图中甲链的碱基序列相同 C.上述过程中子链分别沿限制性引物的5'端、非限制性引物的3'端延伸 D.、该不对称PCR过程中需要(2-1)a个限制性引物 2±.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞的分祕的一种糖蛋白，制备抗 HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列相关叙述 错误的是 免疫动物 注射HCG B淋巴 细胞 A 代o66600BD 甜 骨髓瘤 HAT培养基中培养克隆化培养大规模 抗体筛选 培养 ① ② ③ ④ A. ①过程的促融剂常用聚乙二醇(PEG)，也可用灭活的病毒诱导 B③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原，利用抗原-抗体杂交的原理进行检测 C.给小鼠多次注射HCG的目的是获得较多的记忆细胞 D. ③过程需要添加抗生素等物质，目的是防止病毒污染 5下图1表示某二倍体动物（基因型为AaBb)体内正在分裂的某细胞，图2表示该动物细 胞分裂过程中不同时期细胞内染色体、染色单体和核DNA含量的关系。下列叙述错误的是 20 10 2 0 I V时期 图1 图2 A. 图1细胞为初级精母细胞，细胞中含有2个四分体 B正常情况下，图1细胞正在发生同源染色体上等位基因的分离和非等位基因的自由组合 C正常情况下，图2中I、Ⅱ时期的细胞中均含有2个染色体组 D.等位基因的分离发生在图2的Ⅱ→Ⅲ过程，不会发生在Ⅲ→IV过程 三、简答题 1.微生物技术及发酵工程的发展在环境污染治理及食品加工制造方面有着重要作用。根据相 关要求回答下列问题。 I、利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一、工业污水中含有的多环芳烃类化合 试卷第8页，共12页 物会造成农田土壤污染，围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。 (1)为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中 是唯一碳源。 (2)在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，原因是 。如果 分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用 法进一步分离 纯化。 (3)为进一步提高菌株降解多环芳烃的效率，可采用物理化学（如紫外线、亚硝酸钠等）等诱 变方法进行微生物育种，其原理是 ；也可采用 等技术定向改造菌 株。 Ⅱ、胡玉美蚕豆酱是豆瓣经过发酵后，大分子物质经过微生物代谢转化成多肽、氨基酸、脂肪 酸等，从而具有独特的风味，传统蚕豆酱制作流程是蚕豆→去皮→浸泡→蒸熟、冷却→接种→ 发酵→蚕豆酱。请回答下列问题： (4)传统蚕豆酱制作过程中，蚕豆为微生物生长发育提供 (至少答出两点)，蚕豆 蒸熟、冷却的作用是 (⑤)枯草芽孢杆菌具有较好的蛋白酶、淀粉酶及纤维素酶的分泌能力，在蚕豆酱的发酵过程中 可提高氨基酸态氮，提高酱的品质，某研究团队探究pH、温度对枯草芽孢杆菌FJ的活性影响 (如图)及枯草芽孢杆菌F丁对真菌毒素及黄曲霉菌的抑制效果（如表） 1.0 1.0 0.5 0.5 典 0.0 英 0.0 -0.5 -0.5 5 6789 2535455565 PH 温度 真菌毒素 发酵原料 添加枯草芽孢杆 未添加枯草芽孢 菌FJ 杆菌FJ 黄曲霉毒素B1 未检出 未检出 未检出 (ug/kg) 赭曲霉素A 未检出 未检出 未检出 (ug/kg) 玉米赤霉烯酮 未检出 未检出 未检出 (ug/kg) 脱氧雪腐镰刀菌 烯醇(ug/kg) 未检出 未检出 未检出 黄曲霉菌(ug/kg) 未检出 未检出 检出 ①据图分析，仅从枯草芽孢杆菌FJ考虑，将发酵过程中的条件控制为 条件， 枯草芽孢杆菌 黄曲霉菌的增殖。 ②取30g酱醪溶于70mL无菌水中，在10稀释倍数下，取0.1mL菌液涂布3个选择培养基（只 允许枯草芽孢杆菌生长)，统计菌落数分别为50、60、70个，每克酱醅中枯草芽孢杆菌数为 计数结果比显微镜计数法少，原因在于： 一是 因此通过统计菌落数得到的菌体数量比实际值) 二是 因此显微镜计数法统计的结果比实际值偏大。 试卷第9页，共12页 2.病毒感染初期，机体会分泌干扰素并作用于细胞受体IFNAR来应对感染。麻疹是由麻疹病毒 感染引起的急性传染病。已知人白细胞分化抗原46(hCD46)是麻疹病毒入侵细胞的主要受体， 小鼠没有该受体，科研人员构建hCD46转基因小鼠用于相关研究，部分流程如图所示。 Ag总i周动字E 质粒 终止子 hCD46 抗往 小阻 @6 线性DNA 6 小鼠 胚胎移植 子代小鼠 回答下列问题： (1)利用PCR技术获取目的基因hCD46,复性温度下发生的扩增过程是 (2)将hCD46接入质粒应选用的限制酶组合是 。 为提高转基因效率，同时避 免标记基因进入胚胎体内，应选用 限制酶组合将重组质粒变为线性DNA。 (3)为获取大量胚胎用于移植，可用激素处理小鼠a,使其 。 将胚胎移植到小鼠 c的子宫中，应选用桑葚胚的原因是 (4)利用PCR技术对子代小鼠进行hCD46基因检测，应设置不加DNA模板的对照组，目的 是 (5)若能进一步构建既表达hCD46受体又敲除IFNAR基因的小鼠，则该小鼠对麻疹病毒具有 高易感性，原因是 3.定点诱变技术是近年来生物工程研究中发展迅速的一个领域。通过定点诱变可以在体外改造 目的DNA分子，进而研究基因的表达以及蛋白质的结构与功能之间的关系。经典的大引物PCR 定点诱变技术成为基于PC的定点诱变技术中应用最普遍的方法，操作过程如图甲。研究者欲 改造某基因并将其导入大肠杆菌的质粒中保存，该质粒含有氨青霉素抗性基因、LacZ基因及 一些酶切位点，结构如图乙。回答下列问题： 到物1 CGG 改良基因 PCR1 5 目的基因 限制酶识翔序列及切割位点 诱变引物 CTAG SmaI XmaI BglII AGATCF 大引物 BglII NheI GCTAGC PCR2 3 LacZ -NheI SmaI CGE6G6 目的基因 基因 XmaI CCCGGG 引物2 母素 大引物 ② 性基因 LacZ基因编码产尘网能分解 到 :改良基因 B-半乳糖苷，产生蓝色物质， 使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色 大引物PCR法定点诱变（圈点为突变位点） 复制原点 乙 甲 (1)利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR(PCR和PCR2),在PCR,中，至少需要」 个 循环才能获得相应的大引物模板。在PC2中，要获得带有诱变点的改良基因，引物应选用大 引物两条链中的 (填“①”或“②”)。 (2)在PC反应体系中，需要加入引物和目的基因外，还需要加入 等。 (3)为实现质粒和改良基因的高效连接，选用限制酶XmaI而不选用限制酶SmaI的原因 是 为将改良基因构建在质粒上，还需要 等酶。 (4)在构建改良基因表达载体时，有的质粒含有改良基因，有的质粒为空白质粒，将含上述 试卷第10页，共12页 组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中，适宜温度下培养一段时间后，再将菌液涂布在 的平板上。一段时间后，在培养基上出现白色和蓝色两种菌落，其中白色菌落含有重组质粒， 判断的依据是 4.草莓果实采后难以保鲜是生产实践的难题。乙烯在调控果实成熟基因的协同表达中起着非 常重要的作用。研究人员通过反义RNA技术抑制乙烯受体基因Es1的表达，达到延长储藏期 的效果。