专题13 发酵工程（6年汇编）（重庆专用）2021-2026年高考生物真题分类汇编

专题13 发酵工程 考点1 传统发酵技术的应用 1.【答案】D 2.【答案】（1）酵母菌 30～35℃，有氧 稀释涂布平板法/平板划线法 （2）①③ （3）氮源、无机盐、水 6% 适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等 考点2 微生物的培养与应用 1.【答案】C 2.【答案】D 考点3 发酵工程及其应用 1.【答案】C 1.【答案】D 2.【答案】B 3.【答案】D 4.【答案】C 5.【答案】B 6.【答案】D 7.【答案】B 8.【答案】C 9.【答案】A 10.【答案】A 11.【答案】D 12.【答案】D 13.【答案】C 14.【答案】B 15.【答案】B 16.【答案】C 17.【答案】D 18.【答案】C 19.【答案】C 20.【答案】B 21.【答案】C 22.【答案】A 23.【答案】D 24.【答案】C 25.【答案】（1）上升 （2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ Ⅱ、Ⅲ 尖孢镰刀菌 （3）③ （4）菌株P 菌株S 菌株P和菌株S 实验组2和实验组3 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题13 发酵工程 6年汇编1年模拟 考点分类 重庆考情 命题规律 考点1 传统发酵技术的应用 2025重庆（1题）、2021重庆（1题） ·情境：围绕果酒、果醋、豆瓣酱等传统食品设题。 ·重点：菌种来源、发酵条件及过程变化。 ·趋势：联系生活实际，强化对微生物代谢和工艺条件的辨析。 考点2 微生物的培养与应用 2024重庆（1题）、2023重庆（1题） ·情境：结合粪便处理、餐厨垃圾资源化等现实问题。 ·重点：微生物筛选、培养、鉴别及应用。 ·趋势：注重实验流程设计，突出环境治理与资源利用。 考点3 发酵工程及其应用 2026重庆（1题） ·情境：以抗生素生产为背景，结合代谢途径设问。 ·重点：菌种选育、培养条件及代谢产物调控。 ·趋势：突出发酵流程与代谢调控的综合分析。 考点1 传统发酵技术的应用 1．（2025·重庆·高考真题）豆瓣酱是我国地方特色调味品，生产豆瓣酱时要将蚕豆瓣制作成豆瓣曲，再添加调料进一步发酵，下列说法错误的是（    ） A．沸水浸泡能杀死蚕豆细胞，减少有机物消耗 B．面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养 C．菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物 D．豆瓣酱的制备主要是利用厌氧微生物发酵 2．（2021·重庆·高考真题）人类很早就能制作果酒，并用果酒进一步发酵生产果醋。 （1）人们利用水果及附着在果皮上的______菌，在18～25℃、无氧条件下酿造果酒；在利用醋酸菌在______条件下，将酒精转化成醋酸酿得果醋。酿造果醋时，得到了醋酸产率较高的醋酸菌群，为进一步纯化获得优良醋酸菌菌种，采用的接种方法是_______________。 （2）先酿制果酒再生产果醋的优势有______（填编号）。 ①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率 ②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率 ③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中 （3）果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见图。 该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有_______________（填写两种）。据图可知，醋酸发酵的最适初始酒精浓度是______；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，此时，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有____________________________（填写两个方面）。 考点2 微生物的培养与应用 1．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（    ） A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 2．（2023·重庆·高考真题）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（    ）    A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品 B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源 C．X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动 考点3 发酵工程及其应用 1．（2026·重庆·高考真题）在发酵生产青霉素的过程中总会有头孢霉素产生，下图为青霉菌的部分代谢途径。结合发酵工程生产青霉素的过程，下列叙述正确的是（     ） A．可通过选育高表达酰基转移酶的青霉菌来阻断头孢霉素的合成 B．扩大培养时，培养基中添加Lys，青霉菌才能繁殖 C．可通过检测培养液中青霉菌数量和青霉素浓度了解发酵进程 D．发酵结束后，将菌体分离干燥可获得纯化的青霉素 1．（2026·渝西中学·模拟预测）忠县腐乳为重庆非遗特色传统发酵食品，制作流程传承古法工艺：选豆制坯→蒸坯灭菌→接种毛霉→前期发酵→加盐腌制→添加料酒与香辛料→装坛密封进行后期发酵。下列叙述错误的是（　　） A．蒸坯既可杀灭豆腐坯中的杂菌，又能使蛋白质空间结构改变，利于毛霉分泌的蛋白酶发挥分解作用 B．前期发酵阶段，毛霉利用豆腐坯中的有机物生长繁殖，可分泌蛋白酶、脂肪酶等多种水解酶 C．加盐腌制既能析出豆腐坯中水分使坯体变硬，又能抑制杂菌繁殖，降低腐乳腐败变质的风险 D．后期发酵密封坛口，主要是为了创造无氧环境，保证毛霉持续发酵产生大量风味物质 2．（2026·重庆南开中学·模拟预测）活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。现欲利用微生物处理染料废水中的活性黑5，具体操作流程如图：从染料废水堆积池的污泥中采集样液，通过培养基Ⅰ和Ⅱ的培养获得优势菌群，然后采用浓度梯度驯化法，进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌，并进行基因表达分析。下列相关叙述错误的是（　　） 注：BVU5是一种分解活性黑5的氧化还原酶 A．培养基Ⅰ从用途上属于选择培养基 B．假单胞杆菌中，BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为溶酶体 C．将细菌从培养基Ⅰ转移到Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌 D．驯化后的假单胞杆菌可能增强了BVU5基因的转录和翻译 3．（2026·重庆第十一中学校教育集团·模拟预测）抗生素是由某些微生物产生的、能抑制其他微生物增殖的物质，在临床抗感染治疗中应用广泛。科研人员从土壤中分离能产生抗生素的目的菌，并进行效果鉴定，相关实验流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．制备培养基时，需用到琼脂、碳源等，采用干热灭菌法灭菌 B．挑选菌落时，周围有透明圈的菌落所产生的抗生素种类相同 C．透明圈与菌落直径的比值越小，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 D．测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 4．（2026·重庆西南大学附中·模拟预测）聚苯乙烯（PS）在自然界中难以自然降解，但黄粉虫具有摄食并将PS转化为二氧化碳和虫体脂肪的能力。研究人员测定了黄粉虫肠道中分解PS的降解菌数量（过程如图所示），并从中分离了一株高效降解PS的细菌菌株YT2。相关叙述正确的是（    ） A．图中富集培养时可放在摇床不断振荡，目的是使营养物质和YT2充分接触并增加氧气 B．图中的富集培养基以PS为唯一碳源，其上生长的微生物都能降解PS C．应选择乙组平板进行计数，1mL富集培养液中PS降解菌估算数目是2.8×107个 D．YT2扩大培养时，向培养基中加入抗生素以避免杂菌污染 5．（2026·重庆·二模）我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵而成，其工业化生产流程如图所示。关于啤酒生产的相关说法，错误的是（    ） A．用赤霉素处理大麦种子可缩短啤酒生产周期 B．焙烤目的是使淀粉酶失活减少营养物质消耗 C．糖浆发酵过程应先通入无菌空气后隔绝空气 D．过滤得到的单细胞蛋白可制作成微生物饲料 6．（2026·重庆八中·模拟预测）随着餐饮业发展和垃圾分类推进，厨余垃圾产生量激增，资源化、无害化处理尤为迫切，如图为厨余垃圾干式厌氧发酵技术流程示意图，下列叙述正确的是（　　） A．利用干式厌氧发酵技术处理厨余垃圾制备沼气，会加剧大气中的温室效应 B．发酵前将高效降解厨余垃圾的微生物进行扩大培养是该发酵技术的中心环节 C．发酵时连续搅拌的目的是增加溶解氧含量和增大厨余垃圾与微生物的接触面积 D．从设备中分离出的沼渣可作为有机肥还田，促进了物质循环，提高了能量利用率 7．（2026·重庆西南大学附属中学·模拟预测）ε-聚赖氨酸（ε-PL）是一种优良的天然食品防腐剂，能抑制多种微生物的活性，且在人体内可被分解为赖氨酸。从土壤中分离出能分泌ε-PL的微生物的流程如图所示。ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列叙述正确的是（　　） A．甲培养基是液体培养基用于扩大培养，经过培养Ⅱ得到的都是单菌落 B．步骤Ⅲ采取的接种方法是平板划线法，整个接种过程需要灼烧2次接种环 C．菌落①分解ε-PL的能力比菌落②强，因此选择菌落①进行后续纯培养 D．丁培养基培养一段时间后经过滤、沉淀可从沉淀物中获得ε-PL 8．（2026·重庆育才中学·模拟预测）清香型小曲白酒以富含淀粉的粮食为原料，辅以绿衣观音土曲（含霉菌、酵母菌、乳酸菌等）进行发酵。关于该发酵过程如下图所示，下列叙述正确的是（    ） A．一般情况下，酵母菌比乳酸菌的物质运输效率高 B．图中的糖化作用指霉菌将淀粉水解为酒精的过程 C．发酵时产生泡沫的多少可用于判断发酵剧烈程度 D．发酵结束后可采用蒸馏法回收酵母以供下一次使用 9．（2026·重庆大足中学&七校联盟·模拟预测）汾酒是中国传统名酒，其酿造工艺如图。其中大曲是以大麦、豌豆为原料制成的中温发酵曲，含有霉菌、酵母菌、乳酸菌等多种微生物。下列正确的是（　　） A．大曲中的霉菌产生的淀粉酶可将淀粉分解为葡萄糖，该过程发生在霉菌细胞外 B．常压蒸煮糊化的主要目的是对原料进行灭菌，彻底杀灭原料中的所有微生物 C．发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段进行 D．固态蒸馏将酒精和发酵物进行分离，陶缸陈酿过程中微生物的代谢活动被完全抑制 10．（2026·重庆育才中学·模拟预测）人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，科研团队利用毕赤酵母生产重组人血清白蛋白（rHSA），构建转基因工程菌并通过发酵罐实现大规模工业化生产。若在发酵罐内的培养液中适时添加甲醇，可提高rHSA的产量。下列叙述不正确的是（　　） A．发酵所需酵母菌可通过基因工程获得，也可通过诱变育种获得 B．可通过抗原—抗体杂交技术检测酵母菌是否成功表达rHSA蛋白 C．27～30℃较适宜酵母菌生长，此时应提供有氧条件促进其增殖 D．发酵过程中添加甲醇，可为工程菌的生长繁殖提供碳源和能量 11．（2026·重庆八中·模拟预测）鱼茶的发酵由多种微生物共同参与，其中起主要作用的是乳酸菌。如图是鱼茶发酵过程中不同菌种数量及发酵液pH的变化曲线。下列有关叙述错误的是（　　） A．醋酸菌、酵母菌、乳酸菌的发酵都能影响发酵液的pH B．在发酵时间0-6d内，醋酸菌、酵母菌的数量均先增加后减少 C．在乳酸菌发酵阶段发酵装置的充气口应关闭，以隔绝空气 D．图中酵母菌消失的主要原因是发酵装置内氧气被耗尽 12．（2026·重庆巴蜀中学校·二模）科研人员欲对土壤微生物进行计数并分离出高效分解纤维素的微生物，部分流程如图甲所示。A组经多次实验后获得了4种优良菌种，接种到含刚果红的鉴别培养基中培养一段时间，形成单菌落，结果如图乙所示。B组⑦过程稀释了104倍，相应平板上接种稀释液的体积为0．1mL。下列说法正确的是（    ） A．A组和B组培养基均以纤维素为唯一碳源 B．图乙平板中应选择C菌种作为发酵工程的优良菌种 C．该实验中也可采用平板划线法计数并分离微生物 D．若⑧过程用到的3个平板菌落数分别为45、46、47，则每克土样中微生物数量为4.6×107个 13．（2026·重庆一中·二模）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验｡主要流程如下图所示：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润､接种菌T，培养一段时间后，用清水淋洗秸秆堆，再在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵｡下列说法正确的是（　　） A．菌T是纤维素分解菌，在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入酚红可鉴别该菌 B．淋洗液的灭菌方法为干热灭菌法，其中的葡萄糖可为酵母菌提供碳源和能源 C．接种酵母菌后应拧紧瓶盖进行发酵，但发酵过程中需适时拧松瓶盖 D．若要在此基础上再进行醋酸发酵，应打开培养瓶瓶盖并降低发酵温度 14．（2026·重庆八中·模拟预测）去除植物源饲料中的单宁（含碳有机物）可提高动物对蛋白质和矿物质等营养成分的利用效率，降低养殖成本。研究发现，家蚕肠道中的微生物可高效降解食物中的单宁，研究人员欲从家蚕肠道中筛选单宁降解菌，筛选过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．培养基甲需添加多种碳源，利于单宁降解菌快速繁殖 B．培养基乙为固体培养基，获得的单菌落可能具有不同的形状、颜色和光泽 C．培养基乙也可用平板划线法对微生物进行分离并计数 D．纯化后的单宁降解菌无需经过安全性评估可直接添加到饲料中 15．（2026·重庆第二外国语学校·模拟预测）禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm处），以下说法不正确的是（　　） A．应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株 B．将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上 C．应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选 D．据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力 16．（2026·重庆康德·模拟预测）重庆永川豆豉相传始创于明崇祯十七年（1644年），由跳石河崔氏偶然发现霉变黄豆香气，后经不断改良形成毛霉发酵工艺，其制作过程如图。永川豆豉具有酱香浓郁，清香回甜，酯香突出，有“味美化渣”之感，于2008年被列入国家级非遗。下列叙述错误的是（    ） A．蒸煮既可灭菌又可破坏蛋白质的空间结构，有利于毛霉的繁殖和分解作用 B．豆豉鲜美味道与毛霉将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸有关 C．装坛放在室外日晒有利于促进毛霉繁殖提高后期发酵效率 D．前期发酵过程中毛霉的增长曲线可能呈S型 17．（2026·重庆大足中学&名校联盟·模拟预测）堆肥是指利用自然界广泛存在的微生物，促进固体废物中可降解有机物转化为稳定腐殖质的生物化学过程。下图1为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线图，下图2表示研究者从养鸡场废弃物堆肥中筛选出某种能高效降解羽毛中角蛋白的嗜热细菌的实验过程。下列说法正确的是（　　） A．图1中b点微生物总数多于a点，但嗜热菌比例高于c点 B．①过程需以羽毛角蛋白为唯一氮源，并将pH调至弱酸性 C．③过程与①相比需额外添加琼脂 D．若②中平板上菌落连成一片，原因可能是涂布前未摇匀菌液 18．