CTAB法提取草莓叶片DNA的部分实验步骤如图1。请回答下列问题： 草莓叶片加入CTAB提取液 加氯仿、异戊醇 加异丙醇 ① 研磨液 上清液 离心 离心 离心 加75%乙醇洗涤 沉淀物 沉淀物 图1 (I)CTAB提取液中含有CTAB、EDTA、NaCI等物质，CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，使核 酸分离出来；EDTA是一种DNA酶抑制剂，加入其的目的是 氯仿、异戊醇密度均 大于水且不溶于水，DA不溶于氯仿、异戊醇，而蛋白质等杂质可溶，实验中加入氯仿、异戊 醇离心后，应取①是 (填“上清液”或“中层溶液”或“沉淀”)，该步骤重复1 一2次，继续进行下面两个步骤就可得到DNA粗制品。 (2)通过上述方法获得DNA后，DNA经进一步提纯后，通过PCR技术扩增Ersl。在PCR体系中， 加入的dNTP可提供 耐高温的DNA聚合酶需要 激活，添加引物的序 列不能过短，否则会导致其特异性 (填“降低”或“升高”)。 (3)为使目的基因与质粒连接，在设计PC引物扩增Ers1时，需在引物的 端添加 限制酶XhoI的识别序列。经XhoI酶切后的载体和Ersl进行连接（如图2），连接产物经筛 选得到的载体主要有 三种类型。为鉴定这些连接方式，选择paI酶和BamH I 酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析。若电泳结果出现长度为 的片段，该重组质粒即为所需的基因表达载体。 BamH I Xho I 100bp 200bp 潮露素 Hpa I 抗性基因 启动子 终止子 Brsl(约700bp) LB 6000bp RB 转录方向一 卡那霉素 PCR 抗性基因 PCR产物 注： LB、RB分别为T-DNA 的左边界、右边界 酶切连接 连接产物 图2 (4)将筛选得到的重组质粒与用 处理后的农杆菌混合，使重组质粒进入农杆菌。 用阳性农杆菌感染植物细胞，在含 的培养基中培养，筛选所需的植物细胞经过一 系列处理，最终得到的转基因植株的乙烯受体的合成受阻，其原因 5.下列甲、乙、丙、丁图分别是基因型为AaBB的某生物细胞的染色体组成和分裂过程中物质 或结构变化的相关模式图。请据图回答问题： 9 ① ② 个细胞内同源染色体对数甲 C D 数量( 2 分裂时期 丙 ☐细胞数 图DNA芬子数 回染乌体数】 42 ■染色单体数 Ⅱ 血 V细胞时期 (1)图甲中细胞④的名称是 对应图丁的 阶段，图丁由I→Ⅱ的过程 中，细胞内发生的主要变化是 (2)图甲中细胞①所处的分裂时期为 处于图乙 段，图甲中，处于图 乙HI阶段的是 填数字)。 (3)图丙a、b、c中表示染色体的是 ,图甲中对应图丙Ⅱ时期的细胞是 图丙中ⅡI,完成了图乙中的 段的变化。 II.研究发现，细胞周期蛋白B3(CyclinB3)缺失小鼠体型和生理状态都比较正常，具有完整 的卵泡和睾丸发育状况，但自然交配后雌性小鼠不能产生后代，而雄性小鼠的发育和繁殖能力 均正常。为进一步揭示CyclinB3的功能，研究者对正常雌鼠(2n=40)与CyclinB3缺失雌鼠 卵细胞形成过程中的关键时期进行了对比，如图所示。据图回答下列问题。 卵原细胞 间期I 中期I 后期I 中期Ⅱ 第一极体 正常雌鼠 CyclinB3 缺失雎雌鼠 D (3)由图分析可知，CyclinB3缺失的卵母细胞形成了正常的纺锤体，但未排出第一极体，表明 CyclinB3缺失的卵母细胞被阻滞于 。 推测细胞周期蛋白B3可以促进 分离。 (4)研究发现，CyclinB3缺失的卵母细胞在受精后可以绕过减数分裂I后期而进行减数分裂IⅡ， 在减数分裂Ⅱ后期发生姐妹染色单体分离，在排出第二极体后会发育为早期胚胎。早期胚胎发 育阶段，胚胎细胞通过 方式增殖，此分裂过程中染色体数最多有 条，但所有 胚胎在着床后会死亡。 试卷第12页，共12页