（2026·重庆好教育·二诊）嗜热菌是一种生活在高温环境下的微生物，能够产生高分子表面活性剂（一种胺类化合物）。这类表面活性剂具有去除油污、泡沫的能力，常用发酵工程的方法培养嗜热菌生产各种洗涤剂。下列相关叙述正确的是（    ） A．嗜热菌含有表面活性剂基因，可用嗜热菌生产洗涤剂 B．发酵培养基中营养物质的浓度越高，活性剂的产量越高 C．与常规的洗涤剂相比，嗜热菌产生的活性剂可能更耐高温 D．发酵过程中，pH、溶解氧量的改变不会影响嗜热菌产生活性剂 19．（2026·重庆九龙坡育才中学·一模）传统榨菜因含高盐和防腐剂对人类的健康有害，涪陵榨菜集团联合西南大学科研团队，研制出了益生菌榨菜。科研团队从“菌种库”中成功捕获了益生菌，它们不仅可靶向抑制腐败菌生长，还具备解辣、助眠、体重管理等健康功效。该榨菜研发的技术如下表所示，相关说法正确的是（　　） 技术 技术内容 目标益生菌筛选技术 用选择培养基筛选能抑制榨菜腐败的益生菌 益生菌培养技术 益生菌扩大培养 巴氏消毒和益生菌协同技术 巴氏消毒杀灭部分微生物、益生菌代谢产物抑菌 多菌株融合应用技术 将多种不同功能的益生菌进行融合应用 A．筛选目标益生菌时的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基 B．益生菌抑制榨菜中杂菌的主要方式是竞争营养物质 C．多菌株融合需要考虑益生菌的培养条件和菌株之间相互作用 D．将巴氏消毒改进为湿热灭菌可以提高益生菌榨菜的品质 20．（2026·四川外国语大学附属外国语学校·一模）猕猴桃醋生产的基本工艺流程如下，其中①②③表示发酵的三个环节，糖化是将淀粉转化为葡萄糖的过程。 下列叙述错误的是（　　） A．通过蒸煮可以杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物 B．麸曲中曲霉的主要作用是对糖类进行氧化分解 C．环节③需要通入无菌空气 D．①②③都需要控制温度、pH 等条件 21．（2026·重庆八中·模拟预测）传统乙醇生产依赖玉米、甘蔗等作物，研究人员以工业尾气和氨水为主要原料进行液态发酵，实现了利用乙醇梭菌高效生产乙醇的目的并获得了乙醇梭菌单细胞蛋白，相关流程如图所示。以下有关叙述错误的是（    ） A．乙醇梭菌的代谢类型为自养厌氧型 B．乙醇梭菌发酵过程中需要进行搅拌 C．乙醇和单细胞蛋白是乙醇梭菌的次生代谢产物 D．通过该工艺生产乙醇，可以降低人类生态足迹 22．（2026·重庆九龙坡育才中学·一模）工业上常用谷氨酸棒状杆菌作为生产谷氨酸的菌种，如图1是工业生产流程图，图2是菌种数量和谷氨酸产量随生物素浓度的变化过程。相关叙述正确的是（　　） A．可通过人工诱变、基因工程、自然界直接筛选等方式获得高产谷氨酸菌种 B．对菌种扩大培养以缩短生产周期时，最好在生物素浓度为a的条件下进行 C．发酵中 pH 需一直保持酸性，利于获得更多的谷氨酸 D．在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法提取谷氨酸 23．（2026·重庆一中·模拟预测）科研人员通过辐射诱变获得了甲、乙、丙三种不同单一营养缺陷型菌株。为探究其不能合成的营养物质，进行了如下实验：先将滤纸片浸没在下表所示营养物质的组合溶液中，分别编号为A~E，然后再将滤纸片分别放在已接种甲、乙、丙三种菌株的培养基上，观察其生长状况。实验结果如下图所示，下列说法正确的是（　　） 滤纸片 滤纸片所含特殊营养物质 A 1 2 3 4 5 B 1 6 7 8 9 C 2 6 10 11 12 D 5 7 10 12 15 E 4 8 11 13 14 A．接种菌株前需要对接种环进行灼烧灭菌，冷却后再进行接种 B．培养这三种菌株的培养基应为含有各种特殊营养物质的完全培养基 C．甲、乙、丙不能合成的营养物质分别为15、1、5 D．丙的细胞质可能浓度较小，所以在滤纸片A周围产生了抑菌圈 24．（2026·重庆巴蜀中学·模拟预测）比考扎霉素可用于治疗细菌性腹泻，该抗生素是由精氨酸合成缺陷型灰色浅灰链霉菌 （属于细菌）产生。为筛选出能产比考扎霉素的菌种，科研工作者对采自土壤的灰色浅灰链霉菌进行诱变与选育，实验的部分流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．含有琼脂的培养基为②③④，含有精氨酸的培养基为④ B．配制培养基①时应先将pH调至酸性再进行高压蒸汽灭菌 C．进行原位影印操作时必须先将无菌绒布转印至培养基③，再转印至培养基④ D．由培养结果推断，应挑取乙菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素 25．（2026·四川外国语大学附属外国语学校·一模）香蕉枯萎病的微生物防治：香蕉枯萎病对香蕉种植业极具破坏性，由土壤中的尖孢镰刀菌感染香蕉植株所导致。现有菌株S可抑制尖孢镰刀菌，某研究小组拟利用微生物协同作用，优化枯萎病生物防治方案，部分过程如下： （1）【阶段一】将菌株S施于香蕉种植园的土壤中，并分析土壤微生物数量变化情况。若要筛选出土壤中与菌株S有协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量变化趋势是______（下降/上升/不变）的有益菌。 （2）【阶段二】筛选与菌株S有协同作用的有益菌。过程如图，其接菌液并培养后如表。 菌落编号 ① ② ③ ④ 清晰区直径（cm） 0.8 0.5 1.2 0 Ⅰ~Ⅳ环节中，需无菌操作的是______；在第______环节分离土壤中的各种菌；环节Ⅳ中需先涂布的菌株X是______。 （3）为达到阶段二的目的，据表应优先选择的是菌落______。 【阶段三】利用筛选到的有益菌P，分析菌株之间的相互关系，形成表中所列方案。 培养基 预先涂布菌株 点接菌液 实验组1 实验组2 实验组3 固体培养基 菌株X ？ ？ ？ （4）各实验组上接的菌液中应含有的菌株分别是：实验组1______，实验组2______，实验组3______，其中能说明菌株P对菌株S的作用的实验组是______。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题13 发酵工程 6年汇编1年模拟 考点分类 重庆考情 命题规律 考点1 传统发酵技术的应用 2025重庆（1题）、2021重庆（1题） ·情境：围绕果酒、果醋、豆瓣酱等传统食品设题。 ·重点：菌种来源、发酵条件及过程变化。 ·趋势：联系生活实际，强化对微生物代谢和工艺条件的辨析。 考点2 微生物的培养与应用 2024重庆（1题）、2023重庆（1题） ·情境：结合粪便处理、餐厨垃圾资源化等现实问题。 ·重点：微生物筛选、培养、鉴别及应用。 ·趋势：注重实验流程设计，突出环境治理与资源利用。 考点3 发酵工程及其应用 2026重庆（1题） ·情境：以抗生素生产为背景，结合代谢途径设问。 ·重点：菌种选育、培养条件及代谢产物调控。 ·趋势：突出发酵流程与代谢调控的综合分析。 考点1 传统发酵技术的应用 1．（2025·重庆·高考真题）豆瓣酱是我国地方特色调味品，生产豆瓣酱时要将蚕豆瓣制作成豆瓣曲，再添加调料进一步发酵，下列说法错误的是（    ） A．沸水浸泡能杀死蚕豆细胞，减少有机物消耗 B．面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养 C．菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物 D．豆瓣酱的制备主要是利用厌氧微生物发酵 【答案】D 【解析】A、沸水浸泡能使蚕豆细胞死亡，从而减少细胞呼吸等对有机物的消耗，A正确； B、面粉中含有淀粉等营养物质，可为菌种的快速繁殖和生长提供营养，B正确； C、在发酵过程中需要将蛋白质和淀粉等分解，所以菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物，C正确； D、从图中可以看出，在制作豆瓣曲过程中有翻拌操作，且整个过程不是完全密封的，说明主要利用的是好氧微生物发酵，而不是厌氧微生物发酵，D错误。 故选D。 2．（2021·重庆·高考真题）人类很早就能制作果酒，并用果酒进一步发酵生产果醋。 （1）人们利用水果及附着在果皮上的______菌，在18～25℃、无氧条件下酿造果酒；在利用醋酸菌在______条件下，将酒精转化成醋酸酿得果醋。酿造果醋时，得到了醋酸产率较高的醋酸菌群，为进一步纯化获得优良醋酸菌菌种，采用的接种方法是_______________。 （2）先酿制果酒再生产果醋的优势有______（填编号）。 ①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率 ②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率 ③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中 （3）果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见图。 该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有_______________（填写两种）。据图可知，醋酸发酵的最适初始酒精浓度是______；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，此时，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有____________________________（填写两个方面）。 【答案】（1）酵母菌 30～35℃，有氧 稀释涂布平板法/平板划线法 （2）①③ （3）氮源、无机盐、水 6% 适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等 【解析】1、在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最是生长温度为30～35℃。微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。 2、酿制果酒，发酵液中产生的酒精能抑制杂菌的生长。 1、培养基的成分，四大基础营养物质分别是碳源、氮源、水、无机盐。 （1）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30～35℃。微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。 （2）①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率，①正确； ②酿制果酒时形成的醋酸菌膜会造成局部缺氧，导致果醋产率不高，②错误； ③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，③正确。 故选①③。 （3）微生物生长基本营养物质：氮源，碳源，水，无机盐等，题中酒精作为碳源。酒精浓度为6%时，醋酸含量最高，是发酵的最适浓度。提高醋酸含量，可采取的措施有适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等。 考点2 微生物的培养与应用 1．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（    ） A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 【答案】C 【解析】由图可知，所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂。图中②筛选的是不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验。 A、平板划线法无需稀释，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选C。 2．（2023·重庆·高考真题）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（    ）    A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品 B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源 C．X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动 【答案】D 【解析】生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。 A、压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品，有利于实现物质的循环再生和能量的多级利用，A正确； B、添加的木屑有利于堆肥体通气，木屑也可作为某些微生物的碳源，B正确； C、X中需要添加合适的菌种，通过分解有机物才能产生沼气，C正确； D、为保证堆肥体中微生物的活性，可以对堆肥体进行翻动，D错误。 故选D。 考点3 发酵工程及其应用 1．（2026·重庆·高考真题）在发酵生产青霉素的过程中总会有头孢霉素产生，下图为青霉菌的部分代谢途径。结合发酵工程生产青霉素的过程，下列叙述正确的是（     ） A．可通过选育高表达酰基转移酶的青霉菌来阻断头孢霉素的合成 B．扩大培养时，培养基中添加Lys，青霉菌才能繁殖 C．可通过检测培养液中青霉菌数量和青霉素浓度了解发酵进程 D．发酵结束后，将菌体分离干燥可获得纯化的青霉素 【答案】C 【解析】A、由代谢途径可知，IPN在酰基转移酶催化下生成青霉素，在扩环酶催化下生成头孢霉素。高表达酰基转移酶只会使更多IPN流向青霉素合成途径，无法阻断头孢霉素的合成，A错误； B、青霉菌可利用基础营养物质自行合成Lys，扩大培养时无需额外添加Lys青霉菌即可繁殖，B错误； C、发酵过程中，青霉菌的种群数量、产物青霉素的积累浓度可反映发酵的进程，因此可通过检测这两个指标了解发酵情况，C正确； D、青霉素是青霉菌分泌到发酵液中的次级代谢产物，需从发酵液中提取纯化，D错误。 1．（2026·渝西中学·模拟预测）忠县腐乳为重庆非遗特色传统发酵食品，制作流程传承古法工艺：选豆制坯→蒸坯灭菌→接种毛霉→前期发酵→加盐腌制→添加料酒与香辛料→装坛密封进行后期发酵。下列叙述错误的是（　　） A．蒸坯既可杀灭豆腐坯中的杂菌，又能使蛋白质空间结构改变，利于毛霉分泌的蛋白酶发挥分解作用 B．前期发酵阶段，毛霉利用豆腐坯中的有机物生长繁殖，可分泌蛋白酶、脂肪酶等多种水解酶 C．加盐腌制既能析出豆腐坯中水分使坯体变硬，又能抑制杂菌繁殖，降低腐乳腐败变质的风险 D．后期发酵密封坛口，主要是为了创造无氧环境，保证毛霉持续发酵产生大量风味物质 【答案】D 【解析】A、蒸坯的高温处理既能杀灭豆腐坯中的杂菌，又能破坏蛋白质的空间结构，使蛋白质变得伸展松散，更易被毛霉分泌的蛋白酶分解，A正确； B、毛霉为异养生物，前期发酵阶段可利用豆腐坯中的有机物生长繁殖，可分泌蛋白酶分解蛋白质、脂肪酶分解脂肪等多种水解酶，B正确； C、加盐腌制时，高浓度盐溶液可析出豆腐坯中的水分使坯体变硬，同时高渗透压可抑制杂菌繁殖，降低腐乳腐败变质的风险，C正确； D、毛霉是异养需氧型生物，无氧环境下无法正常代谢；且后期发酵时，盐、料酒等已经抑制毛霉生长甚至使其死亡，发酵主要依赖前期毛霉产生的酶继续催化反应，并非毛霉持续发酵，D错误。 2．（2026·重庆南开中学·模拟预测）活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。现欲利用微生物处理染料废水中的活性黑5，具体操作流程如图：从染料废水堆积池的污泥中采集样液，通过培养基Ⅰ和Ⅱ的培养获得优势菌群，然后采用浓度梯度驯化法，进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌，并进行基因表达分析。下列相关叙述错误的是（　　） 注：BVU5是一种分解活性黑5的氧化还原酶 A．培养基Ⅰ从用途上属于选择培养基 B．假单胞杆菌中，BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为溶酶体 C．将细菌从培养基Ⅰ转移到Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌 D．驯化后的假单胞杆菌可能增强了BVU5基因的转录和翻译 【答案】B 【解析】A、本实验的目的是筛选能分解活性黑5的微生物，培养基Ⅰ可以筛选出能分解活性黑5的目的菌，从用途上属于选择培养基，A正确； B、假单胞杆菌是原核生物，仅含有核糖体一种细胞器，不存在溶酶体，BVU5分解活性黑5的场所是细胞质基质，B错误； C、由图可知，培养基Ⅱ上进行平板划线法分离纯化相应的菌落，故将细菌从培养基Ⅰ转移到培养基Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌，C正确； D、BVU5是分解活性黑5的酶，驯化逐步提高活性黑5的浓度，筛选出的强分解能力的假单胞杆菌，可能增强了BVU5基因的转录和翻译，使BVU5的表达量升高，D正确。 3．（2026·重庆第十一中学校教育集团·模拟预测）抗生素是由某些微生物产生的、能抑制其他微生物增殖的物质，在临床抗感染治疗中应用广泛。科研人员从土壤中分离能产生抗生素的目的菌，并进行效果鉴定，相关实验流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．制备培养基时，需用到琼脂、碳源等，采用干热灭菌法灭菌 B．挑选菌落时，周围有透明圈的菌落所产生的抗生素种类相同 C．透明圈与菌落直径的比值越小，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 D．测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 【答案】D 【解析】A、培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，干热灭菌法适用于耐高温、需保持干燥的物品（如玻璃器皿、金属器具），使用干热灭菌会导致培养基水分流失、成分被破坏，A错误； B、抗生素能抑制指示菌S的增殖，会在菌落周围形成透明圈，不同菌种可能产生不同种类的抗生素，均可以抑制S菌生长，因此有透明圈的菌落产生的抗生素种类不一定相同，B错误； C、透明圈与菌落直径的比值越大，说明同等大小的菌落产生的抗生素抑菌范围越大，抑制S菌的效果越好，C错误； D、挑选能产生透明圈的菌落在平板一侧划线，该菌产生的抗生素会扩散到培养基中，测试菌2和5距离产生透明圈菌株的距离近，说明测试菌2、5对该菌产生的抗生素具有抗性，D正确。 4．（2026·重庆西南大学附中·模拟预测）聚苯乙烯（PS）在自然界中难以自然降解，但黄粉虫具有摄食并将PS转化为二氧化碳和虫体脂肪的能力。研究人员测定了黄粉虫肠道中分解PS的降解菌数量（过程如图所示），并从中分离了一株高效降解PS的细菌菌株YT2。相关叙述正确的是（    ） A．图中富集培养时可放在摇床不断振荡，目的是使营养物质和YT2充分接触并增加氧气 B．图中的富集培养基以PS为唯一碳源，其上生长的微生物都能降解PS C．应选择乙组平板进行计数，1mL富集培养液中PS降解菌估算数目是2.8×107个 D．YT2扩大培养时，向培养基中加入抗生素以避免杂菌污染 【答案】C 【解析】A、肠道内的微生物一般是厌氧型的，A错误； B、图中的富集培养基以PS为唯一碳源，其上生长的微生物未必都能降解PS，也可能是可以利用PS降解产生的中间产物的微生物，B错误； C、乙组平板的菌落数量在30~300之间，符合计数的要求，因而应选择乙组平板进行计数，1mL富集培养液中PS降解菌估算数目是（275+285+280）÷3÷0.1×104=2.8×107个，C正确； D、YT2扩大培养时，向培养基中加入抗生素以会导致富集培养失败，因为抗生素也会抑制目的菌的生长，D错误。 5．（2026·重庆·二模）我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵而成，其工业化生产流程如图所示。关于啤酒生产的相关说法，错误的是（    ） A．用赤霉素处理大麦种子可缩短啤酒生产周期 B．焙烤目的是使淀粉酶失活减少营养物质消耗 C．糖浆发酵过程应先通入无菌空气后隔绝空气 D．过滤得到的单细胞蛋白可制作成微生物饲料 【答案】B 【解析】A、用赤霉素处理大麦种子可以促进淀粉酶的形成，从而加速淀粉水解形成葡萄糖，进而加快酒精发酵速度，即缩短啤酒生产周期，A正确； B、焙烤是为了去除大麦种子中的水分，但不能使淀粉酶失活，B错误； C、糖浆发酵过程应先通入无菌空气目的是加速酵母菌的增殖，此后隔绝空气进行酒精发酵（无氧呼吸），C正确； D、发酵结束后过滤得到的单细胞蛋白，即菌体本身可制作成微生物饲料，D正确。 6．（2026·重庆八中·模拟预测）随着餐饮业发展和垃圾分类推进，厨余垃圾产生量激增，资源化、无害化处理尤为迫切，如图为厨余垃圾干式厌氧发酵技术流程示意图，下列叙述正确的是（　　） A．利用干式厌氧发酵技术处理厨余垃圾制备沼气，会加剧大气中的温室效应 B．发酵前将高效降解厨余垃圾的微生物进行扩大培养是该发酵技术的中心环节 C．发酵时连续搅拌的目的是增加溶解氧含量和增大厨余垃圾与微生物的接触面积 D．从设备中分离出的沼渣可作为有机肥还田，促进了物质循环，提高了能量利用率 【答案】D 【解析】A、沼气作为能源替代化石燃料，其碳排放强度更低，可减少温室气体排放，降低大气中的温室效应，A错误； B、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，B错误； C、该过程为厌氧发酵，连续搅拌的目的是增大厨余垃圾与微生物的接触面积，而非增加溶解氧，C错误； D、沼渣作为有机肥还田，其中的有机物可被分解者分解为无机盐供植物利用，促进了物质循环；同时厨余垃圾的能量通过产沼气、沼渣还田等途径实现多级利用，提高了能量利用率，D正确。 7．（2026·重庆西南大学附属中学·模拟预测）ε-聚赖氨酸（ε-PL）是一种优良的天然食品防腐剂，能抑制多种微生物的活性，且在人体内可被分解为赖氨酸。从土壤中分离出能分泌ε-PL的微生物的流程如图所示。ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列叙述正确的是（　　） A．甲培养基是液体培养基用于扩大培养，经过培养Ⅱ得到的都是单菌落 B．步骤Ⅲ采取的接种方法是平板划线法，整个接种过程需要灼烧2次接种环 C．菌落①分解ε-PL的能力比菌落②强，因此选择菌落①进行后续纯培养 D．丁培养基培养一段时间后经过滤、沉淀可从沉淀物中获得ε-PL 【答案】B 【解析】A、甲为液体培养基可用于扩大培养，但培养Ⅱ不一定都得到单菌落，若接种时菌液浓度过高，会出现菌落重叠的情况，A错误； B、据题图信息可知，步骤Ⅲ接种到丙培养基后，经步骤Ⅳ培养所得的菌落分布特征可知，步骤Ⅲ的接种方法为平板划线法中连续划线接种，整个接种过程中取菌种前灼烧接种环，中间连续划线时不用灼烧，划线结束后灼烧接种环，共灼烧2次接种环，B正确； C、题干说明ε-PL可使亚甲基蓝褪色形成透明圈，因此透明圈越大，说明目的菌分泌ε-PL的能力越强。图中菌落①的透明圈大于菌落②，因此菌落①分泌ε-PL能力更强。但菌落①不一定是单菌落，因此还要对菌落①的菌进行分离纯化，C错误； D、ε-PL是目的菌分泌到培养液中的代谢产物，丁是液体培养基，培养后过滤除去菌体，ε-PL存在于滤液（上清液）中，不会在沉淀物中，D错误。 8．（2026·重庆育才中学·模拟预测）清香型小曲白酒以富含淀粉的粮食为原料，辅以绿衣观音土曲（含霉菌、酵母菌、乳酸菌等）进行发酵。关于该发酵过程如下图所示，下列叙述正确的是（    ） A．一般情况下，酵母菌比乳酸菌的物质运输效率高 B．图中的糖化作用指霉菌将淀粉水解为酒精的过程 C．发酵时产生泡沫的多少可用于判断发酵剧烈程度 D．发酵结束后可采用蒸馏法回收酵母以供下一次使用 【答案】C 【解析】A、酵母菌为真核生物，细胞体积远大于原核生物乳酸菌；细胞体积越大，相对表面积（表面积/体积）越小，物质运输效率越低，因此乳酸菌的物质运输效率比酵母菌高，A错误； B、糖化作用是霉菌将淀粉水解为葡萄糖等糖类的过程，酒精是酵母菌无氧呼吸的产物，产生于入缸发酵阶段，不是糖化阶段的产物，B错误； C、发酵过程中酵母菌无氧呼吸会产生CO2，发酵越剧烈，单位时间内产生的CO2量越多，形成的泡沫越多，因此泡沫的多少可用于判断发酵剧烈程度，C正确； D、蒸馏过程需要高温处理，高温会使酵母菌的蛋白质变性失活，无法回收活酵母再次利用，蒸馏的目的是提取发酵产物中的酒精，D错误。 9．（2026·重庆大足中学&七校联盟·模拟预测）汾酒是中国传统名酒，其酿造工艺如图。其中大曲是以大麦、豌豆为原料制成的中温发酵曲，含有霉菌、酵母菌、乳酸菌等多种微生物。下列正确的是（　　） A．大曲中的霉菌产生的淀粉酶可将淀粉分解为葡萄糖，该过程发生在霉菌细胞外 B．常压蒸煮糊化的主要目的是对原料进行灭菌，彻底杀灭原料中的所有微生物 C．发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段进行 D．固态蒸馏将酒精和发酵物进行分离，陶缸陈酿过程中微生物的代谢活动被完全抑制 【答案】A 【解析】A、淀粉酶属于胞外酶，霉菌将淀粉酶分泌到细胞外，将原料中的淀粉分解为葡萄糖后才能被细胞吸收利用，因此该过程发生在霉菌细胞外，A正确； B、常压蒸煮糊化的主要目的是使原料中的淀粉吸水糊化，更易被后续的酶催化分解，且常压蒸煮无法彻底杀灭原料中的芽孢等抗性微生物，不能实现彻底灭菌，B错误； C、发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成是在发酵前期的主发酵阶段完成，后发酵阶段主要进行风味物质的生成与转化，仅消耗少量糖，C错误； D、固态蒸馏利用酒精沸点较低的特点将酒精分离，陶缸陈酿过程中仍有部分耐高浓度酒精的微生物进行缓慢代谢，以形成特殊风味，微生物代谢活动并未被完全抑制，D错误。 10．（2026·重庆育才中学·模拟预测）人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，科研团队利用毕赤酵母生产重组人血清白蛋白（rHSA），构建转基因工程菌并通过发酵罐实现大规模工业化生产。若在发酵罐内的培养液中适时添加甲醇，可提高rHSA的产量。下列叙述不正确的是（　　） A．发酵所需酵母菌可通过基因工程获得，也可通过诱变育种获得 B．可通过抗原—抗体杂交技术检测酵母菌是否成功表达rHSA蛋白 C．27～30℃较适宜酵母菌生长，此时应提供有氧条件促进其增殖 D．发酵过程中添加甲醇，可为工程菌的生长繁殖提供碳源和能量 【答案】A 【解析】A、要获得能表达重组人血清白蛋白（rHSA）的工程菌，需要定向将人HSA基因导入酵母菌，只能通过基因工程实现；诱变育种的原理是基因突变，基因突变具有不定向性，无法定向获得能合成人类特有rHSA的酵母菌，A错误； B、抗原—抗体杂交技术是检测目的基因是否翻译出蛋白质的常用方法，若出现杂交带则说明酵母菌成功表达rHSA蛋白，B正确； C、酵母菌生长的最适温度为27～30℃，酵母菌为兼性厌氧菌，有氧条件下进行有氧呼吸释放大量能量，可促进酵母菌大量增殖，C正确； D、甲醇属于含碳有机物，可被工程菌分解利用，既可以为工程菌生长繁殖提供碳源，也可通过氧化分解释放能量，D正确。 11．（2026·重庆八中·模拟预测）鱼茶的发酵由多种微生物共同参与，其中起主要作用的是乳酸菌。如图是鱼茶发酵过程中不同菌种数量及发酵液pH的变化曲线。下列有关叙述错误的是（　　） A．醋酸菌、酵母菌、乳酸菌的发酵都能影响发酵液的pH B．在发酵时间0-6d内，醋酸菌、酵母菌的数量均先增加后减少 C．在乳酸菌发酵阶段发酵装置的充气口应关闭，以隔绝空气 D．图中酵母菌消失的主要原因是发酵装置内氧气被耗尽 【答案】D 【解析】A、醋酸菌发酵产生醋酸，酵母菌发酵产生二氧化碳，乳酸菌发酵产生乳酸，它们均会导致发酵液的pH变小，A正确； B、由图可知，发酵时间为0~6d时，醋酸菌、酵母菌的数量均先增加后减少，B正确； C、乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，在乳酸菌发酵阶段发酵装置的充气口应关闭，以隔绝空气，C正确； D、酵母菌在无氧条件下可进行无氧呼吸，其在发酵8d后消失的主要原因可能是发酵液pH较低而非氧气被耗尽，D错误。 12．（2026·重庆巴蜀中学校·二模）科研人员欲对土壤微生物进行计数并分离出高效分解纤维素的微生物，部分流程如图甲所示。A组经多次实验后获得了4种优良菌种，接种到含刚果红的鉴别培养基中培养一段时间，形成单菌落，结果如图乙所示。B组⑦过程稀释了104倍，相应平板上接种稀释液的体积为0．1mL。下列说法正确的是（    ） A．A组和B组培养基均以纤维素为唯一碳源 B．图乙平板中应选择C菌种作为发酵工程的优良菌种 C．该实验中也可采用平板划线法计数并分离微生物 D．若⑧过程用到的3个平板菌落数分别为45、46、47，则每克土样中微生物数量为4.6×107个 【答案】D 【解析】A、A组是为了筛选高效分解纤维素的微生物，以纤维素为唯一碳源，B组是对土壤微生物计数，不用以纤维素为唯一碳源，A错误； B、B菌种的透明圈直径与菌落直径比值最大，该比值越大，分解纤维素的能力越强，应选择B菌种作为发酵工程的优良菌种，B错误； C、图中B组的目的是对土壤微生物进行计数，所以该过程采用的接种方法为稀释涂布平板法，C错误； D、过程用到了3个平板，待菌落数稳定时，统计菌落数分别为45、46、47，则该每克土样中微生物数量为（45+46+47）÷3×105÷0.1=4.6×107个，D正确。 13．（2026·重庆一中·二模）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验｡主要流程如下图所示：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润､接种菌T，培养一段时间后，用清水淋洗秸秆堆，再在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵｡下列说法正确的是（　　） A．菌T是纤维素分解菌，在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入酚红可鉴别该菌 B．淋洗液的灭菌方法为干热灭菌法，其中的葡萄糖可为酵母菌提供碳源和能源 C．接种酵母菌后应拧紧瓶盖进行发酵，但发酵过程中需适时拧松瓶盖 D．若要在此基础上再进行醋酸发酵，应打开培养瓶瓶盖并降低发酵温度 【答案】C 【解析】A、纤维素分解菌的鉴别方法：在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红（CR），刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后，复合物消失，会出现以菌落为中心的透明圈。 酚红指示剂通常用于鉴别分解尿素的细菌（细菌分解尿素产生氨，使培养基 pH 升高，酚红变红），A错误； B、干热灭菌法适用于耐高温、需要保持干燥的物品（如玻璃器皿、金属用具）。 淋洗液是液体培养基，灭菌应使用高压蒸汽灭菌法，干热灭菌会导致液体蒸发，无法使用，B错误； C、酒精发酵需要无氧环境，因此接种后需拧紧瓶盖创造无氧条件。 酵母菌无氧呼吸会产生 CO₂，使瓶内压强升高，适时拧松瓶盖可以排出 CO₂，防止瓶内压力过大导致容器炸裂，C正确； D、醋酸菌是好氧菌，因此需要打开瓶盖（同时需无菌纱布过滤空气）。 温度条件：酒精发酵的适宜温度为18~30℃，醋酸发酵的适宜温度为30~35℃，因此需要升高温度，D错误。 14．（2026·重庆八中·模拟预测）去除植物源饲料中的单宁（含碳有机物）可提高动物对蛋白质和矿物质等营养成分的利用效率，降低养殖成本。研究发现，家蚕肠道中的微生物可高效降解食物中的单宁，研究人员欲从家蚕肠道中筛选单宁降解菌，筛选过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．培养基甲需添加多种碳源，利于单宁降解菌快速繁殖 B．培养基乙为固体培养基，获得的单菌落可能具有不同的形状、颜色和光泽 C．培养基乙也可用平板划线法对微生物进行分离并计数 D．纯化后的单宁降解菌无需经过安全性评估可直接添加到饲料中 【答案】B 【解析】A、本实验目的是筛选单宁降解菌，培养基甲为选择培养基，需要以单宁作为唯一碳源，只有能降解单宁的菌可以生长，抑制其他不能利用单宁的微生物生长，A错误； B、培养基乙可以得到单菌落，说明其为固体培养基；家蚕肠道中可能存在多种不同的单宁降解菌，不同菌种形成的菌落特征（形状、颜色、光泽等）不同，B正确； C、平板划线法只能用于微生物的分离纯化，不能用于计数，计数需要用稀释涂布平板法，C错误； D、纯化得到的单宁降解菌，直接添加到饲料前必须经过安全性评估，避免对家蚕产生危害，D错误。 15．（2026·重庆第二外国语学校·模拟预测）禾草灵（FE）是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果（FE特征吸收峰在239nm处），以下说法不正确的是（　　） A．应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株 B．将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上 C．应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选 D．据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力 【答案】B 【解析】选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 选择培养基的制作 （1）利用培养基的特定化学成分分离特定微生物。如以石油是唯一碳源，筛选出能利用石油的微生物生长。 （2）通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可筛选出固氮微生物。 （3）通过某些特殊环境分离微生物。如在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。 （4）依据某些微生物对某种物质的抗性，在培养基中加入此种物质，以抑制对该物质不具抗性的微生物生长，而不影响对该物质具有抗性的微生物生长。如培养基中加入青霉素，可筛选出酵母菌和霉菌。 A、由于只有被除草剂严重污染过的土壤才可能含有高效降解该除草剂的分解菌，所以为了获取能高效降解该除草剂的菌株，应从大量使用除草剂的土壤采集土壤样品，A正确； BC、为了淘汰不能分解FE的微生物，而仅保留能分解FE的菌种，则在配制选择培养基时应以FE作为唯一碳源，应将土壤稀释液接种到以FE为唯一碳源的选择性培养基上进行筛选，B错误，C正确； D、据吸收光谱可知，经W1菌株降解后在239nm处的特征吸收峰明显减弱，说明W1菌株对FE有明显降解能力，D正确。 故选B。 【点睛】理解目的菌株的筛选、接种方法和培养基的配制等相关知识是解答本题的关键。 16．（2026·重庆康德·模拟预测）重庆永川豆豉相传始创于明崇祯十七年（1644年），由跳石河崔氏偶然发现霉变黄豆香气，后经不断改良形成毛霉发酵工艺，其制作过程如图。永川豆豉具有酱香浓郁，清香回甜，酯香突出，有“味美化渣”之感，于2008年被列入国家级非遗。下列叙述错误的是（    ） A．蒸煮既可灭菌又可破坏蛋白质的空间结构，有利于毛霉的繁殖和分解作用 B．豆豉鲜美味道与毛霉将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸有关 C．装坛放在室外日晒有利于促进毛霉繁殖提高后期发酵效率 D．前期发酵过程中毛霉的增长曲线可能呈S型 【答案】C 【解析】A、蒸煮黄豆既能杀灭杂菌，又能使黄豆中的蛋白质变性、空间结构被破坏，更有利于毛霉分解利用营养物质，利于毛霉繁殖，A正确； B、毛霉可分泌蛋白酶，将大豆中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，这些小分子产物是豆豉美味的来源，B正确； C、装坛前已经加入高浓度食盐和白酒，二者都会抑制毛霉的生长繁殖，室外日晒能为发酵提供所需温度，并非促进毛霉繁殖，C错误； D、前期发酵时，发酵环境的营养、空间都是有限的，毛霉的种群增长曲线符合S型增长的特点，D正确。 故选C。 17．（2026·重庆大足中学&名校联盟·模拟预测）堆肥是指利用自然界广泛存在的微生物，促进固体废物中可降解有机物转化为稳定腐殖质的生物化学过程。下图1为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线图，下图2表示研究者从养鸡场废弃物堆肥中筛选出某种能高效降解羽毛中角蛋白的嗜热细菌的实验过程。下列说法正确的是（　　） A．图1中b点微生物总数多于a点，但嗜热菌比例高于c点 B．①过程需以羽毛角蛋白为唯一氮源，并将pH调至弱酸性 C．③过程与①相比需额外添加琼脂 D．若②中平板上菌落连成一片，原因可能是涂布前未摇匀菌液 【答案】D 【解析】选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长。 A、分析图可知，a点温度较低且微生物的分解作用刚刚开始，此时堆肥材料中的微生物的数量相对较少，b点时经过一段时间的代谢和增殖，b点处微生物的数量比a点多，b点到c点过程中，堆肥温度逐渐升高，并达到80℃左右，该温度条件下不耐热的微生物大量死亡，所以c点时嗜热菌比例高于b点，A错误； B、图二是为了筛选能高效降解羽毛中角蛋白的嗜热细菌，所以图二中①所使用的培养基是以角蛋白为唯一氮源的液体培养基，细细菌的生长条件一般是中性或弱碱性，B错误； C、③过程是扩大培养，与①相比不需额外添加琼脂，C错误； D、平板上菌落连城一片可能是涂布前未稀释菌液也可能是涂布前未摇匀菌液，导致所吸菌液中菌浓度过高，D正确。 故选D。 18．（2026·重庆好教育·二诊）嗜热菌是一种生活在高温环境下的微生物，能够产生高分子表面活性剂（一种胺类化合物）。这类表面活性剂具有去除油污、泡沫的能力，常用发酵工程的方法培养嗜热菌生产各种洗涤剂。下列相关叙述正确的是（    ） A．嗜热菌含有表面活性剂基因，可用嗜热菌生产洗涤剂 B．发酵培养基中营养物质的浓度越高，活性剂的产量越高 C．与常规的洗涤剂相比，嗜热菌产生的活性剂可能更耐高温 D．发酵过程中，pH、溶解氧量的改变不会影响嗜热菌产生活性剂 【答案】C 【解析】A、基因表达的产物是RNA或蛋白质，表面活性剂是一种胺类化合物，可见嗜热菌含有控制表面活性剂合成的相关基因，而不是表面活性剂基因，A错误； B、若发酵培养基中营养物质浓度过高，会使培养基渗透压过高，导致嗜热菌细胞失水，代谢受抑制甚至死亡，反而会降低活性剂的产量，并非浓度越高产量越高，B错误； C、嗜热菌本身生活在高温环境中，其产生的表面活性剂需要在高温下保持功能稳定才能适应嗜热菌的代谢活动，因此与常规洗涤剂相比，该活性剂可能更耐高温，C正确； D、pH会影响嗜热菌胞内酶的活性，溶解氧量会影响嗜热菌的呼吸作用，二者改变均会影响嗜热菌的正常代谢，进而影响表面活性剂的产量，D错误。 故选C。 19．（2026·重庆九龙坡育才中学·一模）传统榨菜因含高盐和防腐剂对人类的健康有害，涪陵榨菜集团联合西南大学科研团队，研制出了益生菌榨菜。科研团队从“菌种库”中成功捕获了益生菌，它们不仅可靶向抑制腐败菌生长，还具备解辣、助眠、体重管理等健康功效。该榨菜研发的技术如下表所示，相关说法正确的是（　　） 技术 技术内容 目标益生菌筛选技术 用选择培养基筛选能抑制榨菜腐败的益生菌 益生菌培养技术 益生菌扩大培养 巴氏消毒和益生菌协同技术 巴氏消毒杀灭部分微生物、益生菌代谢产物抑菌 多菌株融合应用技术 将多种不同功能的益生菌进行融合应用 A．筛选目标益生菌时的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基 B．益生菌抑制榨菜中杂菌的主要方式是竞争营养物质 C．多菌株融合需要考虑益生菌的培养条件和菌株之间相互作用 D．将巴氏消毒改进为湿热灭菌可以提高益生菌榨菜的品质 【答案】C 【解析】A、筛选目标益生菌时使用的是选择培养基（根据特定功能筛选），而牛肉膏蛋白胨培养基是基础培养基（适用于多种微生物生长），A错误； B、益生菌代谢产物抑菌，说明其抑制杂菌的主要方式是分泌抑菌物质（如抗生素），而非单纯竞争营养物质，B错误； C、多菌株融合需保证不同菌株在相同培养条件（如pH、温度）下能共存，且需避免种间竞争或拮抗作用，否则影响功能发挥，C正确； D、巴氏消毒（60-70℃）可杀死部分微生物但保留益生菌活性，而湿热灭菌（121℃高压）会杀死所有微生物（包括益生菌），破坏产品特性，D错误。 故选C。 20．（2026·四川外国语大学附属外国语学校·一模）猕猴桃醋生产的基本工艺流程如下，其中①②③表示发酵的三个环节，糖化是将淀粉转化为葡萄糖的过程。 下列叙述错误的是（　　） A．通过蒸煮可以杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物 B．麸曲中曲霉的主要作用是对糖类进行氧化分解 C．环节③需要通入无菌空气 D．①②③都需要控制温度、pH 等条件 【答案】B 【解析】A、蒸煮过程中高温可以破坏微生物的细胞结构等，从而杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物，A正确； B、麸曲中的曲霉主要作用是将淀粉等多糖分解为葡萄糖等单糖，而不是对糖类进行氧化分解，B错误； C、环节③是醋酸发酵，醋酸菌是好氧菌，所以需要通入无菌空气，C正确； D、①糖化过程、②酒精发酵、③醋酸发酵都需要适宜的温度和pH等条件来保证微生物的正常生长和代谢，D正确。 故选B。 21．（2026·重庆八中·模拟预测）传统乙醇生产依赖玉米、甘蔗等作物，研究人员以工业尾气和氨水为主要原料进行液态发酵，实现了利用乙醇梭菌高效生产乙醇的目的并获得了乙醇梭菌单细胞蛋白，相关流程如图所示。以下有关叙述错误的是（    ） A．乙醇梭菌的代谢类型为自养厌氧型 B．乙醇梭菌发酵过程中需要进行搅拌 C．乙醇和单细胞蛋白是乙醇梭菌的次生代谢产物 D．通过该工艺生产乙醇，可以降低人类生态足迹 【答案】C 【解析】A、乙醇梭菌可以利用工业尾气中的CO、CO₂等无机物作为碳源，且发酵过程为厌氧发酵，因此其代谢类型为自养厌氧型，A正确； B、发酵过程中搅拌的目的是让菌体与底物（原料气体、营养物质）充分接触，提高发酵效率，厌氧发酵也需要搅拌，B正确； C、次生代谢产物是微生物生长发育到一定阶段才产生的、不是生长繁殖必需的产物，乙醇为次生代谢产物，而单细胞蛋白本质是乙醇梭菌本身，C错误； D、传统乙醇生产需要消耗玉米、甘蔗等作物，该工艺利用工业尾气生产乙醇，既节约了耕地资源，还能利用工业废气，因此可以降低人类生态足迹，D正确。 22．（2026·重庆九龙坡育才中学·一模）工业上常用谷氨酸棒状杆菌作为生产谷氨酸的菌种，如图1是工业生产流程图，图2是菌种数量和谷氨酸产量随生物素浓度的变化过程。相关叙述正确的是（　　） A．可通过人工诱变、基因工程、自然界直接筛选等方式获得高产谷氨酸菌种 B．对菌种扩大培养以缩短生产周期时，最好在生物素浓度为a的条件下进行 C．发酵中 pH 需一直保持酸性，利于获得更多的谷氨酸 D．在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法提取谷氨酸 【答案】A 【解析】A、对菌种的选育可以从自然界中直接获取，也可以借助诱变育种和基因工程技术获得人们想要的菌种，只不过从自然界中直接筛选的概率较低，A正确； B、扩大培养的目的是获得大量菌体，应选择细菌数量最多的条件（生物素浓度更高的区间），而生物素浓度为 a 时谷氨酸产量较高，但细菌数量并非最高，B错误； C、发酵后期需调pH至酸性，使谷氨酸析出（图1中 “pH调至酸性，使谷氨酸晶体析出”），但发酵过程中在中性和弱碱性的条件下才会积累谷氨酸，C错误； D、谷氨酸是小分子有机物，发酵结束后可根据产物的性质适当的提取、分离和纯化来提取，D错误。 故选A。 23．（2026·重庆一中·模拟预测）科研人员通过辐射诱变获得了甲、乙、丙三种不同单一营养缺陷型菌株。为探究其不能合成的营养物质，进行了如下实验：先将滤纸片浸没在下表所示营养物质的组合溶液中，分别编号为A~E，然后再将滤纸片分别放在已接种甲、乙、丙三种菌株的培养基上，观察其生长状况。实验结果如下图所示，下列说法正确的是（　　） 滤纸片 滤纸片所含特殊营养物质 A 1 2 3 4 5 B 1 6 7 8 9 C 2 6 10 11 12 D 5 7 10 12 15 E 4 8 11 13 14 A．接种菌株前需要对接种环进行灼烧灭菌，冷却后再进行接种 B．培养这三种菌株的培养基应为含有各种特殊营养物质的完全培养基 C．甲、乙、丙不能合成的营养物质分别为15、1、5 D．丙的细胞质可能浓度较小，所以在滤纸片A周围产生了抑菌圈 【答案】D 【解析】A、该实验需要将微生物均匀涂布在培养基中，所以需要使用涂布器，不能用接种环，A错误； B、本实验的目的是探究菌株不能合成的营养物质，因此培养基需要配制不含这些特殊营养物质的基本培养基：如果培养基已经含有各种特殊营养，所有菌株都能正常生长，无法通过滤纸片的营养区分缺陷类型，B错误； C、三种都是单一营养缺陷型，即每种只缺少一种营养，滤纸片周围生长说明该滤纸片含有菌株缺少的营养，推导如下：甲仅D周围生长：D的成分为5、7、10、12、15，其中只有15是仅D含有、其他滤纸片都不含的营养，因此甲不能合成15；乙在A、B周围生长：A含1，B含1，C、D、E都不含1，因此乙不能合成1；丙菌株：仅A滤纸片周围生长。A独有物质3，其他滤纸片不含3，说明丙缺3，C错误； D、丙的细胞质可能浓度较小，滤纸片上物质浓度过大，使得细胞失活，当物质渗透到滤纸片周围的培养基中，物质的浓度降低，菌可以生长，所以在滤纸片A周围产生了抑菌圈，D正确。 24．（2026·重庆巴蜀中学·模拟预测）比考扎霉素可用于治疗细菌性腹泻，该抗生素是由精氨酸合成缺陷型灰色浅灰链霉菌 （属于细菌）产生。为筛选出能产比考扎霉素的菌种，科研工作者对采自土壤的灰色浅灰链霉菌进行诱变与选育，实验的部分流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．含有琼脂的培养基为②③④，含有精氨酸的培养基为④ B．配制培养基①时应先将pH调至酸性再进行高压蒸汽灭菌 C．进行原位影印操作时必须先将无菌绒布转印至培养基③，再转印至培养基④ D．由培养结果推断，应挑取乙菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素 【答案】C 【解析】A、②③④为固体培养基，固体培养基需要加入琼脂作为凝固剂，该灰色浅灰链霉菌是精氨酸合成缺陷型，自身不能合成精氨酸，要筛选产比考扎霉素的菌株，需在培养基中添加精氨酸，这样缺陷型放线菌才能生长，所以含有精氨酸的培养基为①②④，A错误； B、配制该灰色浅灰链霉菌（细菌）培养基时应先将pH调至中性或弱碱性再进行高压蒸汽灭菌，B错误； C、为了防止将特定营养成分带入培养基，故进行原位影印操作时，先将无菌绒布转印至培养基③（缺乏精氨酸的培养基），再转印至培养基④（含有精氨酸的培养基），C正 确； D、甲菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明甲菌落只能生活在完全培养基中， 不能生活在缺精氨酸的完全培养基中，即甲菌落是精氨酸合成缺陷型，可能会产生比考扎霉素，而乙菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无精氨酸均可生存，所以乙菌落不是精氨酸合成缺陷型，不能产生比考扎霉素，故应挑取甲菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素，D错误。 25．（2026·四川外国语大学附属外国语学校·一模）香蕉枯萎病的微生物防治：香蕉枯萎病对香蕉种植业极具破坏性，由土壤中的尖孢镰刀菌感染香蕉植株所导致。现有菌株S可抑制尖孢镰刀菌，某研究小组拟利用微生物协同作用，优化枯萎病生物防治方案，部分过程如下： （1）【阶段一】将菌株S施于香蕉种植园的土壤中，并分析土壤微生物数量变化情况。若要筛选出土壤中与菌株S有协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量变化趋势是______（下降/上升/不变）的有益菌。 （2）【阶段二】筛选与菌株S有协同作用的有益菌。过程如图，其接菌液并培养后如表。 菌落编号 ① ② ③ ④ 清晰区直径（cm） 0.8 0.5 1.2 0 Ⅰ~Ⅳ环节中，需无菌操作的是______；在第______环节分离土壤中的各种菌；环节Ⅳ中需先涂布的菌株X是______。 （3）为达到阶段二的目的，据表应优先选择的是菌落______。 【阶段三】利用筛选到的有益菌P，分析菌株之间的相互关系，形成表中所列方案。 培养基 预先涂布菌株 点接菌液 实验组1 实验组2 实验组3 固体培养基 菌株X ？ ？ ？ （4）各实验组上接的菌液中应含有的菌株分别是：实验组1______，实验组2______，实验组3______，其中能说明菌株P对菌株S的作用的实验组是______。 【答案】（1）上升 （2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ Ⅱ、Ⅲ 尖孢镰刀菌 （3）③ （4）菌株P 菌株S 菌株P和菌株S 实验组2和实验组3 【解析】分析题图，图中I是将土壤样品加入无菌水，制成稀释液，进行扩大培养，Ⅱ是将菌液接种于平板，Ⅲ是选择优良菌种进行纯化，IV是进行鉴定选择菌株。 （1）如果该菌和菌株S有协同作用，则施加菌株S后，该菌数量会上升。故若要筛选出土壤中与菌株S存在协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量上升的有益菌。 （2）实验室中培养微生物的关键是防止杂菌污染，获得纯净的培养物，故图中过程Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ均在实验室完成，均需要无菌操作，在点燃的酒精灯附近，避免杂菌污染；在环节Ⅱ、III中，将菌液涂布在固体培养基表面即可分离到土壤中的各种菌；该实验的目的是选择出与菌株S有协同作用的有益菌，而菌株S能抑制尖孢镰刀菌生长，所以为筛选出有益菌，则预先涂布的菌株X是尖孢镰刀菌。 （3）为达到阶段二的目的，据表应优先选择清晰区直径较大，对应③。 （4）为进一步分析菌株S和菌株P之间的相互关系，对照组只接种尖孢镰刀菌，实验组1只接种菌株P，实验组2只接种菌株S，实验组3接种菌株P和菌株S，实验组1和实验组3均起到对照组的作用，其中能说明菌株P对菌株S的作用的两个实验组是实验组2（只接种菌株S） 和实验组3（接种菌株P和菌株S），通过对比这两组平板上菌落周围的清晰区直径即可判断菌株P对菌株S的作用。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $